蟾蜍灵诱导人宫颈癌C33A细胞自噬作用的机理研究

目的:探讨蟾蜍灵诱导人宫颈癌C33A细胞自噬的作用。方法:不同浓度梯度的蟾蜍灵处理人宫颈癌C33A细胞,选用CCK-8法检测蟾蜍灵对人宫颈癌C33A细胞的杀伤作用。透射电镜观察给药后C33A细胞的自噬现象。流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平,蛋白免疫印迹法检测自噬LC3蛋白表达及相关信号通路JNK、p-JNK蛋白表达。结果:蟾蜍灵对人宫颈癌C33A细胞的生长抑制作用呈时间-剂量依赖性。蟾蜍灵给药后可诱导C33A细胞发生自噬,蛋白印迹实验结果表明LC3蛋白表达随药物浓度升高而增加。蟾蜍灵诱导C33A细胞自噬发生与其促ROS水平升高激活了JNK信号通路有关。结论:蟾蜍灵诱导C33A细胞自噬的机制可能与通过ROS/JNK通路促进细胞自噬有关,以此发挥其抗肿瘤的作用。

槲皮素对宫颈癌细胞C33A增殖和凋亡的影响

目的观察槲皮素对人宫颈癌细胞C33A增殖和凋亡的影响,初步探讨其相关作用机制。方法用不同浓度槲皮素(空白对照、20、40、80μmol/L),顺铂(空白对照、5、10、15、20μg/mL)以及两者联合(槲皮素40μmol/L+顺铂10μg/mL)分别作用于C33A细胞24 h和48 h后,噻唑蓝(MTT法)检测细胞活力的变化;流式细胞术检测槲皮素对C33A细胞周期的影响;Western blot检测槲皮素对C33A细胞Cyclin D1、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达的影响。结果 MTT结果显示,经过槲皮素处理24 h后,各组细胞活力分别为86.92±3.953)%(20μmol/L组)、(66.54±3.932)%(40μmol/L组)和(52.21±2.970)%(80μmol/L组),均低于空白对照组的(98.35±1.230)%;经过槲皮素处理48 h后,各组细胞活力分别为(65.19±7.071)%(20μmol/L组)、(47.04±8.881)%(40μmol/L组)和(29.71±6.505)%(80μmol/L组),均低于空白对照组的(96.97±1.788)%。;此外,槲皮素40μmol/L+顺铂10μg/mL联合作用于C33A细胞24h后,细胞活力下降为(31.12±2.835)%;48 h后,细胞活力下降为(17.86±3.182)%,同空白对照组相比均出现了明显的下降,(31.12±2.835)%;48 h后,细胞活力下降为(17.86±3.182)%(P<0.05)。细胞周期检测结果显示,槲皮素可增加C33A细胞G0/G1期数量,减少S期数量。Western blot结果显示,槲皮素可下调C33A细胞Cyclin D1蛋白的表达,还可上调Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达。结论槲皮素通过下调Cyclin D1蛋白的表达可以抑制C33A细胞的活力和增殖,槲皮素通过上调Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达,可以诱导C33A细胞的凋亡。

毛萼乙素通过调节STAT3抑制宫颈癌C-33A细胞survivin的表达

目的观察毛萼乙素(Eriocalyxin B,ERB)对于宫颈癌C-33A细胞增殖的调节作用和对survivin表达的调控作用,及其相关的分子机制。方法使用不同浓度的毛萼乙素(0μM、1μM和20μM)对宫颈癌C-33A细胞进行干预。在不同时间点(0h、24h和48h)使用MTT法对C-33A细胞活性进行测定。在干预48h后,采用qPCR对C-33A细胞survivin mRNA的表达水平进行检测。采用western blot对C-33A细胞survivin蛋白表达水平和STAT3磷酸化水平进行检测。结果与0μM干预组相比,给予毛萼乙素干预的宫颈癌C-33A细胞活性呈时间依赖性和浓度依赖性下降,差异均有显著统计学意义(P均<0.05)。在毛萼乙素干预48h后,宫颈癌C-33A细胞survivin mRNA和蛋白的表达水平及STAT3的活化水平呈浓度依赖性降低,差异均有显著统计学意义(P均<0.05)。结论毛萼乙素可能可以通过下调宫颈癌C-33A细胞survivin的表达对肿瘤细胞的增殖产生抑制作用,该机制与降低STAT3的活化密切相关,且为毛萼乙素应用于宫颈癌及其他恶性肿瘤的临床治疗奠定了一定的实验基础。

