多肽cSN50通过核质转运受体Importinα抑制HepG2细胞核因子-KB及其下游因子的表达

目的研究乙醇、内毒素是否通过核转录因子NF—kappaB即IKB—NF-κB-importina途径引起细胞炎症、凋亡和诱导下游基因TNF-α、Caspase-3的表达；cSN50作为一种穿膜多肽通过阻断NF-κB与importinct结合，从而抑制NF—KB核转位及其下游基因的表达，起到保护细胞的作用。方法应用流式细胞仪观察HepG2经不同浓度乙醇、内毒素刺激后的细胞凋亡率；分光光度计法测Caspase-3活性；ELISA法检测细胞培养上清TNF-α；Westernblot法检测NF-KBpso、importina3、IKBa，间接免疫荧光法测p50、IKBα、importinα3的活化水平。结果乙醇、内毒素刺激后TNF-α、Caspase-3的值量效上与空白对照组比差异均有统计学意义（P均〈0．05），细胞核内p50显著增加（P〈0．05），胞浆IKBa下降（P〈0．05），cSN50（100μmol／L）能部分阻断P50的核转位及其下游因子的表达（P〈0．05）。结论急性酒精肝损伤中，NF-κB的核转位在此损伤中起重要作用，cSN50能部分抑制被刺激后的HepG2细胞核中NF-κB活性及其下游基因的表达。