二氧化硅人工蛋白石晶体(opal)的制备及其结构性质的研究

运用胶体化学法合成了尺寸可控的二氧化硅 (SiO2 )亚微米溶胶小球 .透射电子显微镜 (TEM)结果显示样品平均尺寸可从 2 0 0nm变化至 60 0nm ,单分散性较高、平均标准偏差小于 5 % .通过自然沉积法 ,由溶胶SiO2 小球自组织晶化制备了人工蛋白石晶体 (opal晶体 )结构 .样品的剖面扫描电子显微镜 (SEM)检测表明 ,样品为面心立方 (fcc)结构 .分析表明 ,较高的单分散性和缓慢的沉积过程是SiO2 溶胶小球自组织晶化成三维有序结构的关键因素 .反射谱中峰位在 13 2 0nm处的反射峰的出现 ,意味着样品在宏观尺度上的有序排列 ,同时也证明样品在 ( 111)

人工锌指蛋白真核表达载体的构建及表达

目的构建人工锌指蛋白ZFP基因的真核表达载体,检测其在真核细胞的表达情况,从而探讨人工锌指蛋白作为人工转录因子DNA结合域的可能性。方法全基因合成人工锌指蛋白(putative zinc finger protein,ZFP)的核酸序列并克隆入pEGFP-N1及pIRES2-EGFP真核表达载体中,构建重组质粒pEGFP-N1/ZFP及pIRES2-EGFP/ZFP-Flag,通过酶切、菌落PCR及测序来鉴定重组载体的正确性。脂质体DOTAP体外转染重组质粒于COS-7细胞中,用荧光显微镜、RT-PCR、Western blot方法鉴定ZFP在该细胞中的表达。结果正确构建了pEGFP-N1/ZFP、pIRES2-EGFP/ZFP-flag重组表达质粒,并且在COS-7细胞中成功进行了人工锌指蛋白ZFP的表达。结论采用生物信息学手段获得的假定的锌指蛋白基因序列可以在真核细胞内正常表达。

人发角蛋白人工腱体内降解机制的形态学研究

目的 :研究人工腱植入体内后的降解过程及细胞变化。方法 :将人发角蛋白HHK人工腱植入兔离断跟腱中 ,于术后不同时期的取出植入物中段及吻合端取材 ,制作常规石蜡切片。结果 :第一周 ,人工腱表面有一层粘膜状物 ,周围聚集大量的炎症细胞 :第 2周人工腱中人发开始被纤维鞘包裹 ;第 3、6周为人工腱降解活动高峰期 ,且降解步调不一致 ;第 9周人发被完全降解、只残留少量的色素。结论 :从形态学方面来看 ,人工腱植入兔体后经过系列变化 ,最终可被完全降解、吸收。而细胞表现的不仅仅是吞噬作用。

新型人工肝单纯白蛋白透析治疗肝衰竭的临床研究

目的以人体白蛋白作为透析液进行血液透析,观察其对肝衰竭的疗效,并与分子吸附再循环系统(MARS)进行比较.方法 18例肝衰竭患者中12例行单纯白蛋白透析(SAD),6例行MARS,每次均为6 h,根据病情,每日或隔日1次,连续治疗2～6次.SAD以4 000 ml白蛋白溶液(质量浓度45 g/L)作为透析液,置于袋中封闭循环使用,血流量250 ml/min,透析液流量10 L/h.分别于治疗前后取血样,检测肝功能、肾功能、血氨、内毒素和凝血酶原活动度(PTA);另于治疗1、3和6 h时分别测定血清与白蛋白透析液中的胆红素水平,治疗的同时密切观察临床表现.结果 SAD治疗后,患者临床症状与体征改善,肝功能好转,血流动力学稳定,血压上升,并发症部分缓解,特别是肝性脑病明显改善,并且不良反应少,治疗有效率高;PTA显著提高(P<0.05),血中尿素氮、肌酐、胆红素、胆汁酸、血氨和内毒素水平均明显下降(P均<0.05),但胆红素清除速率随着时间延长也逐渐减缓;SAD(质量分数为4.5%的白蛋白)治疗肝衰竭的疗效与MARS组基本相同(P>0.05),但前者操作更简便,成本更低.结论 SAD能清除蛋白结合毒素,改善临床症状和肝功能,其治疗肝衰竭的疗效肯定,简单方便,值得进一步临床研究.