MicroRNA-33a靶向Twist1调节宫颈癌细胞的侵袭

目的:研究转录因子Twist1在宫颈癌组织中的表达及其在宫颈癌细胞进展过程中的作用。方法:免疫组织化学检测32对临床宫颈癌组织及正常宫颈组织中Twist1的表达情况,并运用RNA干扰技术沉默宫颈癌He La细胞内Twist1后检测细胞的侵袭能力以及侵袭相关基因表达的变化;采用Pearson相关性检验分析Twist1与micro RNA-33a(mi R-33a)在宫颈癌组织内的关系,并分析mi R-33a对Twist1的调节关系及其对细胞侵袭能力的影响。结果:Twist1在宫颈癌组织和正常宫颈组织中表达的阳性率分别为75.0%(24/32)和21.9%(7/32),二者表达差异具有统计学意义(P<0.05);Twist1 sh RNA能显著减低He La细胞的体外侵袭能力。宫颈癌组织中mi R-33a的表达较正常组织减低(P<0.05),并与Twist1呈负相关(r=-0.661,P<0.05);而宫颈癌细胞内过表达mi R-33a可减低Tiwst1的表达(P<0.05),并减弱细胞的体外侵袭能力。结论:Twist1在宫颈癌的侵袭转移过程中发挥着重要的作用,mi R-33a为上游调控Twist1的表达及细胞侵袭能力的抑癌基因。

HPV16 E6-G350基因表达促进宫颈癌C33A细胞增殖且抑制凋亡

目的分析HPV16 E6基因致病多态性位点的功能及其与宫颈癌发展的关系。方法在宫颈癌C33A细胞中分别稳定转染HPV16 E6原型T295/T350-GV230和HPV16 E6突变型T295/G350-GV230表达质粒,通过间接免疫荧光实验、CCK8增殖实验、细胞平板克隆实验、流式细胞仪检测HPV16 E6 T295/T350和T295/G350不同多态性位点对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响。结果采用SPSS17.0统计软件进行数据的统计学处理,以P<0.05为差异有统计学意义。HPV16 E6 T295/T350和HPV16 E6 T295/G350突变促进宫颈癌C33A细胞的增殖,抑制凋亡,并且T295/G350突变型作用强于T295/T350原型,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 HPV16 E6 T295/T350欧洲原型和HPV16 E6 T295/G350欧洲突变型均可以促进宫颈癌细胞的增殖,抑制凋亡,HPV16 E6 T295/G350欧洲突变型的促癌作用比HPV16 E6 T295/T350欧洲原型强。

LINC00958通过上调VEGF-C表达促进宫颈癌细胞的恶性生物学行为及小鼠模型的淋巴结转移

目的:探讨LINC00958/血管内皮生长因子C(VEGF-C)信号通路在宫颈癌的淋巴管生成和淋巴转移中的作用。方法:从2020年9月至2022年9月期间在河南省人民医院接受手术的患者中收集了42例宫颈癌组织标本,通过qPCR检测宫颈癌组织和宫颈癌细胞(Hela、C33A、SiHa、Caski)中LINC00958的表达情况。将LINC00958过表达载体(LINC00958组)或对照载体(CMV组)转染Caski细胞,敲减LINC00958(shLINC00958组)、VEGF-C(shVEGF-C组)的shRNA序列或阴性对照shRNA(shNC组)转染SiHa细胞。分别通过CCK-8法、Transwell实验检测过表达或敲减LINC00958对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。观察转染后细胞的培养上清液对人淋巴管内皮细胞(HLEC)淋巴管形成能力的影响。建立小鼠腘淋巴结转移模型,观察过表达LINC00958或同时敲减VEGF-C对宫颈癌淋巴结转移的影响。结果:LINC00958在宫颈癌组织中呈高表达(P<0.001),高水平的LINC00958与大肿瘤、晚期肿瘤分级、浸润深度和淋巴转移有关联(P<0.05或P<0.01)。与正常人宫颈上皮细胞ende1617相比,宫颈癌细胞中LINC00958水平均显著升高(P<0.01或P<0.001)。shLINC00958组SiHa细胞的增殖、迁移、侵袭能力及其培养上清液的促HLEC淋巴管形成能力均显著低于shNC组(P<0.05、P<0.01或P<0.001),LINC00958组Caski细胞的增殖、迁移、侵袭能力及其培养上清液的促HLEC淋巴管形成能力显著高于CMV组(P<0.05、P<0.01或P<0.001)。通过RNA下拉、RNA免疫沉淀实验发现宫颈癌细胞中LINC00958能够特异性结合VEGF-C。LINC00958+shVEGF-C组Caski细胞的增殖、迁移、侵袭能力及其培养上清液的促淋巴管形成能力显著低于LINC00958组(P<0.01或P<0.001);在小鼠腘淋巴结转移模型中,LINC00958+shVEGF-C组中小鼠腘窝淋巴结的体积和VEGF-C蛋白、N-cadherin蛋白以及LYVE-1的阳性细胞比例均显著低于LINC00958组(均P<0.001)。结论:LINC00958通过直接与VEGF-C蛋白相互作用增强宫颈癌细胞的增殖、侵袭、淋巴管生成能力,促进小鼠腘淋巴结转移模型的淋巴结转移。

