纳米二氧化硅对人张氏肝细胞毒性作用研究

目的:以纳米二氧化硅(SiO2)为研究对象,探讨其对人张氏肝细胞(Chang liver cells)的毒性作用.方法:透射电子显微镜观察纳米SiO2粒径、形态及分散性.体外培养人张氏肝细胞,将细胞分为对照组及纳米SiO2暴露组.纳米SiO2暴露浓度分别为12.5、25、50、100、200(mg·L-1),作用外周全血细胞和张氏肝细胞24 h后,倒置显微镜下观察细胞形态及结构;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞生存率;DAPI染色观察细胞核形态;TRITC-Phalloidin染色观察细胞骨架微丝结构.结果:与正常对照组相比,纳米SiO2引起人张氏肝细胞存活率明显降低(P<0.01);细胞胞体产生皱缩、变圆,细胞核固缩并出现空泡化,细胞骨架微丝结构破坏.结论:纳米SiO2作用于人张氏肝细胞会抑制细胞增殖,造成细胞形态改变,并呈现剂量依赖性.

直链烷基苯磺酸钠致人张氏肝细胞损伤的毒性作用

目的通过检测不同剂量的直链烷基苯磺酸钠(LAS)对人张氏肝细胞(Chang liver cells)增殖、损伤、凋亡及坏死的影响,探讨LAS对人张氏肝细胞的毒性作用。方法体外培养人张氏肝细胞,将细胞分为对照组及LAS不同剂量组,分别为正常对照组(不含LAS的正常培养基培养细胞)、LAS低、中、高剂量组(37.5、75.0及150.0 mg/L)。各组细胞培养24 h后,倒置显微镜下观察细胞形态及结构;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞生存率;检测丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平以了解肝细胞损伤程度;Hoechst 33342及PI染色观察细胞凋亡及坏死情况。结果 LAS处理后细胞表面出现黑色颗粒,部分细胞变圆脱落并产生碎片,高剂量组出现细胞脱落、死亡。LAS各处理组细胞存活率明显低于对照组(P<0.01),MDA、LDH及AST水平也均明显高于对照组;细胞凋亡率与坏死率明显增加(P<0.01),且这些变化随LAS剂量增加更加明显(P<0.01)。结论 LAS可抑制人张氏肝细胞增殖,改变细胞形态,并导致细胞损伤、凋亡和坏死。

苦参碱调控PXR-CYP3A4通路对石胆酸诱导肝损伤细胞系的保护作用

目的探索苦参碱(MT)对石胆酸(LCA)诱导肝损伤细胞系的保护作用及其可能的作用机制。方法选择人张氏肝细胞(Changlivercell)和Huh-7细胞,分别采用含双抗的1640培养基和DMEM培养基培养。将细胞分成空白组、LCA组和不同剂量MT(0.5、1和2μmol·L^-1)组,分别给药后,全自动生化分析仪检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBiL)和碱性磷酸酶(ALP),RT-PCR法检测孕烷X受体(PXR)和CYP3A4 mRNA表达,Western blot法检测PXR和CYP3A4蛋白的表达。结果对于人张氏肝细胞,MT可以显著降低LCA干预后细胞ALT、AST、TBiL和ALP水平;上调细胞的PXRmRNA表达,而下调CYP3A4mRNA表达;下调细胞PXR和CYP3A4蛋白的表达。对于Huh-7细胞,MT可显著降低LCA干预后细胞的ALT、AST和ALP水平;上调PXR和CYP3A4 mRNA表达;下调CYP3A4蛋白的表达,而对PXR蛋白表达无明显影响。结论MT可改善LCA诱导肝损伤细胞的肝功能指标,其机制可能与调控PXR-CYP3A4通路mRNA和蛋白表达有关,其对Changlive细胞和Huh-7细胞的影响不尽相同。

玉郎伞多糖对抗结核药诱导肝细胞损伤的保护作用

目的研究玉郎伞多糖（YLSPS）对抗结核药诱导的肝细胞损伤的保护作用。方法将不同浓度的利福平、异烟肼及吡嗪酰胺合用（RFP＋INH＋PZA）作用于人张氏肝细胞,用MTT法检测肝细胞的存活率,以80%~85%存活率的药物浓度为最佳浓度建立肝细胞损伤模型;给予YLSPS处理后,检测细胞培养上清液中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸转移酶（AST）和乳酸脱氢酶（LDH）和细胞内丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的浓度。结果与模型组比较,YLSPS各剂量可明显降低肝细胞培养上清液中的AST、ALT、LDH水平及肝细胞中MDA的含量,升高SOD的水平,且呈剂量依赖性。结论YLSPS对RFP＋INH＋PZA合用诱导张氏肝细胞损伤具有保护作用,其机制可能与抗氧化和清除自由基的作用有关。