苯并呋喃羧酸类特异性尿酸盐转运体抑制剂的设计、合成及活性研究

目的:设计合成新型的、具有一定特异性的苯并呋喃类人尿酸盐转运体(human urate anion transporter-1,h URAT1)抑制剂,并对其进行活性测试。方法:以苯并呋喃为骨架,引入羧基,设计合成3个新化合物。将所得目标化合物分别对稳定转染h URAT1基因或人有机阴离子转运体(human organic anion transporter-1,h OAT1)基因的MDCK细胞进行[^(14)C]尿酸摄取抑制试验或6-羧基荧光素(6-carboxyfluorescein,6-CFL)试验,探究化合物抑制细胞尿酸或6-CFL摄取能力。结果:成功合成了目标化合物B-1,B-2,B-3,并经过1H-NMR,MS的结构确证。体外h URAT1和h OAT1抑制活性筛选的结果显示,单羧酸化合物B-1,B-2具有较强的抑制h URAT1[14C]尿酸摄取活性,且化合物B-1表现出良好的h URAT1选择性。结论:设计合成了新型的具有一定h URAT1特异性的降尿酸化合物,化合物B-1的抑制活性及选择性均优于阳性对照药丙磺舒。

以hURAT1为靶点的排尿酸药物体外细胞筛选模型的建立和应用

人尿酸盐阴离子转运体1(human urate anion transporter 1,hURAT1)是人肾小管重吸收尿酸的主要转运蛋白,以hURAT1为靶点,筛选hURAT1抑制剂是近年来降尿酸药物开发的热点,因此建立hURAT1抑制剂体外细胞筛选模型具有重要的意义与实用价值。本实验首先构建了表达SLC22A1 2(hURAT1编码基因)的慢病毒载体,感染MDCK细胞后,通过G41 8筛选出稳转细胞株(稳转株);随后采用W estern-blot及免疫荧光方法检测目的蛋白的表达,并通过液闪计数仪检测hURAT1稳转株对[^(14)C]尿酸的摄取作用及hURAT1抑制剂苯溴马隆、丙磺舒对[^(14)C]尿酸摄取的抑制效果。实验结果显示,hURAT1稳转株目的蛋白表达量为对照稳转株的两倍,并且吸收尿酸的量明显大于对照细胞(P>0.001)。此外,实验中测得hURAT1稳转株对尿酸吸收的Km值为365.4μmol/L,苯溴马隆及丙磺舒对尿酸吸收的IC_(50)分别为0.1 8μmol/L和66.82μmol/L。以上结果表明,本实验成功构建了稳定表达hURAT1的MDCK细胞株,并建立了一套hURAT1抑制剂体外准确筛选和评价的方法体系。

痹宁胶囊治疗湿浊瘀热型痛风性关节炎40例临床观察

目的:观察痹宁胶囊治疗湿浊瘀热型痛风性关节炎的临床疗效,以及对人尿酸盐转运体(hURAT)基因表达水平的影响。方法:将40例痛风性关节炎患者随机分为治疗组和对照组,每组20例。治疗组给予痹宁胶囊口服治疗,对照组给予秋水仙碱口服治疗。2组均以10 d为1个疗程。观察2组临床疗效,以及治疗前后血尿酸(SUA)、甘油三酯(TG)、白细胞计数(WBC)、关节疼痛积分、关节红肿积分、关节功能积分、hURAT基因表达水平。结果:治疗组临床控制4例,显效9例,有效6例,无效1例,总有效率为95.00%;对照组临床控制0例,显效7例,有效9例,无效4例,总有效率为80.00%。2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组SUA、TG、WBC、关节疼痛积分、关节红肿积分、关节功能积分、hURAT基因表达水平等较治疗前均有改善(P<0.05);且治疗组优于对照组(P<0.05)。结论:痹宁胶囊能够减少尿酸生成,提高hURAT基因的表达,并可促进尿酸排泄,减少痛风的复发频率,减轻病情反复的症状,从而控制痛风性关节炎的发生和发展。