紫草素影响Let-7c的表达调控宫颈癌细胞C-33A生物学特性的研究

目的研究紫草素通过影响Let-7c的表达对宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法采用qPCR检测宫颈癌组织和正常宫颈组织,宫颈癌细胞C-33A和正常宫颈细胞Ect1/E6E7中Let-7c的表达水平。以不同浓度的紫草素干预C-33A细胞,采用MTT法检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力,qPCR检测细胞中Let-7c的表达水平。一组C-33A细胞通过细胞转染法上调Let-7c的表达,另一组C-33A细胞通过转染Let-7c inhibitor后施加紫草素干预,然后均以同样的方法检测C-33A细胞增殖、侵袭和迁移能力。构建宫颈癌C-33A细胞裸鼠移植瘤模型,并予瘤内注射Let-7c inhibitor及紫草素,处理28 d后处死,称取瘤重。结果Let-7c在宫颈癌组织和细胞中的表达显著低于正常宫颈组织和细胞(P<0.05)。紫草素可呈浓度依赖性地抑制C-33A细胞增殖、侵袭和迁移的能力(P<0.05);能够促进C-33A细胞中Let-7c的表达(P<0.05),具有一定的浓度依赖关系。上调Let-7c的表达可抑制C-33A细胞增殖、侵袭和迁移的能力(P<0.05)。紫草素能够回调由anti-Let-7c导致的细胞增殖、侵袭和迁移能力的升高(P<0.05)。紫草素可抑制anti-Let-7c对肿瘤生长的促进作用(P<0.05)。结论紫草素能够通过上调Let-7c的表达抑制宫颈癌细胞的增殖、侵袭和迁移。

溶瘤病毒M1诱导宫颈癌细胞C-33A凋亡的作用及机制

目的:研究溶瘤病毒M1(简称“M1病毒”)诱导宫颈癌细胞C-33A凋亡的作用及机制。方法:采用MTT法检测不同滴度(0、0.001、0.01、0.1、1、10 PFU/cell)M1病毒处理后C-33A细胞的存活率;将C-33A细胞分为对照组(0 PFU/cell)和M1病毒低、中、高剂量组(0.001、0.01、0.1 PFU/cell),加入相应滴度病毒,培养48 h后,采用流式细胞仪检测细胞的凋亡率和感染率,采用Western blot法检测细胞中C/EBP同源蛋白(CHOP)、胱天蛋白酶12(caspase-12)、caspase-3、活化的caspase-3(cleaved-caspase-3)的表达水平。结果:经不同滴度M1病毒处理后,C-33A细胞存活率均显著降低(P<0.01),且呈剂量依赖趋势。与对照组比较,M1病毒各剂量组细胞的凋亡率和感染率以及中、高剂量组细胞中CHOP、caspase-12、cleaved-caspase-3(中剂量组除外)蛋白的表达水平均显著升高(P<0.01)。结论:M1病毒可诱导宫颈癌细胞C-33A的凋亡,其作用机制可能与激活内质网应激通路有关。

