人工异种生物心脏瓣膜组织中钙的测定

用硝酸 -高氯酸作氧化剂 ,镧盐作释放剂 ,人工异种生物心脏瓣膜组织仅经酸湿消化处理后 ,即可采用不需基体匹配的水溶液标准直接测定其中的钙。方法精密度为 <0 .0 5,回收率为 95%～ 1 0 5%之间。此方法灵敏度高 ,专一性强 ,能快速准确地测定心脏瓣膜组织中钙的含量。

同种与异种心脏瓣膜的生物力学及免疫反应的比较

目的:通过检测同种及异种瓣膜生物力学、瓣膜组织MHC-Ⅱ分子表达及钙盐沉积程度等免疫学指标,比较同种与异种心脏瓣膜之间的生物力学以及免疫排斥反应。方法:将低温保存的猪主动脉瓣叶组织分为2份,1份埋置于4只小香猪皮下,作为同种移植组;另1份埋置于4只家兔皮下,作为异种移植组。两组动物在相同的条件下饲养4周,检测埋置后两组主动脉瓣叶组织的生物力学指标、钙化程度以及MHC-Ⅱ的表达水平。结果:两组瓣膜的生物力学指标无统计学差异(P>0.05);同种移植组瓣膜的钙盐含量明显低于异种移植组(P<0.05),同种移植组瓣膜MHC-Ⅱ的表达水平也明显低于异种移植组(P<0.05)。结论:异种瓣膜的生物力学与同种瓣膜相比,具有一定程度的相似性;而异种瓣膜移植后排斥反应比同种瓣膜移植后排斥反应程度重,可能与异种移植瓣膜组织发生钙化和表达MHC-Ⅱ增多有关。

异种生物瓣膜生物材料鞣制的研究

目的 :评价复合鞣制的生物材料性能及异种生物瓣膜临床应用效果。方法 :用戊二醛、阳离子油、三氧化二铬及甘油等复合鞣制的生物材料 ,用光镜和电镜做组织形态学及超微结构观察 ;用万能实验机做力学性能测试 ;用傅立叶红外光谱测试仪测定羧基含量 ;人工心脏瓣膜疲劳寿命实验台加速测试。结果 :光镜下仍可见到浆膜层的间皮细胞大部分存在 ,间皮细胞下层由致密的胶原纤维组成 ;投射电镜下可见胶原纤维排列整齐、致密 ,细胞结构完整 ,铬离子能均匀地浸入细胞内 ;扫描电镜下可见到经阳离子油预处理的生物材料铬化后胶原纤维致密 ,排列整齐 ,呈网状分布 ,而未经阳离子油预处理的则胶原纤维粗大、排列无序 ;力学性能测试 :牛心包厚度 0 4 4± 0 13mm ,收缩温度在 86～ 90℃时材料最柔软 ,抗张强度 19 9～ 2 5 9N mm2 ,延伸率 4 3 4 %～ 4 6 0 % ;傅立叶红外光谱图 174 1 11cm- 1 处羧基 (CO OH- 1 )峰明显降低 ,表明羧基含量减少 ,且酰胺峰位左移 ,表明牛心包膜结构紧密 ;人工心脏瓣膜加速疲劳实验测试 ,猪主动脉瓣膜经受了 3 892亿次循环 ,牛心包瓣膜经受了 3 888亿次循环 ,从受力疲劳方面看将能经受住大约 10年的寿命。结论 :用戊二醛预处理再经阳离子油、三氧化二铬、甘油等复合鞣制生物材料 。

猪→人异种心脏移植中相关血管的生物力学特性(英文)

