HPLC结合多变量统计建立野生与人工沉香的识别模型

为了建立野生、人工沉香的识别方法,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》对48批次沉香的HPLC图谱进行分析,并结合多变量统计筛选野生、人工沉香识别特征峰,建立两者的Fisher线性识别模型和偏最小二乘判别法(PLS-DA)识别模型。结果表明:野生、人工沉香HPLC图谱的色酮种类及含量具有较大差异,为识别模型的建立提供了依据;多变量统计筛选出的9个色谱峰变量具有代表性,可用于识别模型的建立;所建立的Fisher识别模型对野生沉香和3年以内人工沉香的判别正确率均为100%,可用于野生与人工沉香的识别; Fisher线性识别模型的线性判别函数:y=-0.193 14x_1-0.086 49x_2+0.073 02x_3+0.136 65x_4+0.053 01x_5-0.058 5x_6+0.097 58x_7+0.040 24x_8-0.130 12x_9,y_1=-1.555 3、y_2=2.641 8、临界值y_0=0.543 3。

超级微波消解-ICP-MS法测定人工沉香中的11种无机元素

本文采用超级微波消解对样品进行前处理,以钪、锗、铑、铟、铼和铋作为内标物消除基体干扰,碰撞/反应池技术消除质谱干扰的方式测定了人工沉香中的铝、铬、锰、铁、铜、锌、砷、镉、钡、汞和铅.建立超级微波消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定人工沉香中的11种无机元素,并收集两种结香方法10批人工沉香样品进行测定.结果表明,所测元素在相应的测定范围内线性关系良好,相关系数为0.9991—0.9999,方法检出限为0.001—3 mg·kg^(-1),相对标准偏差为1.4%—5.5%,加标回收率为85.6%—109%,标准物质的测定结果与认定值相符.

“砍伤法”所结人工沉香的质量评价

目的:对"砍伤法"所结人工沉香进行质量评价,为其科学种植与采摘提供参考。方法:采用气相色谱-质谱联用法和高效液相色谱法,对3批"砍伤法"所结人工沉香(编号为1、2、3号,分别结香5、10、20年)的挥发性成分、液相特征图谱、沉香四醇和醇溶性浸出物含量进行检测。结果:3批人工沉香的挥发性成分主要为芳香族类化合物、倍半萜类化合物、脂肪酸类化合物和色酮类化合物;2、3号样品的液相特征图谱与沉香对照品基本一致;3批样品的沉香四醇含量为0.078%~0.254%,醇溶性浸出物含量为12.4%~20.8%。1号样品的液相特征图谱与沉香四醇含量不符合2015年版《中国药典》(一部)相关规定。结论:"砍伤法"所结人工沉香与天然沉香具有相似的挥发性化学成分,结香10年以上的人工沉香质量符合2015年版《中国药典》(一部)中"沉香"项下的规定,可以代替天然沉香入药。

电感耦合等离子体质谱法测定人工沉香中的5种重金属元素

建立了电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）测定人工沉香中铅、铜、镉、铬和砷的方法。采用微波消解法对样品进行前处理,以铋、锗、钪和铟作为内标物消除基体干扰,碰撞/反应池技术消除质谱干扰的方式测定了人工沉香中5种重金属元素。结果表明,该方法所测元素的相关系数均大于0.999,方法检出限在0.003-0.02 mg/kg之间,相对标准偏差均小于6.92%（n=7）,加标回收率在88.0%-108%之间,标准物质的测定结果与认定值相符。方法用于不同结香时间人工沉香中重金属元素的分析,其铅含量随结香时间的延长呈逐步增加的趋势。该方法操作简单、试验快速、结果准确,适用于人工沉香中重金属元素的测定。

沉香结香方法与技术研究进展

沉香是沉香属木质部组织及其分泌物共同组成的天然混合物质,是一种“药香”两用材,经济价值高,用途广,可用于制药、香熏、日化产品等。沉香的形成受外界胁迫,次生代谢物的合成及积累,为一个偶然、长期的过程,致使野生沉香数量稀少,难以满足沉香市场的需求,人工诱导结香成为了沉香产业发展的必然之路。目前,已有通过人工方法诱导沉香形成,但其产量高低不一,质量参差不齐。文章对结香方法和技术进行总结,为提高人工沉香的产量和质量以及沉香产业化发展提供依据。

不同酸剂诱导人工沉香的分析与评价

该研究按照《中国药典》(2015年版)要求测定样品醇溶性浸出物含量,同时建立GC-MS指纹图谱,使用《中药指纹图谱相似度评价(2012年版)》计算指纹图谱相似度,峰面积归一化法计算170~270 min与0~100 min 2区间总峰面积的比值,自动质谱退卷积定性系统(AMDIS)结合保留指数(RI)鉴定共有组分和差异组分,OPLS-DA结合相关系数P(corr)和变量权重(VIP)筛选差异组分,灰色关联度和TOPSIS分析法综合评价人工沉香品质。结果显示18批人工沉香中15批浸出物含量符合要求,指纹图谱相似度在0.439~0.779,2区间总峰面积比值在0.307~13.254,共鉴定出9个共有组分和8个差异组分,综合上述20个指标进行灰色关联度和TOPSIS分析得到2%水杨酸诱导的人工沉香品质最优。建立的灰色关联度结合TOPSIS分析法可快速判断不同酸性诱导剂生产的人工沉香品质,为人工沉香的全面质量评价提供参考依据。