人发角蛋白人工腱肌肉植入的组织相容性观察

为了研究人发角蛋白人工腱 (humanhairkeratinartificaltendon ,HHKAT)材料在体内的降解及其对周围组织的影响 ,将 12只日本大耳白兔随机分组 ,在脊旁肌埋藏不同处理程度的人发角蛋白人工腱试件F及Z ,用正常人发O做对照 .分别在 2 ,6 ,12 ,2 4周取材 ,观察人发角蛋白的降解及其周围的组织反应 .结果 :实验中发现不同程度处理的HHKAT其降解速度不同 ,其中降解最快的F组在 2 4周时已完全吸收 ,而Z组在 2 4周时只有部分降解 ,O组未见降解 .HHKAT及人发在肌肉组织内无明显的炎症排斥反应 ,随着HHKAT材料的降解吸收 ,其周围的组织反应逐渐降低 .研究表明人发角蛋白人工腱材料具有良好的生物相容性 ,在体内能够被降解吸收 ,可根据不同的需要调节其降解速度 。

磷酸钙骨水泥／骨形态蛋白人工骨复合骨髓基质细胞构建组织工程骨

背景:体外实验证明磷酸钙骨水泥/骨形态蛋白人工骨具有较强的骨诱导作用,但是磷酸钙骨水泥/骨形态蛋白人工骨能否作为骨髓基质细胞的生长支架报道较少。目的:验证磷酸钙骨水泥/骨形态蛋白人工骨做为骨组织工程支架材料的可行性。设计、时间及地点:观察实验,于2008-03/2009-03在上海市第九人民医院口腔组织工程实验室完成。材料:磷酸钙骨水泥/骨形态蛋白人工骨产品由瑞邦公司提供,大孔径200～500μm,小孔径1～5μm,孔隙率为70%。两岁的健康毕格犬1只。方法:抽取成年毕格犬的骨髓,贴壁法获得骨髓基质细胞,经成骨诱导培养液体外培养、扩增、诱导后观察细胞增殖情况。将培养的第2代细胞接种于多孔型活性磷酸钙骨水泥,进行超微结构观察,并将多孔型活性磷酸钙骨水泥/骨髓基质细胞复合物植入毕格犬背部皮下,2,4周后进行组织学检测。主要观察指标:倒置相差纤维镜下观察细胞的生长、增殖情况;碱性磷酸酶染色、Von Kossa染色、骨钙素免疫细胞化学染色鉴定骨细胞的形成标志;扫描电镜观察细胞材料复合情况;苏木精-伊红染色观察体内异位成骨情况。结果:碱性磷酸酶染色呈阳性;Von Kossa染色可见钙结节形成;骨钙素免疫细胞化学染色呈阳性;超微结构观察可见细胞生长附着于材料网孔内表面;组织学检测提示4周时复合物内有新骨形成。结论:多孔型活性磷酸钙骨水泥/骨髓基质细胞复合物显示良好的成骨活性,磷酸钙骨水泥/骨形态蛋白人工骨可以用于骨组织工程支架材料。

人发角蛋白人工腱在膝关节前交叉韧带损伤中的应用

人发角蛋白人工腱(HHKAT)是继碳素纤维人工肌腱和硅橡胶人工肌腱后的第三代人工肌腱材料.HHKAT的腱体可被逐渐吸收形成新的自体腱;它和肌腱的缝合部位能够腱性愈合;抗应力无明显衰减,不产生影响功能活动的粘连.自1999年2月～2003年1月收治16例前交叉韧带(ACL)损伤均接受了HHKAT移植重建,取得了较好的临床效果.

人工丝蛋白的研究

本文是文献述评。借助于基因操作技术进行了人工合成丝蛋白的研究。国外科学家在合成β 一片层状蛋白质、人工类蚕丝蛋白和人工类蜘蛛丝蛋白等方面进行了探索 ,并取得了一定成效 ,但仍存在一些问题。作者认为蚕是这一转基因技术适当的生物反应器 。

骨形态发生蛋白2纳米人工骨配合中医整脊手法治疗特发性脊柱侧弯的影像学变化

背景:近年来,整脊手法配合骨形态发生蛋白2纳米人工骨在特发性脊柱侧弯患者中得到应用,且效果理想,但该结论有待验证。目的:探讨整脊手法配合骨形态发生蛋白2纳米人工骨在特发性脊柱侧弯患者中的应用效果及影像学特点。方法:将80例年龄9-16岁的儿童特发性脊柱侧弯患者分2组治疗,对照组(n=40)进行整脊手法治疗,治疗组(n=40)在整脊手法治疗基础上进行骨形态发生蛋白2纳米人工骨植入治疗,整脊手法治疗每2 d一次。治疗后3个月,采用X射线评估两组脊柱侧弯Cobb角,采用目测类比评分评估疼痛情况。结果与结论:(1)两组治疗后3个月的目测类比评分、脊柱侧弯Cobb角均较低于治疗前(P<0.05);(2)治疗组治疗后3个月的疗效率高于对照组(90%,73%,P<0.05),治疗后3个月的腰椎及胸椎Cobb角明显低于对照组[胸椎:(17.32±3.98)°,(19.27±4.23)°;腰椎:(18.21±3.12)°,(23.25±4.64)°,P<0.05],治疗后1,2,3个月的目测类比评分明显低于对照组[治疗组:(3.51±1.02),(1.15±0.57),(0.99±0.12)分;对照组:(5.01±1.31),(3.57±0.95),(1.46±0.64)分,P<0.05];(3)结果表明,整脊手法配合骨形态发生蛋白2纳米人工骨治疗特发性脊柱侧弯能改善患者脊柱功能,缓解患者疼痛。