宫颈癌组织及细胞株中长链非编码RNA CCAT1的表达水平及意义

目的:研究宫颈癌组织及细胞株中长链非编码RNA肠癌相关转录因子1(CCAT1)的表达水平及意义。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测2015年1月至2017年6月接受宫颈癌根治术的48例宫颈癌患者的癌组织、对应癌旁正常组织(距癌<3 cm)以及人正常宫颈鳞状细胞系ECT1/E6E7、宫颈癌细胞系Hela、C33A中CCAT1的表达,并分析其临床意义;应用小分子RNA(siRNA)分别转染人宫颈癌细胞系Hela、C33A,构建CCAT1低表达细胞系,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测CCAT1对人宫颈癌细胞增殖的影响,流式细胞仪检测各组细胞周期,蛋白印迹(Western blot)法检测CCAT1对人宫颈癌细胞中RAS相关区域家族1A蛋白(RASSF1A)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达的影响。结果:与癌旁正常组织相比,人宫颈癌组织中CCAT1的表达显著升高(P<0.05);与正常宫颈细胞ECT1/E6E7相比,宫颈癌细胞系Hela、C33A中CCAT1的表达显著升高(P<0.05);TMN分期较晚、肿瘤大、有淋巴结转移的宫颈癌患者宫颈癌组织中CCAT1相对表达量更高(P<0.05);不同年龄、分化程度患者中CCAT1的表达无显著性差异(P>0.05);与siRNA-NC组相比,转染siRNA-CCAT1的Hela、C33A细胞中CCAT1、细胞增殖活性、cyclin D1蛋白的表达显著降低,RASSF1A蛋白的表达显著升高。结论:CCAT1的表达上调与宫颈癌发生发展密切相关,沉默CCAT1的表达会抑制宫颈癌细胞的增殖,可能与上调RASSF1A的表达、下调cyclin D1的表达有关。

香菇C_(91-3)菌丝发酵液蛋白抑制小鼠宫颈癌细胞株U14生长及诱导凋亡的实验研究

目的研究香菇C91-3菌丝发酵液蛋白LFP91-3对小鼠腹水型宫颈癌细胞株(U14)的作用。方法应用不同剂量(50、100、150μg)的LFP91-3对U14所致小鼠腹水型宫颈癌模型进行治疗,观察荷瘤小鼠的生存期;并用MTT法LFP91-3浓度5、10、15μgml和流式细胞仪对经LFP91-3作用的U14进行观察和检测。结果LFP91-3能明显延长U14所致荷瘤小鼠的生存期。对体外培养的U14有直接杀伤作用,抑制率随LFP91-3浓度的增加和作用时间的延长而升高。流式细胞仪检测结果显示LFP91-3阻滞U14于细胞周期的分裂中期。结论LFP91-3能抑制小鼠宫颈癌细胞株的生长并诱导其凋亡。

miR-30c抑制宫颈癌细胞恶性表型的分子机制研究

目的:探讨微小RNA(miR)-30c过表达抑制宫颈癌细胞恶性表型的分子机制。方法:运用Lipofectamine 2000转染法将pGenesil-1-miR-30 c质粒转染宫颈癌细胞系C33A、HeLa、SiHa和CaSki,以转染p-Geresil-1的细胞为阴性对照;运用TaqMan real-time PCR检测各组细胞中miR-30c的表达水平;采用MTT法、集落形成实验、Transwell法、Annexin V-FITC及流式细胞术分别测定细胞活力抑制率、集落形成能力、迁移率及凋亡率;Western blot检测Bax、Bcl-2、基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-13和金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)的蛋白表达水平。结果:转染p Genesil-1-miR-30c质粒的宫颈癌细胞系中miR-30c表达水平均显著高于阴性对照组(P<0.01);过表达miR-30 c的宫颈癌细胞活力抑制率显著高于阴性对照组(P<0.05),细胞集落形成率和迁移率显著低于阴性对照组(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,miR-30c过表达的宫颈癌细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05);Western blot结果显示miR-30 c过表达促进Bax和TIMP-1蛋白的表达,而抑制Bcl-2和MMP-13蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论 :miR-30 c过表达抑制宫颈癌细胞活力和迁移,诱导宫颈癌细胞凋亡,其机制与激活细胞凋亡通路及抑制MMP-13表达有关。

