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人子宫颈癌基因HCCR-2反义真核表达载体的构建及鉴定 被引量:5
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作者 郭军 房殿春 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2007年第1期25-27,共3页
目的克隆人子宫癌基因HCCR-2并构建其反义真核表达载体。方法从人肝癌细胞株HepG2提取RNA,利用RT-PCR方法,克隆出一包括HCCR-2编码区的长约1kb的片段,并将其与T载体连接,测序证实无误后,用SalⅠ、SacⅡ双酶切重组T载体,然后将该片段反... 目的克隆人子宫癌基因HCCR-2并构建其反义真核表达载体。方法从人肝癌细胞株HepG2提取RNA,利用RT-PCR方法,克隆出一包括HCCR-2编码区的长约1kb的片段,并将其与T载体连接,测序证实无误后,用SalⅠ、SacⅡ双酶切重组T载体,然后将该片段反向插入真核表达载体pIRES2-EGFP的多克隆位点,最后对重组真核表达载体进行双酶切鉴定。结果RT-PCR扩增出一长约1kb的HCCR-2片段,琼脂糖凝胶电泳显示目的片段成功反向连接到pIRES2-EGFP载体上。结论成功克隆了HCCR-2基因并构建了其反义真核表达载体pIRES2-EGFP/HCCR-2(-)。 展开更多
关键词 人子宫癌基因 HCCR-2 基因
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HCCR-2基因沉默后HepG2肝癌细胞形态变化 被引量:1
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作者 郭军 房殿春 +3 位作者 范宗江 杨云丽 张树荣 刘苗 《昆明医学院学报》 2010年第10期27-30,共4页
目的研究HCCR-2基因表达沉默后肝癌细胞HepG2形态学的变化.方法将经测序证实的干扰质粒用脂质体法转染HepG2细胞,经G418持续压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系.分别用光镜、HE染色、荧光显微镜、透射电镜观察HepG2细胞转染前后... 目的研究HCCR-2基因表达沉默后肝癌细胞HepG2形态学的变化.方法将经测序证实的干扰质粒用脂质体法转染HepG2细胞,经G418持续压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系.分别用光镜、HE染色、荧光显微镜、透射电镜观察HepG2细胞转染前后形态学的改变.结果与亲本细胞相比,HCCR-2沉默后,HepG2细胞呈梭形,核浆比例有所下降,透射电镜下可观察到细胞核收缩变圆,胞质浓缩,细胞核中染色质边集、皱缩,密度增高.结论 RNAi介导的HCCR-2基因沉默可以促进HepG2细胞形态的改变及凋亡. 展开更多
关键词 人子宫癌基因-2 RNA干扰 肝癌
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Effects of trichostatin A(TSA)on growth and gene expression in HeLa cells 被引量:1
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作者 Guangyong Qin Huasheng Fang Yuxiao Li Fengqiu Zhang 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2008年第5期304-308,共5页
Objective: To investigate the expressions of p53, RB1, Fas, c-fos, Ras, EGFR mRNA in human cervical cancer (HeLa) cell in response to the trichostatin A (TSA). Methods: We took count of HeLa cells in different i... Objective: To investigate the expressions of p53, RB1, Fas, c-fos, Ras, EGFR mRNA in human cervical cancer (HeLa) cell in response to the trichostatin A (TSA). Methods: We took count of HeLa cells in different incubation times with TSA (0.2μm/L). The result indicated that HeLa cells changed evidently when HeLa cells were incubated for 36 h. Then, we investigated the genes expression (mRNA levels) of HeLa cells after treatment for 36 h using SYBR green real-time PCR. Results: We demonstrated that trichostatin A (TSA) could make human cervical cancer (HeLa) cell morphological change and induce HeLa cell apoptosis. Furthermore, the data suggest that TSA-induced down-regulation of p53, RB1, Fas, but upregulated c-fos gene expression after treatment for 36 h, and Ras, EGFR did not show obvious response to TSA treatments. Conclusion: TSA has different effects on gene expression. 展开更多
关键词 TSA HeLa cell real-time PCR gene expression
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