人胃癌组织中人巨噬细胞金属弹力酶、单核细胞趋化蛋白-1的表达及临床意义

目的:研究人巨噬细胞金属弹力酶(human macrophage metalloelastase,HME)和单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)在胃癌组织中的表达及临床意义.方法:应用免疫组织化学SP法检测胃癌和癌旁组织石蜡包埋组织标本30例中的HME和MCP-1蛋白的表达情况,并分析HME与MCP-1的相关性及两者与临床病理的关系.结果:(1)HME和MCP-1在胃癌组织中表达的阳性率为70.0%(21/30)和80.0%(24/30),而在癌旁组织中表达的阳性率为26.7%(8/30)和16.7%(5/30),二者在胃癌组织中的表达显著高于胃正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);(2)HME在胃癌组织中的阳性表达与胃癌的分化程度,血管浸润有关(P<0.05),与其他临床病理参数无明显相关;MCP-1的表达与患者的肿瘤的浸润深度、肿瘤大小、肿瘤分期、淋巴转移、远处转移有关(P<0.05),与其他临床病理参数无明显相关;(3)HME与MCP-1在胃癌组织中的阳性表达无相关性(列联分析r=0.115,P>0.05).结论:胃癌组织中HME、MCP-1的高表达与胃癌的血管生成、浸润、转移有关,参与人胃癌的发生和发展,有助于探讨胃癌的发生机制.

巨噬细胞金属弹力酶缺氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子在胃癌中的表达及其意义

目的探讨巨噬细胞金属弹力酶(HME)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测胃癌及癌旁组织各30个标本中HME、HIF-1α及VEGF的表达情况。结果 1HME、HIF-1α和VEGF在胃癌组织中表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。2HME的表达与胃癌的血管浸润和分化程度有相关性,HIF-1α的表达与肿瘤的组织学类型、淋巴结转移及TNM分期有相关性,VEGF的表达与浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有相关性。3VEGF分别与HME和HIF-1α在胃癌组织中的表达存在密切的相关性。结论胃癌中HME、HIF-1α及VEGF的高表达可能为肿瘤侵袭转移的机制之一,且这些指标的检测对于胃癌的早期判断、干预治疗及预测肿瘤的转移预后有重要的临床意义。

2型糖尿病患者血清巨噬细胞炎症蛋白1α和基质金属蛋白酶9水平与甲状腺结节的相关性研究

目的探讨2型糖尿病(T_(2)DM)患者血清巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平与甲状腺结节的相关性。方法回顾性选取2021年10月至2023年3月于河北医科大学第三医院就诊的T_(2)DM患者154例,根据患者是否合并甲状腺结节分为甲状腺结节组(83例)和无甲状腺结节组(71例)。比较2组甲状腺功能、血糖、血脂、MIP-1α、MMP-9等指标。采用Logistic回归模型分析影响T_(2)DM患者出现甲状腺结节的因素;采用Pearson相关性检验分析T_(2)DM患者血清MIP-1α、MMP-9水平与其他因素的相关性;绘制受试者工作特征曲线分析血清MIP-1α、MMP-9水平对T_(2)DM患者出现甲状腺结节的预测价值。结果甲状腺结节组促甲状腺激素(TSH)、总三碘甲状腺原氨酸(TT_(3))、总甲状腺素(TT_(4))、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、稳态模型胰岛β细胞功能指数、空腹血糖、空腹胰岛素水平均高于无甲状腺结节组,胰岛素敏感指数(ISI)低于无甲状腺结节组(均P<0.05)。甲状腺结节组血清MIP-1α、MMP-9水平均高于无甲状腺结节组[(29±5)ng/L比(25±5)ng/L、(2.0±0.5)ng/L比(1.4±0.5)ng/L](均P<0.001)。Logistic回归分析结果显示,MIP-1α、MMP-9、TSH、TT_(3)、TT_(4)、空腹胰岛素、HOMA-IR和ISI均为T_(2)DM患者出现甲状腺结节的危险因素(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果表明,T_(2)DM患者血清MIP-1α与MMP-9水平呈正相关(r=0.362,P<0.001)。血清MIP-1α、MMP-9水平与空腹胰岛素、TSH、HOMA-IR、TT_(3)、TT_(4)均呈正相关,与ISI呈负相关(均P<0.001)。MIP-1α、MMP-9水平联合检测预测T_(2)DM患者出现甲状腺结节的曲线下面积大于MIP-1α、MMP-9单独检测(均P<0.05)。结论血清MIP-1α、MMP-9水平与T_(2)DM患者出现甲状腺结节具有密切关系,对预测T_(2)DM患者甲状腺结节具有重要价值。