背景:同种心移植器官来源有限,短缺问题日益突出。目的:观察正常成人与不同月龄猪升主动脉一维载荷下的力学特性,为猪→人异种心脏移植吻合血管提供必要的生物力学实验基础。设计:开放性实验。单位:郧阳医学院解剖教研室。材料:实验于2002-04/2003-07在郧阳医学院医用生物力学实验室完成。人升主动脉取自无心血管疾病、18～30岁意外死亡的6例成年男性尸体(由郧阳医学院遗体捐赠中心提供)。选取1月龄同种猪42头(由郧阳医学院实验动物中心提供,动物质量合格证号:QN0202),普通食料饲养,分别于1,2,3,4,5,6,7月龄时屠宰,6头/次。解剖分离、原位测量各自体内长度后从主动脉瓣环基底平面至无名动脉起始处取下升主动脉(所有标本均未见到动脉粥样硬化表现),分5等份,取第2,4管段用于一维载荷的力学试验。方法:应用生物软组织力学试验机,对6例成年男性尸体和42头1～7月龄猪升主动脉进行一维载荷的力学试验,所有的血管段试样均以相同的应变率于室温32℃进行预处理10次(载荷范围0～0.5N)。血管受到周期性的匀速的加载和卸载后滞后现象消失,得到可重复性的力-变形数据。用相同的载荷范围和应变率对血管进行1次加载和卸载,记录力-变形数据后,供计算机分析。每次结束后均用标准砝码和百分表对力和位移量进行标定。由实验数据来拟合材料常数α与弹性模量dT/dλ。主要观察指标:①人与不同月龄猪升主动脉一维载荷下力学特性常数的测定结果比较。②人与不同月龄猪升主动脉一维载荷下弹性模量的测定结果比较。结果:①人与不同月龄猪升主动脉一维载荷下力学特性常数的测定结果比较:随着月龄的增长,猪血管的材料常数虽有所增加,但差异无显著性意义(P>0.05)。人与1～7月龄猪升主动脉一维载荷下力学材料常数比较基本相似(P>0.05)。②人与不同月龄猪升主动脉一维载荷下弹性模量的测定结果比较:随着月龄的增长,7月龄猪升主动脉的弹性模量较其他月龄猪明显升高(P<0.05);人与各月龄猪的相应血管相比,弹性模量差异无显著性意义(P>0.05)。结论:人与1～7月龄猪升主动脉力学特性常数和弹性模量无明显差异,至少在某些区段二者相应血管的力学特性是相近的。从力学角度分析,猪→人异种心脏移植过程中人与猪相应升主动脉的吻合具有一定的可行性。

本期专题：人工心脏瓣膜材料——生物瓣②

目前关于组织工程瓣膜支架的研究及材料较多，如纤维蛋白覆盖的聚已酸内酯、聚一4一羟基丁酸酯覆盖的聚乙醇酸、结合壳聚糖的羧基乙酸内酯和交联的透明质酸。由于去除细胞后的瓣膜基质具有近乎理想支架材料应具备的特点：良好的组织相容性、独特的立体多孔网状结构、生物可降解性、良好的细胞界面、可塑性和机械强度等而受到研究者的关注．

异种生物瓣膜组织宿主内皮细胞生长形态特征观察

目的 观察血流切应力对植入的异种生物瓣膜组织宿主内皮细胞的生长形态和排列的影响。方法 将戊二醛和L -谷氨酸 (L -G)处理的牛心包片进行体外内皮细胞种植培养 ,并同时将同样处理的牛心包片置入猪的右心房近三尖瓣处 ,扫描电子电镜观察心包片宿主内皮细胞生长的形态学特征。结果 牛心包片体外内皮细胞种植培养及猪右心房三尖瓣处移植后 ,心包片表面内皮细胞生长良好。体内移植牛心包片内皮细胞从缝合端向游离端生长 15天的过程中 ,细胞形态和排列随着血流机械应力的影响 ,细胞从近似圆形铺路石状逐渐向长梭形变化。缝合端内皮细胞呈一致的长梭形 ,内皮细胞生长区中部细胞呈梭形、卵圆形、圆形混杂 ,内皮细胞生长端细胞呈铺路石状 ,与培养板孔中培养的心包片表面连续单层内皮细胞 (来源于人脐静脉内皮细胞 )形态一致。结论 在在体状态下 ,处于三尖瓣处的异种生物瓣膜上的内皮细胞经血流作用 ,变形为长梭形 ,排列方向趋向于血流切应力作用的方向 。