羟基磷灰石-骨形态发生蛋白复合人工听小骨与同种异体软骨听骨赝复物修复听骨链损伤的比较

背景:在听骨链损伤的治疗过程中,使用何种修复材料尚存在较大的争议。目的:对比新型羟基磷灰石-骨形态发生蛋白复合人工听小骨与同种异体软骨听骨赝复物修复听骨链损伤的效果。方法:将60例慢性中耳炎患者分为对照组和试验组,每组30例。两组患者均行鼓室成形、听骨链重建治疗,对照组采用同种异体软骨听骨赝复物修复,试验组采用新型羟基磷灰石-骨形态发生蛋白复合人工听小骨修复,治疗后随访12个月,对比两组修复效果。结果与结论:(1)空气传导值与气骨间隙值:两组治疗后的空气传导值与气骨间隙值均较治疗前显著改善(P<0.05),试验组治疗后的空气传导值较对照组改善更明显(P<0.05);(2)植入物脱出率:试验组未发生植入物脱出,对照组3例发生植入物脱出;(3)听力提高情况:试验组28例听力得到提高,提高率为93%;对照组25例听力得到提高,提高率为83%,两组间听力提高率比较差异有显著性意义(P<0.05);(4)结果表明:新型羟基磷灰石-骨形态发生蛋白复合人工听小骨修复听骨链损伤,可获得与同种异体骨听骨赝复合物类似的修复效果。

人发角蛋白人工腱及其组分的生物力学特性(英文)

背景:人发角蛋白人工腱植入肌腱缺损部位后,可被机体降解吸收,同时诱导机体形成新的自体腱。测定人发角蛋白人工腱及其组分的主要生物力学指标,以便根据人体不同功能部位需要选用合适的型号,使其具有人体进行功能活动所需要的拉应力。目的:测定人发角蛋白人工腱及其各组分材料的主要生物力学指标。设计:以人发角蛋白人工腱为观察对象,观察性研究。单位:一所军医大学的生物化学与分子生物学教研室、全军医学生物力学重点实验室,组织学与胚胎学教研室和佛山市康兴医学科技有限公司。材料:实验于2001-10在解放军第一军医大学全军医学生物力学重点实验室进行测定。人发角蛋白人工腱产品原料采自无地方流行性疾病、无环境污染的偏远山区,无染发、无烫发的健康女性黑发。人发经不同程度的生物力学处理获得3种在体内吸收速度递增的组分,Z,B和F。Z,B,F3种组分以一定的比例混合编结成各种型号规格的人发角蛋白人工腱。组分有3种型号规格,分别为Z3.0-20,B3.0-20,F3.0-20。人发角蛋白人工腱有6种型号规格:ZBF1.0-20,ZBF1.5-20,ZBF3.0-20,ZBF6.0-20,ZBF9.0-20,ZBF12.0-20。方法:将人发角蛋白人工腱或其组分材料的两端固定于MTS858生物力学试验机上,进行断裂拉力和拉应力指标的测定。主要观察指标:各种规格型号的人发角蛋白人工腱及其组分材料的断裂拉力和拉应力。结果:Z3.0-20,B3.0-20,F3.0-20组断裂拉力分别为(211.8±12.1,178.8±8.2,151.3±6.7)N,拉应力分别为(71.3±3.9,59.9±2.7,50.3±2.3)MPa,ZBF1.0-20,ZBF1.5-20,ZBF3.0-20,ZBF6.0-20,ZBF9.0-20,ZBF12.0-20各组断裂拉力分别为(75.0±3.0,107.8±4.2,194.1±5.3,375.9±12.7,508.2±21.3,670.8±25.4)N,拉应力分别为(75.0±3.0,72.0±2.8,65.1±1.8,62.9±2.2,56.3±2.4,55.8±1.5)MPa。结论:人发角蛋白人工腱的断裂拉力随横截面积增大而增大,拉应力随横截面积增大而略有减少。随着对人发处理程度的加剧,在体内被降解吸收的速度加快,相应组分的断裂拉力、拉应力减小。