人巨噬细胞基质金属弹力酶对人胃癌细胞VEGF体外表达的影响

目的探讨体外人巨噬细胞基质金属弹力酶(HME)对人胃癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法体外培养人胃癌细胞SGC7901,并通过不同剂量HME蛋白干预胃癌细胞VEGF表达,HME干预剂量为1～5μg/ml,分别于干预后0、12、24、36h采用ELISA方法检测细胞上清中VEGF浓度变化并统计分析,同时设定对照组。结果干预36h后,HME干预剂量在1～5μg/ml时VEGF浓度均低于对照组,差异有显著性(P<0.05);对照组12h后VEGF表达明显高于0h,差异有显著性(P<0.05),在1、2、4、5μg/ml剂量组中,干预后12h与0h比较,差异无显著性(P>0.05)。结论HME蛋白浓度在1～5μg/ml范围内时在作用36h后能显著地抑制胃癌细胞VEGF表达。

巨噬细胞金属弹力酶对小鼠原位结肠癌生长及COX-2表达的影响

目的:探讨巨噬细胞金属弹力酶(MME)对小鼠原位结肠癌生长、微血管生成及环氧合酶-2(COX-2)表达的影响.方法:扩增编码MME基因结构域Ⅰ和Ⅱ的cDNA片段,构建真核细胞表达载体pcDNA3.1-MME并转染小鼠CT-26结肠癌细胞.建立MME转染组及对照组小鼠原位结肠癌种植模型,观察重组MME对结肠癌生长的影响,采用Western blot方法检测肿瘤组织中的COX-2表达和微血管密度(MVD).结果:4wk后,小鼠原位结肠癌的平均体积和微血管密度,空质粒转染组小鼠和未转染组显著高于MME转染组(1151.07±35.91 mm^3,1201.13±42.15 mm^3 vs 384.83±4.76 mm^3.P<0.001;21.87±0.47,22.56±0.71 vs 8.48±0.53,P<0.001).COX-2蛋白水平在MME转染组中均显著低于对照组(2.766±1.22 vs 5.77±1.08,5.84±0.95,P<0.01).结论:转染入小鼠结肠癌细胞的MME基因通过抑制新生血管的生成和COX-2表达,从而起到抑制原位结肠癌生长的作用.

血清金属硫蛋白1H、巨噬细胞移动抑制因子对骨肉瘤患儿免疫靶向治疗疗效的评估价值

目的探讨血清金属硫蛋白1H(MT1H)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对骨肉瘤(OS)患儿免疫靶向治疗疗效的评估价值。方法选取52例OS患儿,均采取α干扰素联合贝伐珠单抗治疗,治疗前、治疗12周后检测OS患儿的血清MT1H、MIF水平。记录OS患儿的治疗效果,将完全缓解和部分缓解患儿纳入有效组,疾病稳定和疾病进展患儿纳入无效组。比较有效组和无效组患儿的临床特征,采用Logistic回归模型分析OS患儿免疫靶向治疗疗效的影响因素。结果治疗12周后,OS患儿血清MT1H、MIF水平均明显低于治疗前,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。52例患儿中,治疗有效35例,治疗无效17例。有效组患儿治疗后碱性磷酸酶(ALP)、MT1H、MIF水平均低于无效组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,治疗后ALP、MT1H、MIF高水平均是OS患儿免疫靶向治疗疗效的独立危险因素(P﹤0.05)。结论血清MT1H和MIF水平对OS患儿免疫靶向治疗疗效具有重要的评估价值,可为临床治疗方案的制订提供一定依据。

白藜芦醇抑制巨噬细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导物的表达

目的探讨白藜芦醇对细胞外基质金属蛋白酶诱导物(EMMPR IN)表达的影响。方法将人类单核细胞系THP-1和MCF-7细胞共培养,测定上清液中MMP-9活性。用PMA诱导THP-1为巨噬细胞,加入白藜芦醇,观察EMMPR IN表达和MMP-9活性变化。细胞共转染实验测定白藜芦醇对PPARγ的激动作用。用PPARγ的拮抗剂GW 9662预处理细胞后,测定白藜芦醇对EMMPR IN表达的影响。结果PMA诱导使单核细胞EMMPR IN表达明显增强,与EMMPR IN高表达的MCF-7细胞共培养显著增加单核细胞表达MMP-9。白藜芦醇显著抑制EMMPR IN和MMP-9生成。白藜芦醇明显激动PPAR,γGW 9662大幅减弱白藜芦醇对EMMPR IN和MMP-9的作用。结论单核细胞向巨噬细胞分化过程中表达明显增强的EMMPR IN可能是促进MMPs表达的主要因子。白藜芦醇通过激动PPARγ抑制EMMPR IN的表达,可能是其抑制巨噬细胞MMPs产生的机制。