RNA干扰TMEM33的表达对宫颈癌细胞生长的影响

目的通过生物信息学方法探究跨膜蛋白33(transmembrane protein 33,TMEM33)在宫颈癌组织中的表达及其与预后的关系,观察TMEM33经RNA干扰后对宫颈癌细胞生长的影响。方法应用基因表达谱数据动态分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)数据库筛选出与宫颈癌相关的TMEM33基因,设计两条特异siRNA序列进行RNA干扰实验。实验分为3组:siTMEM33#1干扰组、siTMEM33#2干扰组、阴性对照组(非特异性siRNA)。采用Western blot法检测siRNA干扰后宫颈癌SiHa/HeLa细胞中TMEM33蛋白的表达,CCK-8法检测SiHa/HeLa细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期的变化,Western blot法检测细胞凋亡关键基因BCL-2、Bax及细胞周期蛋白CyclinD1、P21的表达变化。结果与阴性对照组相比,特异性siRNA显著下调宫颈癌SiHa/HeLa细胞中TMEM33蛋白的表达(P<0.05);宫颈癌细胞增殖明显受抑,细胞凋亡显著增加,细胞周期S时相明显减少(P<0.05);细胞凋亡关键基因BCL-2表达下降而Bax表达上升,细胞周期蛋白CyclinD1水平降低而P21水平升高(均为P<0.05)。结论TMEM33经RNA干扰后,能明显抑制宫颈癌的细胞生长。TMEM33可能通过影响宫颈癌细胞周期、调节细胞凋亡及细胞周期相关蛋白的表达来促进宫颈癌细胞的生长。

基于决策曲线分析抗RA33、IL-6及hs-CRP水平对类风湿关节炎治疗反应性的预测价值

目的基于决策曲线分析抗类风湿关节炎-33(抗RA33)、白细胞介素-6(IL-6)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平对类风湿关节炎(RA)患者治疗反应性的预测价值。方法选取2021年1月至2023年8月该院收治的102例RA患者,收集患者临床资料并检测其血清抗RA33、IL-6及hs-CRP水平。使用甲氨蝶呤与依那西普治疗半年后,根据治疗反应性分为反应良好组与无反应组。采用Pearson相关分析RA患者抗RA33、IL-6、hs-CRP水平与RA疾病活动评分(DAS28)的相关性,多因素Logistic回归分析RA患者治疗无反应的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析抗RA33、IL-6、hs-CRP在RA无反应中的效能。采用决策曲线分析抗RA33、IL-6、hs-CRP单独与联合预测RA患者治疗无反应的净收益情况。结果治疗半年后,反应良好和中度的患者共80例(反应良好组),无效22例(无反应组)。反应良好组病程短于无反应组,DAS28评分低于无反应组(P<0.05)。反应良好组血清抗RA33、IL-6、hs-CRP水平低于无反应组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,血清抗RA33、IL-6、hs-CRP水平与DAS28评分均呈负相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,DAS28评分及抗RA33、IL-6、hs-CRP水平为RA患者治疗无反应的影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清抗RA33、IL-6、hs-CRP单独及联合预测患者治疗无反应的曲线下面积分别为0.729、0.814、0.831、0.948,三者联合的预测价值更高。决策曲线分析显示,在大多合理阈值范围内,血清抗RA33、IL-6、hs-CRP联合预测对RA患者治疗反应性的总体净收益高于单独预测的净收益。结论抗RA33、IL-6、hs-CRP水平与RA患者治疗反应性密切相关,三者联合预测治疗无反应的临床价值及净收益较高。

miR-33b对宫颈癌细胞增殖和迁移能力的影响

目的探讨miR-33b在宫颈癌(cervical cancer,CC)组织中的表达情况及其对CC细胞功能的影响。方法荧光定量PCR法检测miR-33b在CC组织中的表达水平;MTT法检测miR-33b对CC细胞增殖能力的影响;Transwell法检测miR-33b对CC细胞迁移能力的影响;Western blot法检测miR-33b对上皮间质转化(epithelial mesenchymal transformation,EMT)相关蛋白表达水平的影响。结果与癌旁非癌组织比较,miR-33b在CC组织中表达明显下调。过表达miR-33b能够显著抑制人CC细胞HeLa增殖和迁移能力。此外,还发现上调miR-33b可明显上调HeLa细胞E-cadherin表达,并明显下调N-cadherin及Vimentin表达。结论下调的miR-33b在CC的发生过程中可能发挥抑癌基因效应,可作为CC治疗的潜在靶点。

