超氧阴离子参与白藜芦醇诱导的人急性早幼粒白血病HL-60细胞凋亡

目的:研究超氧阴离子(O2ˉ.)、H2O2、线粒体膜电位(MMP)在白藜芦醇(RSV)诱导人急性早幼粒白血病HL-60细胞凋亡中的作用。方法:以RSV(10.0、50.0、100.0μmol/L)分别作用HL-60 6、12、24h后,用流式细胞术检测细胞内O2ˉ.、H2O2及MMP水平;四氮唑蓝凝胶法检测RSV作用HL-6024h后超氧化物歧化酶(SOD)的活性;MTT法检测SOD和RSV共同作用HL-60后的细胞生存率;锥虫蓝细胞计数法检测N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)和RSV共同作用HL-60后的细胞生存率。结果:RSV可使HL-60内O2ˉ.水平升高,H2O2水平、MMP降低,SOD活性无明显变化;SOD和NAC对RSV诱导的HL-60凋亡作用无明显影响。结论:RSV诱导HL-60凋亡机制是RSV引起细胞内O2ˉ.水平升高,MMP降低,从而启动caspases凋亡途径诱发细胞凋亡。

雷公藤红素对人急性早幼粒白血病荷瘤模型小鼠黏附分子及细胞周期的影响

目的:观察雷公藤红素对人急性早幼粒白血病(APL)荷瘤模型小鼠黏附分子及细胞生物学特性的影响。方法:将18只SCID beige小鼠尾静脉注射NB4细胞株(5×10^6/只)以构建人APL荷瘤模型,然后随机分为荷瘤组、三氧化二砷组和雷公藤红素组,另取6只不造模并设为对照组;3周后向对照组和荷瘤组腹腔注射生理盐水并进行对照、三氧化二砷按100μg/kg腹腔注射,雷公藤红素按3 mg/kg腹腔注射,4组均注射治疗3周。观察各组治疗后小鼠静脉血NB4细胞生物学特性及黏附分子的蛋白表达。结果:与对照组比较,荷瘤组血象检测显示中性粒细胞降低,早幼粒细胞、NB4细胞、B淋巴细胞和白细胞明显升高(P<0.05),血清P-选择素(P-selectin)、可溶性血管黏附分子-1(sVCAM-1)和可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)均明显升高(P<0.05),细胞周期显示,G0、G1期比例明显升高,S和G2-M期明显降低(P<0.05)。与荷瘤组比较,雷公藤红素组中性粒细胞升高,早幼粒细胞、NB4细胞、B淋巴细胞、白细胞、P-selectin、sVCAM-1和sICAM-1均明显降低(P<0.05),且雷公藤红素组G0、G1期比例降低,G2-M和S期增多(P<0.05)。其中,雷公藤红素组白细胞、NB4细胞、P-selectin及sVCAM-1和sICAM-1与三氧化二砷组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:雷公藤红素可能除具有抑制APL荷瘤模型小鼠sVCAM-1和sICAM-1蛋白表达而降低肿瘤细胞的黏附性外,还可将肿瘤细胞阻滞于G2-M和S期,从而发挥对APL的治疗效应。

鲎血细胞多肽诱导HL-60细胞凋亡时线粒体膜电位的变化

目的 :探讨鲎血细胞多肽诱导HL 6 0细胞凋亡与线粒体膜电位变化的关系。方法 :鲎血细胞多肽 0、12 .5、2 5、5 0、10 0 μg ml,分别处理HL 6 0细胞 2、4、6、8、10、12、14小时 ,罗丹名 12 3染色 ,流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化。结果 :不加鲎血细胞多肽组处理 0～ 14小时 ,线粒体膜电位稳定。鲎血细胞多肽 12 .5～ 10 0 μg ml各组均出现线粒体膜电位下降 ;线粒体膜电位的下降与鲎血细胞多肽浓度及作用时间相关。结论 :鲎血细胞多肽诱导HL 6