人工沉香中白木香酸与浸出物含量的相关性

目的：建立高效液相色谱法测定人工沉香中白木香酸含量的方法,研究其白木香酸与浸出物含量之间的相关性。方法：按2015年版《中国药典》一部进行醇溶性浸出物的含量测定;采用CNW Athena C18-WP色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液（40∶60）,流速1.0 m L·min^-1,检测波长217 nm,柱温35℃。结果：白木香酸线性范围0.24-24 mg·L^-1（r=0.999 7）,精密度（RSD）0.4%,24 h内稳定性RSD 0.9%,白木香酸的平均质量分数为27.86μg·g^-1,平均回收率96.4%,RSD 2.8%。结论：高效液相法可准确测定人工沉香中白木香酸的含量,所选结香方式中综合法的白木香酸平均含量最高,且白木香酸的含量随着浸出物含量的增加而增加,结合白木香酸与浸出物含量的相关性,可为人工沉香的质量评价提供依据。

甲酸结合不同真菌诱导形成的人工沉香质量评价研究

目的：建立气相色谱-质谱（GC-MS）联用技术的沉香指纹图谱,结合多元统计分析评价甲酸结合不同真菌诱导白木香生产人工沉香品质。方法：采用GC-MS联用技术建立40批沉香指纹图谱,使用《中药指纹图谱相似度评价（2004 A版）》软件建立共有模式,计算图谱相似度,标定共有峰。峰面积归一化法计算170～270 min总峰面积与0～100 min总峰面积两区间的比值。正交偏最小二乘法（OPLS-DA）对样品进行分组,变量权重（VIP）结合相关系数（P（corr））筛选差异性组分。自动质谱退卷积定性系统（AMDIS）结合保留指数（RI）对共有组分和差异组分进行鉴定。结果：10批天然沉香指纹图谱相似度为0.821～0.888,30批人工沉香与天然沉香生成的对照图谱相比相似度在0.307～0.960之间。40批沉香按峰面积比值0.65分为3组：天然沉香、人工沉香1和人工沉香2,且全谱碎片信息、共有组分和差异组分相对峰面积的OPLS-DA分析结果一致。10个共有组分和14个差异组分中,白木香醛等对天然沉香的分组呈正相关;愈创木醇等对人工沉香1分组呈正相关;角鲨烯、5,8-二羟基-2-（2-苯乙基）色酮等对人工沉香2分组呈负相关。结论：指纹图谱相似度、两区间总峰面积比值结合多元统计分析结果,可以快速判断人工诱导沉香品质,为沉香药材的全面质量评价提供参考依据。

三批人工结香一年沉香挥发性成分研究

目的:对采用结香剂涂抹法和输液法结香1年的沉香进行质量评价。方法:采用乙醚超声法提取两批结香剂涂抹法和一批输液法所产沉香的挥发油,并应用GC-MS法分析其化学成分及相对含量。结果:共鉴定了42个化合物,3批样品均以色酮和倍半萜类为主要成分,品质较好。结论:沉香中化合物类型受树种的影响较大,与结香方法关系不明显。白木香植物经人工结香一年后所产的沉香中色酮类成分的相对百分含量大于倍半萜类成分的相对百分含量。

ICP-OES测定不同结香时间人工沉香中9种矿物元素

目的:建立电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-OES)测定人工沉香中9种矿物元素的方法,探讨不同结香时间人工沉香中矿物元素的含量特征和变化趋势。方法:收集4批不同结香时间的人工沉香样品,采用微波消解系统对样品进行消解,消解液用ICP-OES进行检测。结果:所测元素的线性相关系数在0.9984-0.9999,方法检出限在0.5-14.0mg/kg,加标回收率在81.6%-108.0%之间。人工沉香中矿物元素的含量基本符合:钙>钾>镁>锰>钠>铝>铁>锌>钡,并随着结香时间的延长其含量呈逐步增加的趋势。结论:本实验方法操作简单,实验快速,结果准确,可为人工沉香的质量控制及评价提供科学依据。

国产人工打洞沉香中一个新的2-(2-苯乙基)色酮二聚体

为进一步研究国产人工打洞法所结沉香中的化学成分,本研究采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、半制备高效液相等色谱方法从其乙酸乙酯萃取物中分离纯化得到2个单体化合物。根据核磁共振(NMR)、质谱(MS)等波谱数据分别鉴定为2-(2-苯乙基)色酮二聚体(+)-3′,3′′′-dihydroxy-4′,4′′′-dimethoxyaquisinenone G(1)和aquilasinenone F(2),其中化合物1为新化合物。抗氧化活性测试结果表明,化合物1和2都对DPPH自由基具有一定的清除能力,其中化合物2的IC_(50)值为(64.6±1.6)mol/L,阳性对照为L(+)-抗坏血酸。