人工胶原膜对大鼠皮肤创伤促愈作用的研究

目的 :观察人工胶原膜 (代号rackderm)对皮肤创伤创面的作用及其机制 ,为进一步将其作为人工皮肤支架提供试验依据。方法 :扫描电镜观察rackderm的表面结构 ,应用图像分析技术测量孔径大小 ;制备动物背部创伤模型 ,分别应用人工胶原膜和油纱布包扎创面 ,分阶段取材后 ,宏观观察伤口愈合情况 ,并应用病理学手段 ,结合图像分析观察rackderm的生物学作用。结果 :扫描电镜显示rackderm为多孔结构 ,孔径介于 2 0～ 4 0 μm ,允许成纤维细胞和毛细血管的长入 ;宏观观察rackderm组伤口愈合时间明显早于油纱布组 ,组织学观察显示该组肉芽组织含量明显多于油纱布组 ,免疫组织化学染色显示促进伤口愈合的生长因子在该组表达明显增强。结论 :rackderm初步满足作为人工皮肤支架的物理条件 ,作为人工敷料 ,对创伤后造成的皮肤缺损 ,具有促进伤口愈合的作用。

纳米晶胶原人工骨用于新疆维吾尔自治区塔城地区哈萨克族人的牙槽嵴保存

背景:拔牙后牙槽嵴的保存是一个重要的课题。新疆维吾尔自治区塔城地区边疆各县少数民族牙齿拔出后,由于就诊条件、地理条件等限制以及当地居民缺乏口腔保健意识等诸多因素,缺牙区长时间未及时修复导致牙槽嵴条件较差,因此寻找一种适合当地的且更有效的保存剩余牙槽嵴的方法,在当地有着较实用的临床价值。目的:探索纳米晶胶原人工骨用于新疆维吾尔自治区塔城地区哈萨克族人牙槽嵴保存的可行性。方法:采用自身配对设计,选取68例新疆维吾尔自治区塔城地区哈萨克族双侧拔牙患者,对就诊的双侧拔牙患者实验侧和对照侧的确定按"不平衡指数最小的分配原则"分组,实验侧拔牙窝植入纳米晶胶原人工骨,对照侧拔牙窝常规处理。植入后即刻及植入后3个月应用螺旋CT对植入区感兴趣区扫描,测量骨密度。结果与结论:植入后即刻,患者实验侧和对照侧CT图像可见拔牙窝清晰的轮廓,牙槽间隔可见;植入后3个月,患者实验侧和对照侧CT图像显示拔牙窝牙槽间隔影像模糊,CT值与周围牙槽突CT值接近,但实验侧植骨区骨充盈;且植入后3个月患者实验侧骨密度高于对照侧。说明纳米晶胶原人工骨用于新疆维吾尔自治区塔城地区哈萨克族患者牙槽嵴保存的临床效果较好。

胶原-羟基磷灰石人工骨与胶原膜引导牙周组织再生的动物实验研究

目的:将胶原-羟基磷灰石人工骨与胶原膜联合应用于修复牙周缺损的动物实验,探讨其用于引导牙周组织再生的可行性。方法:人工构建4只成年Beagle犬下颌后牙区牙周缺损模型,分别随机采用:胶原-羟基磷灰石人工骨/胶原膜、胶原-羟基磷灰石人工骨、空白对照治疗,每组8颗牙,12周后处死动物,进行组织学观察并测量新生组织高度。结果:与单纯植入胶原-羟基磷灰石人工骨组相比,胶原-羟基磷灰石人工骨/胶原膜组获得了更多的新附着,表现为有较多的新生牙槽骨、新生牙周膜和新生牙骨质样组织生长,2组之间新生组织差异有显著性(P<0.05)。结论:胶原-羟基磷灰石人工骨与胶原膜联合运用修复牙周牙槽骨缺损引导牙周组织再生的效果优于单纯植入人工骨。