非缝合式无支架异种主动脉生物瓣膜的研制

目的:研制新型非缝合式无支架异种主动脉生物瓣膜,在体外对其功能进行初步研究。方法:将猪主动脉瓣缝合到NiTi形状记忆合金支架上,在离体猪心脏内置入新型瓣膜,肉眼及彩超下观测瓣膜闭合、冠状动脉血流及瓣周漏情况。通过TH-1200型人工心脏瓣膜脉动流测试系统测定25#非缝合式无支架异种主动脉生物瓣膜平均跨瓣压差、返流百分比、瓣膜开口面积。结果:新型瓣膜能较简单的植入离体猪心脏内。且不同压力(80～250 mmHg)下,瓣膜闭合良好,无明显瓣周漏,冠状动脉血流良好;心脏彩超检测瓣周结构与主动脉壁之间可见无回声间隙,无明显的瓣周漏。体外脉动实验提示新型瓣膜与机械瓣膜相比跨瓣压差小,返流少,开口面积大。结论:该型瓣膜制备相对简单,具有血流动力学良好,跨瓣压小,无需抗凝等优点,可简化手术操作,降低手术难度。

本期专题：人工心脏瓣膜材料一生物瓣

实验采用人的细胞外基质采包被去细胞猪瓣膜支架，避开了经典组织工程学中的种子细胞与瓣膜支架黏附不牢固的难题，尝试构建一种应用细胞外基质包被去细胞瓣膜支架的新型组织工程瓣膜。在构建效果的检测方面采用自制的用于检测人细胞外基质的特异抗体作为一抗使细胞外基质的检测更有针对性。

异种生物瓣膜的临床应用及远期效果观察

总结 1987年 3月至 2 0 0 1年 5月间 ,用自制生物瓣膜 16 6枚 ,为 136例患者行瓣膜替换术后临床效果。以探讨生物瓣膜使用寿命及衰败原因。采用猪主动脉瓣 (SZ型 ) 85枚 ,牛心包瓣 (SN型 ) 81枚 ,生物材料选用单纯戊二醛鞣制和三氧化二铬复合鞣制两种方法处理 ;136例患者中男 70例 ,女 6 6例。二尖瓣病变 89例 ,三尖瓣病变 9例 ,主动脉瓣病变 10例 ,多瓣膜病变 2 8例。结果表明 随访 10～ 13年 89例 ,8～ 9年 2 1例 ,8年以下 18例 ,术后早期死亡 8例 ,晚期死亡 2例。 10年以上健在者 5 2例 ,8～ 10年健在者 15例 ,8年以下 18例。三氧化二铬等复合鞣制SZ型及SN型瓣膜的各项理化性能指标、脉动流测试及加速模拟体外疲劳试验台监测均已达到《人工心脏瓣膜通用技术条件》GB12 2 79—

