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趋化因子受体CCR5胞外段重组蛋白的克隆、表达、纯化及鉴定
被引量:
3
1
作者
吴孔田
张英起
颜真
《第四军医大学学报》
北大核心
2006年第5期412-415,共4页
目的:构建趋化因子受体5(CCR5)胞外段重组蛋白(命名为:rCCR5)原核表达载体,并进行诱导表达.对表达产物进行纯化和鉴定.方法:截取CCR5胞外结构4个片段N-Term,ECL1,ECL2和ECL3的氨基酸序列,应用柔性linker分别串联,模拟CCR5胞外结构,依据...
目的:构建趋化因子受体5(CCR5)胞外段重组蛋白(命名为:rCCR5)原核表达载体,并进行诱导表达.对表达产物进行纯化和鉴定.方法:截取CCR5胞外结构4个片段N-Term,ECL1,ECL2和ECL3的氨基酸序列,应用柔性linker分别串联,模拟CCR5胞外结构,依据大肠杆菌偏爱密码子人工合成基因.运用基因重组方法在大肠杆菌中进行表达,表达产物经纯化、复性后进行Westernblot鉴定.结果:目的蛋白以包涵体形式存在,经包涵体洗涤、变性溶解,SephacrylS-300凝胶过滤层析及SephacrylS-100凝胶柱复性获得了纯化的蛋白质,目的蛋白能与CCR5mAb特异性结合.结论:获得了大量纯化的rCCR5重组蛋白,可作为研制CCR5自体蛋白疫苗以阻断HIV-1感染的候选抗原蛋白.
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关键词
CCR5
人工手动htl表位
包涵体
复性
自体疫苗
HIV-1感染
下载PDF
职称材料
题名
趋化因子受体CCR5胞外段重组蛋白的克隆、表达、纯化及鉴定
被引量:
3
1
作者
吴孔田
张英起
颜真
机构
第四军医大学药学系生物技术中心
出处
《第四军医大学学报》
北大核心
2006年第5期412-415,共4页
基金
教育部"长江学者和创新团队发展计划"(IRT0459)
文摘
目的:构建趋化因子受体5(CCR5)胞外段重组蛋白(命名为:rCCR5)原核表达载体,并进行诱导表达.对表达产物进行纯化和鉴定.方法:截取CCR5胞外结构4个片段N-Term,ECL1,ECL2和ECL3的氨基酸序列,应用柔性linker分别串联,模拟CCR5胞外结构,依据大肠杆菌偏爱密码子人工合成基因.运用基因重组方法在大肠杆菌中进行表达,表达产物经纯化、复性后进行Westernblot鉴定.结果:目的蛋白以包涵体形式存在,经包涵体洗涤、变性溶解,SephacrylS-300凝胶过滤层析及SephacrylS-100凝胶柱复性获得了纯化的蛋白质,目的蛋白能与CCR5mAb特异性结合.结论:获得了大量纯化的rCCR5重组蛋白,可作为研制CCR5自体蛋白疫苗以阻断HIV-1感染的候选抗原蛋白.
关键词
CCR5
人工手动htl表位
包涵体
复性
自体疫苗
HIV-1感染
Keywords
CCRS
PADRE
inclusion bodies
refolding
auto-vaccine
HIV-1 infection
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
趋化因子受体CCR5胞外段重组蛋白的克隆、表达、纯化及鉴定
吴孔田
张英起
颜真
《第四军医大学学报》
北大核心
2006
3
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