小檗碱抑制高转移性人巨细胞肺癌PG细胞侵袭和迁移的研究

目的:研究小檗碱对高转移性人巨细胞肺癌PG细胞侵袭和迁移的作用并探讨其作用机制. 方法:小檗碱(5 mg/L、10 mg/L)处理PG细胞24h,采用琼脂糖滴法观察PG细胞的运动能力,用下室加FN的Transwell小室法观察PG细胞的趋化运动能力,用铺Martrigel的Transwell小室观察PG细胞的侵袭能力.通过SABC免疫细胞化学法及图像分析软件,半定量PG细胞MMP-2、TIMP-2的表达;RT-PCR法检测PG细胞MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA的表达.

抗Ⅳ型胶原酶胞内抗体对人巨细胞肺癌PG细胞侵袭的抑制作用

目的探讨内质网滞留型胞内抗体对Ⅳ型胶原酶分泌及其对人巨细胞肺癌PG细胞侵袭的抑制作用。方法构建了编码胞浆和内质网滞留型抗Ⅳ型胶原酶抗体的表达载体pcDNA3.1-CP.scFv和pcDNA3.1-ER.scFv。对人巨细胞肺癌PG细胞系进行基因转染。以Western blot检测pcDNA3.1-CP.scFv和pcDNA3.1-ER.scFv的表达,明胶酶谱检测PG细胞Ⅳ型胶原酶分泌情况,Matrigel实验检测细胞侵袭。结果CP.scFv和ER.scFv胞内抗体在PG细胞内表达,ER.scFv对Ⅳ型胶原酶分泌具有显著的抑制作用,对基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶-2的抑制率分别为85.7%和51.2%;而CP.scFv对Ⅳ型胶原酶分泌无抑制作用。ER.scFv编码基因转染的PG细胞与野生型和空白质粒组比较,对体外侵袭有明显的抑制,抑制率为76.3%;而CP.scFv编码基因转染的PG细胞未显示出有抑制作用。结论内质网滞留型胞内抗体技术可以在蛋白加工、分泌通路中抑制Ⅳ型胶原酶的活性,进而抑制肿瘤侵袭,可能在肿瘤基因治疗中具有重要的应用前景。

土贝母苷甲对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞粘附、侵袭和迁移能力的影响

目的:探讨土贝母苷甲(下称苷甲)对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞粘附、侵袭和迁移能力的影响。方法:PGCL3细胞经不同剂量苷甲处理24、48、72h,MTT法检测其对PGCL3细胞生长的影响;分别用重组基底膜侵袭模型、粘附基质分析、Transwell小室趋化运动模型研究苷甲对PGCL3细胞的粘附、侵袭和运动能力的影响;用酶谱法检测苷甲对PGCL3细胞分泌Ⅳ型胶原酶(MMP-2)能力及活性的影响。结果:苷甲明显抑制PGCL3细胞的生长,且呈剂量依赖关系,作用24、48、72h的IC50分别为15.70、14.20和13.32μmo.lL-1。苷甲1.25、2.50、5.00μmol·L-1处理PGCL3细胞24h,对PGCL3细胞侵袭能力的抑制率分别为28.7%、41.0%、57.5%;对PGCL3细胞迁移能力的抑制率分别为21.6%、35.2%、53.7%。苷甲降低PGCL3细胞MMP-2的分泌量及其活性,降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率,且呈一定的剂量依赖关系。结论:苷甲抑制人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞的粘附、侵袭和迁移能力,其对PGCL3细胞的侵袭和粘附的影响可能与其降低PGCL3细胞MMP-2的分泌量及其活性,降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率有关。

土贝母皂苷对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞侵袭行为的影响

目的:土贝母[Bolbostemma paniculatum(Max-im.)Franquet]是一种传统中药。我们以前的研究结果已证实从土贝母块茎中分离得到的土贝母皂苷(下称皂苷)有强抗肿瘤效果和诱导肿瘤细胞调亡作用。本研究旨在探讨皂苷对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞粘附、侵袭和迁移能力的影响。方法:MTT法检测其对PGCL3细胞生长的影响;分别用粘附相关基底膜成分分析试验、重组基底膜侵袭试验、Transwell室趋化运动模型研究皂苷对PGCL3细胞的粘附、侵袭和运动能力的影响;用酶谱法检测皂苷对Ⅳ型胶原酶分泌及活性的影响。结果:皂苷明显抑制PGCL3细胞的生长,且其效果呈剂量依赖关系。皂苷作用PGCL3细胞24、48、72 h的IC50值分别为16.77、14.62、14.46μmol.L-1。皂苷1.25、2.50、5.00μmol.L-1处理PGCL3细胞24 h,对PGCL3细胞侵袭能力的抑制率分别为20.6%、30.6%、46.8%,对PGCL3细胞运动能力的抑制率分别为14.2%、24.7%、42.5%。皂苷降低PGCL3细胞Ⅳ型胶原酶的分泌量及Ⅳ型胶原酶活性,降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率,且其效果呈一定的剂量依赖关系。结论:皂苷抑制人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞的粘附、侵袭和迁移能力;皂苷对PGCL3细胞粘附和侵袭的影响与其降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率,降低PGCL3细胞Ⅳ型胶原酶的分泌量及其活性有关。