各种材料在人工心脏瓣膜中的应用

具有良好耐久性和抗血栓能力的理想人工瓣膜材料一直是人工心脏瓣膜的研究重点。本文对目前人工心脏机械瓣、生物瓣和组织工程心脏瓣材料的应用进行了综述 。

人-猪异种生物瓣瓣膜材料的实验构建

目的 探讨用组织工程的方法实现异种生物瓣瓣膜材料的内皮化 ,制备新一代的生物瓣瓣膜材料。方法 取自肉联厂宰杀后 2小时内 4℃冰水保存的 8只猪心 ,在无菌条件下取出主动脉瓣分成 4组 :1组戊二醛 (GA) ,2组环氧氯丙烷 (EC) ,3组环氧氯丙烷 +左旋谷氨酸 (EC+L - GA) ,4组环氧氯丙烷 +左旋谷氨酸 +细胞提取液 (EC+L -GA +CE)。再将新生儿脐带 (离体后 6小时内 )用胰蛋白酶消化制备种子细胞 ,接种于加入 M199(10 %的胎牛血清 +2 0 %的混合血清 +黏附蛋白 +内皮细胞生长因子 )的培养液中进行种植 ,每日用倒置相差显微镜观察细胞生长情况 ,并进行内皮细胞 因子的定性检测、细胞生长覆盖密度的检测、光学和电子显微镜观察。 结果 倒置相差显微镜观察 :1组未见细胞生长 ,2组可见有细胞呈散在性生长覆盖 ,但较 3、4组的细胞数及覆盖率明显降低 (P<0 .0 1)。光镜和电镜观察 :1组未见有内皮细胞生长 ;2组可见有散在的内皮细胞生长 ;3组内皮细胞局部生长并可见细胞脱落 ;4组内皮细胞生长于原瓣叶的无细胞纤维支架上 ,并呈单层紧密排列 ,少见有细胞脱落或丢失 ,细胞沿纤维嵌合排列 ,细胞下组织呈间隙稀疏构成 ,有少量的基质成分和散在的胶原纤维 ,细胞沿纤维间隙排列、嵌合生长 ,形成空间三维排列生长的内皮?

猪内源性逆转录病毒与异种移植及生物人工肝安全性问题

异种移植是将动物的活细胞、组织或器官移植给其它种类受者，而生物型人工肝则是在整个治疗系统中利用肝细胞为终末期肝病患者提供体外支持，在异种移植和生物人工肝领域，因为猪来源方便，易于繁育，与人体解剖和生理有很高的相似性，可选择合适大小的器官和获得丰富的猪肝细胞，因此成为异种移植和生物人工肝较好的供体源。猪胰岛细胞临床应用治疗胰岛素依赖型糖尿病、猪肾体外灌注用于治疗肾衰、猪生物人工肝用于治疗人肝坏死、猪心瓣用于治疗人心脏病、猪神经细胞用于治疗人帕金森病，这些尝试给异种移植和生物人工肝带来希望。然而，异种移植面临三个主要障碍，即移植物进入受者体内引发的免疫排斥反应，包括超急性排斥反应、延迟性排斥反应和T细胞介导的排斥反应；另外异种移植物与受者的生理生化兼容性问题，不仅涉及移植物能否长期存活，移植物在新的宿主环境中能否正常发挥功能也相当重要。对于异种移植和生物人工肝两者而言，作为异种来源的猪器官、组织和肝细胞，其内存在猪内源性逆转录病毒（porcineendogenousretrovirus，PERV），有引起患者PERV感染的危险，这种潜在的病原传播及引发疾病的风险性，也是限制猪组织或细胞是否可以成功应用于临床的一个关键性因素。

异种心脏瓣膜的研究进展

随着器官移植技术的不断进步，越来越多的患者通过器官移植治愈疾病、延长寿命。虽然如今器官移植技术已经非常成熟，但是器官供体短缺仍是亟需解决的问题，许多患者因无法获得合适的移植器官而死亡。

J-Valve介入人工生物心脏瓣膜临床应用

长期以来,心脏病均对人类健康造成了严重威胁。近年来,在病毒侵入、心脏老化、先天性畸形引发的后天心脏瓣膜受损的疾病的治疗中,人工心脏瓣膜在飞速发展和不断进步的医疗技术的作用下在临床得到了日益广泛的应用。本研究首先概述了心脏瓣膜,然后从定义、优劣势、临床应用三个方面介绍了人工生物心脏瓣膜,最后从定义、优势、临床应用三个方面探讨了J-Valve介入人工生物心脏瓣膜,现综述如下。