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在巨噬和泡沫细胞中的表达

目的观察细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)在单核向巨噬和泡沫细胞分化过程中的表达变化。方法体外诱导THP-1单核细胞分化为巨噬和泡沫细胞,应用Real-time RT-PCR和Western blot测定EMMPRIN基因和蛋白表达。结果单核细胞分化为巨噬细胞后EMMPRIN mRNA和蛋白表达均显著增加,当进一步分化为泡沫细胞时,EMMPRIN的表达与巨噬细胞比较无显著性差异。结论单核细胞向巨噬细胞的分化诱导EMMPRIN表达,而进一步向泡沫细胞分化对其表达无影响。

普罗布考对巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶9的抑制作用

通过观察普罗布考对THP 1细胞基质金属蛋白酶 9表达的影响 ,初步探讨普罗布考稳定斑块的分子机制。运用逆转录聚合酶链反应、免疫印迹、明胶酶图等方法 ,检测氧化型低密度脂蛋白诱导后的人单核细胞 巨噬细胞系THP 1细胞基质金属蛋白酶 9mRNA表达、蛋白分泌和酶活性。实验发现 ,在氧化型低密度脂蛋白 (80mg L)刺激下 ,THP 1细胞基质金属蛋白酶 9的表达和酶活性明显增强 ;予普罗布考 2 0、4 0、6 0 μmol L处理 ,均能在对细胞活性无影响的前提下 ,显著抑制基质金属蛋白酶 9的蛋白分泌量及明胶降解活性 ,且这种作用呈浓度依赖性增强 ,其中 6 0 μmol L的普罗布考抑制基质金属蛋白酶 9的蛋白分泌和明胶降解活性分别达 74 .0 %± 2 .4 %和 4 8.0 %±5 .1% (P <0 .0 5 )。实验结果说明 ,普罗布考能有效抑制巨噬细胞的基质金属蛋白酶 9的蛋白分泌及其活性 ,这一作用可能是其抗动脉粥样硬化和稳定斑块的重要机制之一。

体外冠心病单核源巨噬细胞分泌的基质金属蛋白酶-9、组织因子的临床意义及葛根素的干预作用

目的体外培养冠心病患者的单核源巨噬细胞,探讨其分泌的基质金属蛋白酶-9(matrix metal-loproteinases-9,MMP-9)、组织因子(tissue factor,TF)的临床意义及葛根素(puerarin,Pur)的干预作用。方法入选40例患者中,急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)12例,不稳定性心绞痛(unstable angina pectoris,UAP)16例,稳定性心绞痛(stable angina pectoris,SAP)12例。冠脉造影正常者8名,均用佛波脂将提取的单核细胞诱导分化为巨噬细胞,测定上清液中MMP-9、TF的含量,并分析其与年龄、冠心病危险因素、冠脉病变评分的关系。随机留取12例急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者的单核源巨噬细胞,观察不同浓度的Pur对MMP-9、TF含量及活性的干预作用。结果AMI、UAP患者MMP-9、TF的含量明显高于SAP患者和正常者(P<0.01),且MMP-9、TF含量与年龄、冠脉病变评分、危险因素无相关性;12例ACS患者Pur干预后MMP-9、TF含量及活性均较对照组有明显下降,且有浓度依赖性。结论冠心病患者单核源巨噬细胞体外分泌MMP-9、TF的水平可作为ACS病情评估的指标。Pur可抑制单核巨噬细胞MMP-9、TF的表达及其活性,在一定程度上具有稳定斑块、改善易损血液的作用。