大黄素抑制人高转移巨细胞肺癌PG细胞的肿瘤转移相关性质

目的:研究大黄素对人高转移巨细胞肺癌PG细胞转移相关性质的影响。方法:MTT法检测大黄素对多种恶性肿瘤细胞的增殖抑制作用;BoydenChamber法检测大黄素对PG细胞侵袭能力的影响;明胶酶谱法(Zymography)检测大黄素对PG细胞Ⅳ型胶原酶分泌的影响;流式细胞术检测大黄素对PG细胞周期的影响Westernblot法检测大黄素作用后PG细胞周期相关蛋白的表达。结果:大黄素可抑制来源于不同组织多种肿瘤细胞的增殖,其IC50值在15～70μmol/L。40μmol/L和80μmol/L大黄素处理PG细胞24h,可使细胞侵袭能力分别降低到对照组的76.9%和57.4%,同时可使细胞MMP2和MMP9的分泌量显著下降,大黄素对PG细胞同基底膜的粘附能力没有明显影响。20μmol/L和40μmol/L大黄素作用于PG细胞24h后,可使细胞周期明显阻滞于G2/M期,伴随着S期的相应减少,进一步分析周期相关蛋白的表达,大黄素作用后可使PG细胞cyclinB1蛋白表达明显下降,而对p34cdc2的表达没有明显影响。结论:大黄素能抑制肿瘤细胞转移相关性质,提示其具有抗转移潜能。

ICA和PJA对高转移性人肺癌细胞体外侵袭转移能力抑制的研究

目的 :将新型抗癌药物淫羊藿甙 (ICA)和济南假单胞菌制剂 (PJA)作用于PG细胞 ,从肿瘤转移抑制的多个方面和环节探讨PJA、ICA抗转移作用的机制。方法 :采用粘附实验、运动侵袭实验、逆转录PCR(RT PCR)、细胞免疫组化等多种方法进行了检测。结果 :PJA、ICA可降低PG细胞对胞外基质的粘附性及侵袭、运动能力 ,减少PG细胞表面粘附分子CD44V6、LN R及胞浆内CK18的表达 ,同时细胞内c myc、Tiam 1基因mRNA水平均有不同程度的降低 ,而Nm2 3 H1mRNA水平有不同程度的升高 ,且两药有明显的协同作用。结论 :PJA。

川芎嗪对乏氧人巨细胞肺癌细胞黏附和侵袭能力的影响

目的：探讨川芎嗪对低氧培养的人巨细胞肺癌（PG）细胞黏附和侵袭力的影响。方法 PG细胞复苏，分别于常氧、低氧环境传代培养，取对数生长期的细胞，分为川芎嗪高、中、低剂量组及顺铂组、阴性对照组，以MTT法检测川芎嗪对常氧和低氧PG细胞黏附能力的影响；Transwell小室侵袭实验检测川芎嗪对PG细胞侵袭能力的影响。结果 MTT法检测PG细胞黏附能力，常氧环境中，川芎嗪高、中、低浓度组、顺铂组、阴性对照组的平均吸光度分别为（0.556±0.040）、（0.519±0.056）、（0.517±0.061）、（0.333±0.057）、（0.300±0.066），各组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。低氧环境中川芎嗪高、中、低浓度组，顺铂组，阴性对照组的平均吸光度分别为（0.482±0.032）、（0.452±0.059）、（0.274±0.093）、（0.464±0.099）、（0.155±0.042），各组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。常氧对照组与低氧对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.01）。低氧环境中川芎嗪高、中、低浓度组对PG细胞黏附的促进率均大于常氧环境（P＜0.01）。Transwell 小室检测 PG 细胞侵袭能力，常氧环境中川芎嗪高、中、低浓度组、顺铂组、阴性对照组侵袭细胞数分别为（28.00±17.00）、（91.67±30.37）、（105.67±39.58）、（85.00±8.19）、（152.33±24.71），差异有统计学意义（P＜0.05）。低氧环境中川芎嗪高、中、低浓度组、顺铂组、阴性对照组侵袭细胞数分别为（20.33±15.31）、（22.33±17.62）、（56.00±11.53）、（57.67±35.95）、（76.33±18.01），差异有统计学意义（P＜0.05）。常氧对照组侵袭细胞数明显多于低氧组对照组（P＜0.01）。结论在低氧环境中，PG细胞对基底膜的黏附和侵袭能力弱于常氧环境；川芎嗪、顺铂在低氧和常氧环境中均可促进PG细胞对基质的黏附，抑制对重建基底膜的侵袭作用，川芎嗪在低氧环境中对PG细胞黏附能力的促进作用更强。

益肺清化颗粒对人肺癌PG细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响

目的:研究益肺清化颗粒对人脐静脉内皮细胞血管生成的抑制作用及其可能机制。方法:益肺清化颗粒含药血清与体外培养的人肺癌PG细胞共培养,分别以MTT法、Transwell小室和Western blot实验观察益肺清化颗粒对人肺癌PG细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。结果:益肺清化颗粒含药血清可明显抑制PG细胞的增殖、迁移和侵袭能力,对VEGF和KDR的表达具有抑制作用,且益肺清化颗粒高浓度与吉非替尼联用效果更加明显。结论:益肺清化颗粒可能通过抑制血管新生从而抑制人肺癌PG细胞增殖、迁移和侵袭行为,进而限制肿瘤的生长、转移并诱导细胞发生凋亡,从而达到治疗肿瘤的目的。

晚期肺肉瘤样癌2例及文献复习

肺肉瘤样癌（（lung sarcomatoid carcinoma,LSC）为非小细胞肺癌（NSCLC）的一种特殊类型,以含有肉瘤样成分、分化差为特点,临床上非常少见,报道原发于肺部的肉瘤样癌仅占肺部恶性肿瘤的0.3%~4.7%,但近年来发病呈上升趋势。