胶原人工皮覆盖大鼠自体微粒混合移植

应用胶原人工皮覆盖自体微粒皮进行了全层皮肤切除的创面混合移植。实验以猪皮和尸体皮作对照,结果表明,胶原人工皮与创面的粘附力和止血作用比猪皮或尸体皮好(P<0.01)。对创面的愈合作用三者相同(P>0.05)。因此,我们认为胶原人工皮可以替代异体皮或异种皮暂时覆盖Ⅲ度烧伤切痂创面,而且愈合创面的皮下有新生血管和成纤维细胞浸润。

BME-10X型胶原/羟磷灰石人工骨引导比格犬牙周组织再生的实验研究

目的评估BME-10X型胶原/羟磷灰石人工骨引导比格犬牙周组织再生的能力。方法选取18月龄雄性比格犬4只,进行牙周基础治疗。基础治疗结束1周后,选取下颌第3、4前磨牙,同颌对侧同名牙随机纳入实验组或者对照组,制造牙周缺损,实验组植入BME-10X型胶原/羟磷灰石人工骨,对照组不植入任何材料。术后12周处死动物,进行组织病理学分析。结果与对照组相比,实验组获得了较多的组织再生,实验组和对照组新生牙槽骨的高度分别为(3.01±0.14)、(1.32±0.11)mm,二者间差异有统计学意义(P<0.05)。实验组和对照组新生牙周膜组织的高度分别为(3.12±0.19)、(1.35±0.12)mm,二者间差异有统计学意义(P<0.05)。实验组和对照组新生牙骨质的高度分别为(3.30±0.15)、(2.70±0.12)mm,二者间差异无统计学意义(P>0.05)。新生牙周组织的牙周膜纤维深入到新生的骨组织和牙骨质中,其结构特征与生理状态时的结构特征无明显差异。结论 BME-10X型胶原/羟磷灰石人工骨材料有较强的诱导牙周组织再生的能力。

免缝胶原海绵人工硬脑膜在颅脑损伤大骨瓣减压术中的应用

目的探讨免缝胶原海绵人工硬脑膜在颅脑损伤大骨瓣减压术中的应用效果。方法 2012年1月至2015年12月收治颅脑损伤108例,采用免缝胶原海绵人工硬脑膜修补54例（观察组）,采用可缝合人工硬脑膜补片修补54例（对照组）。术后3～6个月常规行颅骨修补术。结果观察组硬脑膜修补时间明显缩短（P〈0.05）,两组术后并发症发生率、术后6个月GOS评分均无显著差异（P〉0.05）。观察组修补硬脑膜至颅骨修补术时间间隔、修补术时间、修补术中出血量、脑膜破裂率均明显低于对照组（P〈0.05）。结论免缝胶原海绵人工硬脑膜在颅脑损伤中能够发挥减压作用,保护脑功能,手术时间短,与严密缝合的人工硬脑膜修补术效果相当,并且更有利于二期颅骨修补术的开展。

胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜对犬血管内皮细胞的毒性

背景:前期实验利用脉冲激光沉积方法制作了胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜。目的:进一步分析胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜的组织相容性和毒性。方法:将传代的犬血管内皮细胞悬液接种在胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜材料上,1组置于含体积分数5%CO2、37℃恒温培养箱内静态培养3周,另1组置于含体积分数5%CO2、37℃恒温培养箱动态旋转培养3周,扫描电子显微镜下观察细胞在材料上的附着情况。采用MTT法测定血管内皮细胞与胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜材料复合培养的增殖能力。结果与结论:动态旋转培养中见人工机械瓣膜材料的表面有细胞附着,并且数目比静态培养多,细胞分布均匀,在培养第21天可见均匀细胞融合成片,将材料表面均匀覆盖;在静态培养中细胞成堆,分布不均匀。人工机械瓣膜材料对犬血管内皮细胞增殖无明显影响,细胞生长良好。表明胶原包埋羟基磷灰石涂层人工机械瓣膜材料对血管内皮细胞的增殖无明显影响,无明显毒性,具有良好的生物相容性。

注射胶原的临床应用

注射胶原的临床应用辽宁省人民医院整形外科（１１００１５）汪晓蕾，王志军，高景恒胶原是细胞外基质（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘＥＣＭ）中的主要结构蛋白［１］，广泛存在于人体及动物体内，目前主要来源是人和牛［２］，提取后的可注射胶原移植物（Ｉｎ...