CD40配体通过诱导型环氧合酶途径诱导单核巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶

目的:观察重组人CD40配体(rhCD40L)对U937细胞分泌基质金属蛋白酶(MMPs)的影响,探讨其可能的作用机制。方法:不同浓度(0.1、0.2、0.4μg/ml)的rhCD40L和不同浓度(10-5、10-4、10-3mol/L)的NS-398(COX-2特异性抑制剂)分别刺激体外培养的U937细胞24 h后收集上清液;在加入终浓度为0.4μg/ml rhCD40L的基础上,分别加入终浓度为10-4mol/L的阿司匹林(COX-1抑制剂)或NS-398,共同刺激U937细胞24 h后收集上清液。酶谱法测定上述U937细胞培养上清中MMPs活性。结果:rhCD40L可使MMP-2和MMP-9活性增加(P<0.01),且随浓度的增加而逐渐增强,0.4μg/mlrhCD40L作用最强;NS-398可抑制MMP-2和MMP-9的活性,且抑制作用随剂量的增加而增强(P<0.05)。NS-398、阿司匹林均可抑制rhCD40L诱导U937细胞分泌MMP-2和MMP-9(P<0.01),NS-398的抑制作用强于阿司匹林(P<0.05)。结论:rhCD40L以浓度依赖的方式诱导单核巨噬细胞分泌MMPs,这种诱导作用可能与诱导型环氧合酶(COX)有关,而且与COX-2的相关性可能较COX-1更密切。

辛伐他汀对巨噬细胞基质金属蛋白酶-2、9及其组织抑制物-1、2基因表达调节的研究

目的 通过实验了解辛伐他汀是否能够调节巨噬细胞基质金属蛋白酶 - 2、9(MMP - 2、MMP - 9)及其组织抑制物 - 1、2 (TIMP - 1、TIMP - 2 )的基因表达 ,以明确辛伐他汀是否能够通过影响MMPs及TIMPs表达来发挥稳定动脉粥样硬化脂斑 ,防治其破裂的功能。方法 收集小鼠腹腔巨噬细胞与不同浓度的辛伐他汀进行培养 ,采用RT -PCR方法检测细胞MMP- 2、MMP - 9、TIMP - 1、TIMP - 2的基因表达。结果 5 μmol/mL浓度的辛伐他汀可以在相当程度上抑制MMP - 9的基因表达 ,并能完全抑制MMP - 2的基因表达 ;5 0 μmol/mL和 10 0 μmol/mL浓度可以完全抑制MMP - 2、MMP - 9的基因表达。对TIMP - 1及TIMP - 2基因表达的抑制呈剂量依赖关系 ,从 5 μmol/mL、5 0 μmol/mL到 10 0 μmol/mL基因表达量逐渐下降 ,当浓度为 10 0μmol/mL时 ,TIMP - 1的表达完全被抑制。结论 辛伐他汀可以通过调节MMPs途径发挥稳定动脉粥样硬化脂斑 ,防治其破裂的功能 ,但临床用药剂量不宜过大。

血小板因子4经Toll样受体4上调巨噬细胞基质金属蛋白酶9表达

目的观察血小板因子4（PF4）对THP-1单核源性巨噬细胞基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达的影响,并初步探讨其机制。方法佛玻酯诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞。巨噬细胞经不同浓度PF4（0-200μg/L）处理一定时间后,RT-PCR和Western blot检测MMP-9和Toll样受体4（TLR4）表达。为了研究TLR4在其中的作用,细胞经TLR4阻断剂预处理30 min后,再与PF4孵育特定时间,检测MMP-9表达。结果与对照组比较,50μg/L PF4即可显著上调巨噬细胞MMP-9 mRNA和蛋白水平,至100μg/L时,MMP-9 mRNA和蛋白表达达到最大效应水平,分别较对照组增高约3.8倍（P〈0.001）和1.5（P〈0.01）倍。PF4（100μg/L）也较对照组显著上调TLR4 mRNA和蛋白水平。而加入TLR4阻断剂后可逆转PF4诱导的巨噬细胞MMP-9表达上调,其mRNA和蛋白水平分别较PF4单独孵育组降低约26%和21%（P均〈0.05）。结论 PF4可能通过TLR4上调巨噬细胞MMP-9的表达。

巨噬细胞移动抑制因子和基质金属蛋白酶2在口腔癌生长和转移中的作用

目的研究口腔癌中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)在肿瘤生长和转移中的作用及二者之间的关系。方法收集口腔癌标本42例、正常口腔粘膜10例,采用免疫组化的方法检测MMP-2和MIF的表达,并分析二者之间及其和肿瘤分期、淋巴结转移的关系。结果口腔癌中MMP-2和MIF的表达均较正常组织明显增加,口腔癌中MMP-2和MIF的高表达和肿瘤的临床分期及淋巴结转移有关,同时二者的高表达存在一定的一致性。结论在口腔癌中MMP-2和MIF参与了肿瘤的生长和转移,但MMP-2的调控机制还是需要进一步研究的课题。