Coronin 1c过表达促进宫颈癌细胞系SiHa的上皮间质转换

目的基于Notch1/LOX/Snail1通路探索冠蛋白1c(Coronin 1c)过表达对宫颈癌细胞系SiHa的上皮间质转换(EMT)过程的影响。方法构建针对Coronin 1c基因的RNA干扰重组腺病毒(Ad-Cor-siRNA)及含对照序列的重组腺病毒(Ad-control),并感染SiHa细胞沉默Coronin 1c基因表达;并分组为H8组:H8细胞;空白对照(blank)组:未用任何病毒处理的SiHa细胞;Ad-control组:感染空载体腺病毒Ad-control的SiHa细胞;Ad-Cor-siRNA组:感染重组腺病毒Ad-Cor-siRNA的SiHa细胞。Western blot检测细胞中Coronin 1c、E-cadherin、vimentin、LOX及Snail1蛋白表达;qPCR检测细胞E-cadherin和vimentin mRNA表达;免疫荧光实验检测细胞MMP-2、MMP-9和Notch1蛋白表达。结果与正常宫颈上皮细胞H8相比,SiHa细胞中Coronin 1c、vimentin、MMP-2、MMP-9、Notch1、LOX及Snail1蛋白表达均升高,E-cadherin表达下降。Coronin 1c沉默后,可促使vimentin、MMP-2、MMP-9、Notch1、LOX及Snail1蛋白表达下降,E-cadherin表达升高。结论Coronin 1c蛋白过表达与SiHa细胞EMT密切联系,其能激活Notch1/LOX/Snail1通路,促进SiHa细胞EMT。

鳞状上皮细胞癌抗原和C反应蛋白联合检测对诊断宫颈癌复发的意义

目的：研究鳞状上皮细胞癌抗原（squamous cell carcinoma antigen,SCC-Ag）和C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）联合检测对宫颈癌复发诊断的临床意义。方法：选择在本院治愈出院的初发宫颈癌患者75例。门诊定期随访36个月,检测患者血清中SCC-Ag和CRP的浓度。建立受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）评价分析体系。结果：75例患者中宫颈癌复发19例（25.3%）;复发组患者测定SCC-Ag范围为0.6~112.8 ng/mL,中位数值4.4 ng/mL,CRP范围为1.2~495.6 mg/mL,中位数值4.4 mg/mL;未复发组患者测定SCC-Ag范围为0.4~29.0 ng/mL,中位数值1.1 ng/mL,CRP范围为0.4~137.8 mg/mL,中位数值3.6 mg/mL,两组SCC-Ag和CRP比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。ROC曲线分析示SCC-Ag的ROC曲线下面积（area under the curve,AUC）为0.812,95%可信区间为0.744~0.900;CRP的AUC 0.832,95%可信区间为0.755~0.905,双变量AUC为0.870,95%可信区间为0.827~0.914,均比SCC-Ag和CRP的AUC高（P〈0.001）。结论：SCC-Ag和CRP联合检测可作为判断宫颈癌复发的辅助手段,对于宫颈癌复发的诊断具有重要的临床指导意义。

Lx2-32c对宫颈癌细胞Hela影响的体外研究

目的观察Lx2-32c对宫颈癌细胞Hela生长增殖、凋亡的影响。方法以不同浓度的Lx2-32c处理宫颈癌细胞Hela 24、48和72 h后,采用MTT法检测各浓度对细胞生存率的影响,计算细胞增殖活力,同时以Annexin V-FITC/PI双染法测定不同浓度的Lx2-32c诱导Hela细胞发生凋亡的情况,并检测Bcl-2与cleaved-caspase-3的表达。结果不同浓度的Lx2-32c能够有效的抑制Hela的生长增殖,随着时间延长,其抑制作用更加明显,呈时间依赖性与浓度依赖性,并能够有效的诱导Hela细胞发生凋亡。Western blot结果显示,Lx2-32c能够有效降低Hela细胞中Bcl-2表达,同时上调cleaved-caspase-3的表达。结论 Lx2-32c可能通过线粒体通路诱导宫颈癌细胞Hela发生凋亡和抑制生长增殖。