镁离子联合矿化胶原干预小鼠前成骨细胞的成骨分化

背景:课题组前期研究证实,镁基金属与矿化胶原联合应用在修复极限缺损时具有良好的支撑效果,可在一定程度上改善矿化胶原机械强度过差及在骨愈合期间过早塌陷的问题。然而,镁基金属在含氯化物溶液(包括人体体液或血浆)中降解较快,其中释放镁离子对成骨细胞增殖分化等的影响尚不清楚。目的:分析镁离子联合矿化胶原对小鼠前成骨细胞体外成骨分化能力的影响。方法:分别采用镁离子浓度为0,5,10,20 mmol/L的完全培养基制备矿化胶原浸提液,以4种矿化胶原浸提液培养小鼠前成骨细胞,分别设为矿化胶原组及5,10,20 mmol/L Mg2++矿化胶原组,以完全培养基培养的小鼠前成骨细胞为空白对照组。观察细胞的形态、增殖、凋亡、细胞内微丝肌动蛋白与成骨诱导分化后的碱性磷酸酶活性及成骨基因Runx2的表达。结果与结论:①培养24 h,矿化胶原组、5,10 mmol/L Mg2++矿化胶原组细胞贴壁情况良好,与空白对照组无明显差异,细胞形态呈长梭形,表面有多个突触与邻近的细胞相联系;20 mmol/L Mg2++矿化胶原组细胞呈现明显的核浓缩;②培养1,3,5 d时,10 mmol/L Mg2++矿化胶原组细胞活力高于其余4组(P<0.05),矿化胶原组、5 mmol/L Mg2++矿化胶原组与空白对照组无差异(P>0.05),20 mmol/L Mg2++矿化胶原组低于空白对照组(P<0.05);③培养3 d后DAPI染色显示,20 mmol/L Mg2++矿化胶原组可见明显细胞核解体的现象,其余4组未见明显细胞核解体;④培养24 h后鬼笔环肽染色显示,除空白对照组、20 mmol/L Mg2++矿化胶原组外,其余3组细胞结构完整伸展,肌动蛋白微丝清晰明显,尤以10mmol/LMg2++矿化胶原组最为明显;⑤成骨诱导分化7 d后,除20 mmol/L Mg2++矿化胶原组外,其余3组碱性磷酸酶活性与Runx2基因表达均高于空白对照组(P<0.05),且10 mmol/L Mg2++矿化胶原组高于5 mmol/L Mg2++矿化胶原组、矿化胶原组(P<0.05);⑥结果表明,镁离子与矿化胶原联合应用需要在适当的镁离子浓度范围(≤10 mmol/L)下进行。

有晶状体眼后房型人工晶状体长度选择和拱高的研究进展

有晶状体眼后房型人工晶状体植入术已在全世界广泛开展,安全性和有效性得到了证实。如何准确地选择植入人工晶状体的长度以获得理想的拱高,从而减少术后并发症,一直是学者们研究的焦点。本文以有晶状体眼后房型人工晶状体长度选择和拱高为中心,对相关问题作一综述。