老年冠心病患者胱抑素C、巨噬细胞移动抑制因子及基质金属蛋白酶-1在血清中的表达分析

目的探讨老年冠心病患者血清胱抑素C、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)在不同病变程度中的表达差异。方法选取心血管内科2012年7月至2014年8月收治的老年冠心病患者120例,根据冠状动脉造影结果并结合心电图、心肌酶谱等检查将其分为对照组(30例)、稳定型心绞痛组(SAP组,34例)、不稳定型心绞痛组(UA组,28例)、急性心肌梗死组(AMI组,28例)。比较4组患者血清胱抑素C、MIF、MMP-1及高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平,并进行4项指标间的相关性分析。结果 4组患者血清胱抑素C、MIF、MMP-1及hs-CRP水平比较差异均有统计学意义(P<0.05);血清胱抑素C、MIF、MMP-1水平均随病情进展逐渐增加,且组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);AMI组患者血清hs-CRP水平与其余3组比较差异均有统计学意义(P<0.05);对照组、SPA组和UA组患者血清hs-CRP水平两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。胱抑素C、MIF、MMP-1三者间呈明显正相关。结论冠心病患者血清胱抑素C、MIF和MMP-1水平,随着病情的加重有逐渐升高的趋势,可作为病情评估的重要指标。

氧化低密度脂蛋白增加巨噬细胞基质金属蛋白酶-9和-12的表达

为探讨巨噬细胞在动脉粥样斑块不稳定性中的作用机制 ,观察致动脉粥样硬化的主要炎性因子 氧化低密度脂蛋白 (oxLDL) ,对巨噬细胞基质金属蛋白酶MMP 9和MMP 12表达和分泌的影响。在体外分离培养小鼠腹腔巨噬细胞 ,以不同浓度低密度脂蛋白 (LDL)、氧化低密度脂蛋白 (oxLDL)作用细胞 ;作用 6h后用RT PCR检测MMP 9,MMP 12mRNA表达 ,作用 2 4h后用Westernblot和 β 酪蛋白酶谱法检测MMP 9,MMP 12酶蛋白的分泌及活性。ox LDL增强巨噬细胞MMP 9,MMP 12mRNA表达和酶蛋白的分泌及活性 ,对MMP 12的诱导作用更为显著且呈浓度依赖性。表明oxLDL可能通过同时上调巨噬细胞基质金属蛋白酶MMP 9和MMP

急性脑梗死患者外周血清巨噬细胞移动抑制因子、基质金属蛋白酶-9和超敏C-反应蛋白水平与病情严重程度的关系

目的：探讨急性脑梗死患者血清巨噬细胞移动抑制因子（MIF）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、超敏C-反应蛋白（hs-CRP）水平与病情严重程度的相关性。方法急性脑梗死患者101例根据美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分分为轻型脑梗死组（A组，NIHSS评分〈4分，n=38）、中型脑梗死组（B组，NIHSS评分4~15分，n=36）和重型脑梗死组（C组，NIHSS评分〉15分，n=27）；同期住院44例有动脉粥样硬化危险因素非急性脑梗死患者为对照组（D组）。酶联免疫吸附法测定血清中MIF、MMP-9水平，免疫散射比浊法检测hs-CRP水平。结果各组间MIF、MMP-9及hs-CRP水平从高到低依次为C组、B组、A组、D组（P〈0.05）。MIF与MMP-9（r=0.301, P〈0.01）和hs-CRP （r=0.309, P〈0.001）呈正相关。结论急性脑梗死患者血清MIF、MMP-9、hs-CRP水平升高，可能预测动脉粥样硬化斑块稳定性。

血管紧张素Ⅱ通过核因子κB上调巨噬细胞基质金属蛋白酶诱导因子的表达

目的观察血管紧张素Ⅱ对巨噬细胞表达基质金属蛋白酶诱导因子的影响及其相关通路。方法血管紧张素Ⅱ体外刺激人巨噬细胞,应用逆转录聚合酶链反应和Western blot测定基质金属蛋白酶诱导因子基因和蛋白表达;RNA干扰技术沉默核转录因子核因子κB p65亚基,评价核因子κB通路在血管紧张素Ⅱ上调巨噬细胞细胞基质金属蛋白酶诱导因子的表达中的作用。结果血管紧张素Ⅱ刺激巨噬细胞后,基质金属蛋白酶诱导因子mRNA和蛋白表达均显著增加,核因子κB p65亚基沉默后,血管紧张素Ⅱ对基质金属蛋白酶诱导因子mRNA和蛋白表达无上调作用。结论血管紧张素Ⅱ上调基质金属蛋白酶诱导因子的表达,此调控过程有核因子κB通路的参与。