特异性结合于HBV X基因启动子的人工锌指蛋白真核表达载体的构建及表达

目的:构建人工锌指蛋白(Putative zinc finger protein,ZFP)基因的真核表达载体,验证其在真核细胞内的表达情况,为进一步构建人工转录因子(Artificial transcription domain factor,ATF)所需的DNA结合结构域寻找合适的ZFP。方法:合成ZFP的全基因核酸序列并载入pEGFP-N1真核表达载体中,构建重组质粒pEGFP-N1/ZFP及pEGFP-N1/ZFP-Flag,通过菌液PCR、酶切和测序来鉴定重组质粒的正确性。脂质体Lipofectamine 2000将重组质粒转染于COS-7细胞中,使用RT-PCR、荧光显微镜、Western blot方法鉴定ZFP在该细胞中的表达。结果:成功构建了pEGFP-N1/ZFP及pEGFP-N1/ZFP-Flag重组质粒,并且在COS-7细胞中进行了ZFP的表达。结论:通过生物信息学工具获取的ZFP氨基酸序列,经过密码子优化得到的基因序列能够在真核细胞内成功表达。

等离子体磺酸化丝素蛋白膜聚四氟乙烯复合小口径人工血管体外的实验研究

目的研究等离子体磺酸化丝素蛋白膜聚四氟乙烯复合小口径人工血管(复合血管)的抗凝血性能,并探讨其安全性、可行性。方法采用低温等离子体技术将涂覆有丝素蛋白膜的聚四氟乙烯小口径人工血管磺酸化,制成复合血管,行体外溶血实验检测复合血管的溶血相关安全性,同时行血小板粘附、动态凝血、复钙实验评价复合血管血液相容性。结果扫描电镜照片看到,普通人工血管表面有血小板粘附,且血小板完全展开,呈扁平状紧贴在材料表面上,复合血管组表面极少血板粘附;复合血管组吸光度-时间变化曲线位于普通血管之上,且下降趋势较缓,经历时间较长,与普通血管相比,其抗凝血性能较好;复钙实验中复合血管组平均时间为480s,小于对照组平均时间603s,两样本t检验提示P=0.000,提示两者有显著统计学差异。结论等离子体磺酸化丝素蛋白膜聚四氟乙烯复合小口径人工血管具有良好的溶血安全性及抗凝血性能。

丝素蛋白人工神经导管的皮肤致敏实验

目的评价本实验室自制的丝素蛋白人工神经导管对皮肤潜在的致敏性。方法以ISO 10993-10:1995标准,采用最大剂量法,将白化豚鼠分为SF-NGC组、阳性对照(甲醛溶液)、阴性对照(生理盐水)3组,先进行预试验确定主试验各阶段的浓度,然后进行主试验。在激发阶段的敷贴物去除后24h、48h、72h,观察记录各组动物激发部位的皮肤情况,按标准进行评分,并算出致敏率。结果丝素蛋白人工神经导管的皮肤反应记分为0,致敏率为0。结论在试验条件下丝素蛋白人工神经导管无潜在的皮肤致敏性。

Ames实验对丝素蛋白人工神经导管遗传毒性的研究

目的:初步评价自制的丝素蛋白人工神经导管的遗传毒性。方法:采用Ames试验常规方法进行检测。结果:丝素蛋白导管对TA97、TA98、TA100、TA102在加与不加S9条件下均无致突变性。结论:在本试验条件下丝素蛋白人工神经导管无直接或间接致突变性。

人发角蛋白人工腱治疗韧带肌腱损伤的护理

我院骨科自1996年4月起应用人发角蛋白人工腱移植修复韧带,肌腱损伤共30例。临床效果满意,现将护理体会报告如下: 一、人发角蛋白人工腱的来源和性能本组应用的人发角蛋白人工腱是由王铁丹教授等于1995年7月在原109HH人工腱的基础上开发研制的,该腱是针对人发角蛋白特殊化学结构,对人发进行了序贯的,不同程度的特殊控制性的生物化学处理,使其具备了以下优点:(1)抗原性小,

变构蛋白的调控机制及其分子设计的研究进展

变构蛋白是一类具有特殊变构效应的蛋白质,其变构动态调节的多样性大大丰富了蛋白质的活性或特异性。探究蛋白变构效应及其调控机制,在拓展蛋白功能、药物研发和信号传递等方面具有重要的意义。本文从变构蛋白的功能与分类、调控机制、结构解析和变构位点的理性预测、人工变构蛋白的改造等方面进行总结,综合分析了开关变构调控、变构协调调控和间接变构调控这3种主要的变构蛋白的调控机制、研究难点以及对应策略,从而为变构蛋白的结构理性设计提供相应的理论支持。

文化自信背景下讲好中国科学家故事的教学设计--以生物科学史话“世界上第一个人工合成蛋白质的诞生”为例

当前高中生物学所介绍的科学成果多为欧美科学家的贡献,较少介绍中国科学家的成果,这有可能弱化学生的民族文化自信。针对这一问题,本节课以生物科学史话“世界上第一个人工合成蛋白质的诞生”为例开展教学,讲好中国科学家故事,以期增强文化自信,发展学生的社会责任素养。