加热法人心肌钙蛋白T的提取与纯化

目的以加热法从人左心室肌组织中提取并纯化心肌肌钙蛋白Ｔ（ＣＴｎＴ）。方法取新鲜人左心室肌经捣碎、淬取、加热、透析后提取ＣＴｎＴ，以ＤＥＡＥ５２柱层析纯化。结果经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ凝胶电泳初步鉴定，每１００ｇ左心室肌经此法可得１１．７９ｍｇＣＴｎＴ纯品，纯化后的ｃＴｎＴ为单一条带，分子量为３７ＫＤ。结论本法提取ＣＴｎＴ步骤简单，纯度尚可，可做抗原使用。

人心肌肌钙蛋白T亚型的克隆及表达

目的 构建人心肌肌钙蛋白T(cTnT)亚型的重组载体。 方法 应用RT-PCR技术，从人胚胎心肌组织中扩增cTnT1及cTnT2基因，连接到T Easy vector载体上，筛选重组子。结果 成功地扩增出cTnT1（764 bp）及cTnT2(124)基因片段，经测序证实，构建pExSecI-cTnT1表达载体并获得表达。结论 获得单一亚型的cTnT1及cTnT2基因片段，为研究心力衰竭时的胚胎型基因重构与发病关系提供了依据。

人心肌肌钙蛋白T的提取和纯化及初步鉴定

目的 从人心肌组织中提取、纯化心肌肌钙蛋白T ,并进行初步鉴定。方法 采用匀浆、高盐提取、柱层析的方法 ,从心肌组织中分离、纯化cTnT ,以凝胶电泳、免疫印迹进行鉴定。结果 cTn粗品经柱层析纯化 ,其第Ⅱ峰为cTnT活性峰 ,分子量约为3 4kD。结论 本实验获得纯度较高的cTnT ,为进一步实验研究奠定了基础。