表皮细胞、成纤维细胞和几丁质-胶原蛋白复合人工皮的体外构建

目的 探讨几丁质 胶原蛋白膜作为表皮细胞、成纤维细胞培养支架的可能性 ,体外构建包含双层细胞的复合皮。方法 取健康成人环切包皮 ,分离成纤维细胞、表皮细胞 ,分别制成单细胞悬液 ,将几丁质 胶原蛋白膜 (有孔面向上 )平铺于 60mm培养皿中 ,首先接种成纤维细胞 ,培养 2d后 ,将含 10 %小牛血清的DMEM更换成完全型DMEM ,翻转膜 ,使光滑面朝上 ,再种植表皮细胞 ,每日换液。定期观察细胞与材料的粘附、细胞贴壁及其生长增殖情况。结果 几丁质 胶原蛋白膜对成纤维细胞、表皮细胞无明显毒性作用 ,成纤维细胞培养 1d后 ,细胞贴附于材料支架 ,细胞胞体较大 ,呈典型的梭形。加入表皮细胞复合培养 2d示表皮细胞贴壁生长 ,并分化、增殖。复合皮构建 2周 ,网格支架及孔内均有大量细胞生长 ,膜表面细胞融合成片 ,表皮细胞分化形成复层。结论 几丁质 胶原蛋白膜对细胞无毒性 ,有利于培养细胞的粘附、生长。在体外可以构建成功类似生理性皮肤的人工皮肤。

矿化胶原人工骨修复幼龄猪颅骨缺损的实验研究

目的通过制备幼龄猪颅骨缺损模型,观察颅骨缺损对幼龄猪颅脑发育的影响,探讨矿化胶原人工骨在修补幼龄猪颅骨缺损中的可行性。方法将11只贵州小香猪随机分为正常对照组(A组)、单纯缺损组(B组)和材料修复组(C组)。分别于7月龄和10月龄时对实验动物进行头围测量。10月龄时处死动物,测量脑质量及脑容量,并对B组和C组的颅骨缺损区域进行组织学检测,对C组的颅骨缺损区域进行生物力学检测。结果测量脑容量和脑质量,B、C组与A组比较,其差异均无统计学意义(P>0.05)。7月龄和10月龄时,B组动物颅全长和基长均明显低于A组(P<0.05)。在眶距宽和颧宽方面,三组比较其差异无统计学意义(P>0.05)。在颅骨缺损区,C组可见较多新生骨组织和大量骨小梁,而B组仅见少量薄弱骨质。C组新生骨抗压强度明显低于正常骨(P<0.05);新生骨抗弯强度明显高于正常骨(P<0.05)。结论在幼龄猪颅骨缓慢生长期发生的颅骨缺损可能会影响颅骨发育。矿化胶原人工骨是一种可应用的颅骨缺损修复材料。

蛋白质的生物合成与模板聚合

本文联系生物体内蛋白质的生物合成、脱氧核糖核酸(DNA)遗传信息的存贮和复制,阐明了化学模板聚合的研究近况。从某种意义上说,遗传工程和蛋白质工程是化学模板聚合向高层次的生物模板聚合过渡的一个中间阶段,遗传工程的发展将使制革业得到质量优良的原皮,而另一方面,蛋白质工程的高度发展,将使皮革行业失去原皮、不过,这时可能成功地人工培育出胶原纤维组织,从而出现一种真正的“仿生革”.