RACK1对人宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的探讨激活性蛋白激酶C受体1(RACK1)对人宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其潜在的机制。方法收集2020年12月-2021年12月新疆医科大学第一附属医院24例患者的宫颈鳞癌(CSCC)组织及24例无宫颈病变的正常宫颈(NC)组织,采用qRT-PCR检测CSCC和NC组织中RACK1 mRNA的表达水平,并检测CSCC组织中增殖和凋亡相关基因c-myc、caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2 mRNA的表达水平;采用Spearman秩相关分析CSCC组织中RACK1 mRNA与增殖和凋亡相关基因mRNA表达的相关性。采用qRT-PCR及Western blotting检测RACK1在宫颈癌细胞C33a、SiHa和正常宫颈内皮细胞H8中的表达情况。通过慢病毒转染C33a、SiHa细胞以沉默RACK1的表达,根据不同处理分为正常对照组(NC)、空载组(sh-NON)和沉默组1(shRACK1-1)、沉默组2(shRACK1-2),并验证细胞转染效率,采用MTT法及平板克隆实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,qRT-PCR检测RACK1沉默后各组细胞中c-myc、caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2 mRNA的表达水平,Western blotting检测RACK1沉默后各组细胞中c-myc、caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2以及磷酸化Janus激酶2(p-JAK2)、JAK2、磷酸化细胞信号传导与转录活化因子3(p-STAT3)、STAT3蛋白的表达水平。结果CSCC组织RACK1 mRNA表达水平明显高于NC组织(P<0.001)。Spearman秩相关分析结果显示,宫颈癌组织中RACK1 mRNA的表达水平与caspase-3(r=–0.679,P<0.001)、caspase-9(r=–0.735,P<0.001)、Bax(r=–0.691,P<0.001)mRNA表达水平呈明显负相关,而与c-myc(r=0.713,P<0.001)、Bcl-2(r=0.846,P<0.001)mRNA表达水平呈明显正相关。qRT-PCR与Western blotting检测结果显示,与H8细胞比较,C33a、SiHa细胞中RACK1 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.001)。RACK1沉默后,与sh-NON组及NC组比较,shRACK1-1组及shRACK1-2组RACK1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.001)。与sh-NON组比较,shRACK1-1组及shRACK1-2组细胞增殖和集落形成能力也明显降低(P<0.001),而细胞凋亡率明显增高(P<0.001)。此外,与sh-NON组比较,shRACK1-1组及shRACK1-2组caspase-3、caspase-9、Bax mRNA和蛋白表达水平明显增高,p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平明显增高,而c-myc、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.001或P<0.01)。结论RACK1在宫颈癌组织及细胞中呈现高表达,靶向沉默RACK1基因可有效降低增殖相关蛋白c-myc与抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,但显著增加宫颈癌细胞中凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-9、Bax的表达,可能与激活JAK2/STAT3信号通路有关。

肿瘤细胞原血红素a/b/c检测在健康体检宫颈癌检出中的应用分析

目的分析健康体检时进行宫颈渗液肿瘤细胞原血红素a/b/c检测筛查结果,并验证检测方法的有效性。方法某体检中心对19970名女性进行健康体检,有关项目包括常规妇科检查、组织渗液、肿瘤细胞原血红素a/b/c检测,阳性病例再进行TCT检查及病理学检查。结果以病理学检查作为诊断标准,检出宫颈癌10例,检出率为0.05%。另外,以TCT检查作为诊断标准,检出宫颈上皮内瘤样病变1859例(其中CIN III 151例、CIN II 432例、CIN I 1276例),检出率为9.32%。结论肿瘤细胞原血红素a/b/c检测是宫颈癌筛查的适宜技术,在健康体检人群中开展宫颈癌筛查具有明显的实用价值。

木犀草素对宫颈癌HeLa细胞增殖及蛋白激酶C活性的影响

目的 研究中药木犀草素对人宫颈癌HeLa细胞蛋白激酶C（PKC）及细胞增殖的影响,并探讨其抗肿瘤机制.方法 分别以不同浓度的木犀草素作用于HeLa细胞后,用MTT法检测HeLa细胞生长抑制率,同步采用Western blot法检测 HeLa细胞PKC活性水平.结果 木犀草素作用于HeLa细胞后,细胞生长抑制率与对照组相比明显增高（P〈0.05）,且呈时间和剂量依赖性.各组HeLa细胞PKC的表达均呈阳性,且随木犀草素浓度的升高,PKC的表达呈明显下降趋势.结论 木犀草素可能通过下调肿瘤细胞PKC活性,抑制肿瘤细胞增殖而达到抗肿瘤活性.