人工心脏生物瓣膜再次置换分析

目的：总结10例人工心脏生物瓣膜再次置换手术的原因、并发症及疗效。方法自2014年1月至2015年11月，10例人工心脏生物瓣膜换瓣患者再次接受人工瓣膜置换手术。手术均在体外循环心脏不停跳下进行，手术均再次行正中切口。采用冷血高钾心脏停搏液，辅以全身低体温〈30℃。行升主动脉，上、下腔静脉插管建立体外循环，术中备股动静脉插管。结果住院期间1例行二次开胸止血，术中探查未发现明显活动性出血，但心包粘连面广泛渗血。予电凝刀创面广泛止血，术后予氨甲环酸、血凝酶、冷沉淀、血小板加强止血治疗，二次手术后引流明显减少。无死亡病例。术后其他并发症：肺炎肺不张1例，胸腔积液1例，心包积液1例，慢性肾功能不全1例，经积极治疗后痊愈。住院天数25~50d。出院时心功能改善至Ⅰ级6例，Ⅱ级4例。结论随着心脏瓣膜置换术的广泛开展，人工生物瓣膜置换术后瓣膜功能障碍情况增多，其诊治是心脏外科面临的重要课题。再次行瓣膜置换应掌握手术时机，手术难度大、风险大，术前需调整好患者的心肺功能及营养状态，术中快速细致轻柔操作，加强心肌保护治疗，掌握确切的手术方式，手术疗效确切，可有效改善患者的预后。

人工生物心脏瓣膜实验研究进展

人工生物心脏瓣膜具有良好的血液动力学性能,无需长期抗凝,使术后患者能有较高的生活质量已广为人知。但其耐久性较差这一问题一直未得到解决,已明显影响临床应用。有关生物瓣植入人体后的变化、它毁损的主要原因,以及如何提高其使用寿命等,是目前生物瓣研究的核心问题。本文将对生物瓣植入后的变化、瓣叶组织损坏机制以及生物瓣化学改性方面的新近实验研究综述如下:

生物心脏瓣膜移植研究进展

心脏瓣膜移植手术已在临床开展50余年,全球开展了大量研究以提高生物心脏瓣膜移植的成功率。本文主要对机械瓣膜与生物瓣膜的选择、戊二醛固定的生物心脏瓣膜的优势及存在的问题、转基因猪心脏瓣膜的应用价值进行综述。

兔体内细菌对人工心脏瓣膜的粘附及清除研究

目的探讨细菌在兔体内对人工心脏瓣膜材料的粘附情况及机体对细菌的清除能力。方法将H-胸腺嘧啶3脱氧核苷H-TDR标记的表皮葡萄球菌菌液等量分别与人工心脏瓣膜材料涤纶、热解碳、聚四氟乙烯植入日本长耳白3兔双侧腹膜后间隙,观察术后1、3、5、7天细菌在体内对不同材料的粘附。将球菌在体外粘附于不同人工心脏瓣膜材料,植入腹膜后间隙,观察和比较不同时间兔对已粘附在不同材料上球菌的清除能力。将人工心脏瓣膜材料植入腹膜腔,同时经静脉注入表皮葡萄球菌菌液造成菌血症或败血症,比较细菌对腹膜腔内不同材料的粘附情况。结果当将细菌与材料一起放入兔体内,细菌对材料粘附在第3天、第5天最多。对涤纶的粘附较强P<0.01。热解碳在第5天、第7天的细菌粘附明显增强,与聚四氟乙烯相比差异有显著性P<0.05。兔对材料上粘附细菌的清除能力以3天内最快,7天取出材料作细菌培养,仍有细菌生长。静脉注入表皮葡萄球菌产生菌血症或败血症,腹膜腔内生物材料的细菌培养阳性率以第5天、第7天最多,涤纶细菌培养阳性率最高。结论在机体内,同一种细菌对不同的人工心脏瓣膜材料有不同粘附能力,机体对不同材料上粘附细菌的清除能力不同,不易完全清除材料上粘附的细菌。