三种仪器测量近视患者水平角膜直径和前房深度的差异性和一致性分析

目的分析IOLMaster700、Pentacam与Orbscan三种仪器测量近视患者水平角膜直径(WTW)和前房深度(ACD)的差异性和一致性。方法选择2019年4月至2019年12月在该院眼科行双眼可植入型胶原人工晶状体(ICL)植入术的患者51例(102眼),均采用IOLMaster700、Pentacam与Orbscan三种仪器测量患者的WTW及ACD,分析三种仪器测得结果的差异与一致情况。结果三种仪器测得WTW结果差异有统计学意义(P<0.05)。其中,IOLMaster700测得结果显著大于Pentacam和Orbscan测得结果(P<0.05),Pentacam与Orbscan测得WTW结果差异无统计学意义(P>0.05)。三种仪器测得ACD结果差异无统计学意义(P>0.05)。组内相关系数(ICC)分析结果显示,三种仪器测量WTW的ICC为0.790~0.896,测量ACD的ICC为0.952~0.966,提示三种仪器的测量结果一致性良好。Bland-Altman分析结果显示,Pentacam与Orbscan测量WTW的一致性良好,但IOLMaster700与Pentacam和IOLMaster700与Orbscan测得值一致性欠佳;三种仪器测量ACD的结果一致性良好。结论IOLMaster700对WTW的测量结果显著大于Pentacam、Orbscan,不建议互换使用。Pentacam和Orbscan对WTW的测量结果的一致性较好,在临床上可相互参考。IOLMaster700、Pentacam和Orbscan对ACD的测量差异较小,一致性良好。

INFLUENCE OF QUERCETIN AND X-RAY ON COLLAGEN SYNTHESIS OF CULTURED HUMAN KELOID-DERIVED FIBROBLASTS

Objoctive To investigate the effects of quercetin and X-ray on collagen synthesis of cultured human keloid-derived fibroblast and the mechanism. Methods Collagen synthesis of cultured human keloid and normal fibroblasts were detected by hydroxyproline colorimetric analysis. Immunocytochemical staining was used to investigate collagen I and III expression, mRNA expression of collagen Ⅰ and Ⅲ, and transforming growth factor （ TGF）-β1 were assayed by reverse transcription-polymerase chain reaction （RT-PCR） and real-time PCR. Results Quercetin inhibited the collagen synthesis of both keloid and normal fibroblasts in a dose-dependent man- ner. Immunocytochemical staining indicated that collagenⅠ and Ⅲ were down-regulated by quercetin and X-ray （P 〈 0.05 ）, particularly collagen I （ P 〈 0. 05 ）. mRNA expression of both collagen I and III in quercetin groups significantly decreased compared with that in control group （ P 〈 0. 05 ）, especially in the group treated with both quercetin and X-ray （ P 〈 0. 01 ）. mRNA level of TGF-[31 gene was down-regulated by quercertin （ P 〈 0. 05 ）. Conclusions Quercetin will probably be one of the new medicines which could effectively treat keloid. Quercetin combined with X-ray could reduce the dose of radiation.

不同材料人工真皮支架修复猪Ⅲ度烧伤创面比较

目的比较胶原壳聚糖真皮支架、胶原磺化羧甲基壳聚糖真皮支架及脱细胞基质真皮支架移植于Ⅲ度烧伤创面后，真皮支架的血管化及支架上表皮移植修复创面情况。方法将3种不同真皮支架各移植于6头猪（共18头猪）Ⅲ度烧伤清创后创面，在植入后1、2、3周对真皮支架血管化、创面、支架上表皮移植愈合和修复情况进行观察，同时用免疫组织化学方法，对CD34阳性信号（新生血管数目）进行检测。以无支架植入的Ⅲ度烧伤清创后创面为对照。结果胶原磺化羧甲基壳聚糖真皮支架植入后2周支架血管化已基本完成，而胶原壳聚糖和脱细胞基质真皮支架至少需要3周。3种不同材料支架垂直于创面的新生微血管均比无支架对照创面多；不同材料支架组与对照组2周创面比1周创面、3周创面比2周创面CD34的表达均明显增多，胶原磺化羧甲基壳聚糖真皮支架组植入后1、2、3周CD34阳性信号均明显高于相对应的其他3组；胶原磺化羧甲基壳聚糖真皮支架植入后1周，创面植表皮，移植表皮存活良好，而胶原壳聚糖和脱细胞基质真皮支架植入需要2周，其表面移植的表皮细胞才能成活。结论3种材料的支架均可修复Ⅲ度烧伤创面，而以胶原磺化羧甲基壳聚糖真皮支架的血管化程度最好。