HL-60细胞及其耐药细胞株HL-60/ADM超弱发光的检测

目的:探讨人急性早幼粒白血病细胞系(HL-60)和其耐药株抗阿霉素人急性早幼粒白血病细胞系(HL-60/ADM)的超弱发光与耐药性的关系。方法:应用MTT比色法、流式细胞术、细胞生长曲线和免疫组化染色法,检测HL-60细胞、HL-60/ADM细胞对阿霉素(ADM)的敏感性、细胞周期变化及P-糖蛋白(P-gp170)的表达。用IFFM-D型流动式化学发光仪检测HL-60细胞及HL-60/ADM细胞的超弱发光强度。结果:HL-60/ADM细胞对ADM的敏感性明显低于亲本HL-60细胞;HL-60/ADM细胞中G0/G1期的细胞为44·80%±1·97%,G2/M期的细胞为9·90%±0·27%,较其亲本细胞增多,S期的细胞为45·30%±1·93%,较其亲本细胞减少(P<0·05);HL-60/ADM细胞倍增时间是HL-60细胞的1·8倍,P-gp170的表达呈阳性,HL-60细胞呈阴性。在1×10-4mol/L鲁米诺及3mL/L双氧水条件下,密度分别为8×107/L、1×108/L、1·26×108/L及2·73×108/L的HL-60/ADM细胞超弱发光强度低于HL-60细胞(P<0·05)。结论:HL-60/ADM细胞对ADM的敏感性降低,细胞生长延缓,P-gp170表达呈阳性等均提示HL-60/ADM细胞出现了耐药性;且随着HL-60/ADM细胞耐药性的产生其超弱发光强度较其亲本细胞HL-60降低,提示细胞超弱发光强度明显降低可作为细胞耐药性产生的一项指标。

NLS-RARα对人白血病细胞NB4分化抑制及其机制的研究

该文旨在探讨带核定位信号的维甲酸受体α(nuclear localization signal retinoic acid receptor alpha,NLS-RARα)对人急性早幼粒白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)细胞株NB4分化的影响及其机制。免疫印迹实验检测全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导的NB4细胞分化标志物C/EBPβ、CD11b和p38α蛋白质水平;利用慢病毒介导的NLS-RARα基因过表达,进一步用免疫印迹实验验证过表达效率并检测NLS-RARα对NB4细胞分化标志物C/EBPβ、CD11b和p38α蛋白质水平的影响;间接免疫荧光实验分析NLS-RARα与p38α的空间共定位;免疫共沉淀实验分析NLS-RARα与p38α的相互作用。结果显示,生理浓度和药理浓度的ATRA促进NB4细胞分化的同时也激活了p38α,且p38α的活性变化与髓系分化标志物C/EBPβ变化一致;髓系分化表面标志物CD11b表达量在药理浓度ATRA(1μmol/L)处理下达到最高;NLS-RARα抑制NB4细胞的分化,且只有在ATRA存在的条件下,NLS-RARα抑制NB4细胞的分化与下调p38α活性相关;NLSRARα与p38α存在空间共定位且NLS-RARα与p38α直接相互作用。该研究结果提示,当存在ATRA诱导时,NLS-RARα与p38α直接相互作用后下调p38α的活性进而抑制NB4细胞的分化。

茶可诱导癌细胞“自杀”

茶可诱导癌细胞“自杀”湖南医大一项研究发现本报讯（记者刘笑春）湖南医科大学茶与健康研究室硕士生赵燕最近在研究中发现，茶叶中的多酚类物质，尤其是儿茶素类化合物，可诱导癌细胞“自杀”——细胞凋亡。茶是我国的传统饮料，多年来人们一直在探讨它对人体的保健功能...

Notch信号通路在漆姑草醇提物诱导NB4细胞分化中作用

目的探讨Notch信号通路在漆姑草(HSJ)醇提物诱导人急性早幼粒白血病细胞(NB4)分化中的作用。方法实验设对照组和低、中、高剂量漆姑草组(30、60、120μg/m L);作用NB4细胞48 h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测NB4细胞增殖抑制率;Wright-Giemsa染色法观察NB4细胞形态;Real time-PCR检测Jagged1、Notch1、c-myc m RNA表达;Western blot法检测Jagged1、Notch1、c-myc蛋白表达。结果漆姑草作用NB4细胞后,细胞增殖受到明显抑制;与对照组比较,漆姑草组NB4细胞形态向成熟细胞改变,可见核/浆比例减小,核形呈肾形核或分叶核;与对照组比较,30、60、120μg/m L漆姑草组NB4细胞中Jagged1 m RNA表达量[分别为(0.78±0.10)、(0.32±0.15)、(0.07±0.02)]降低,Notch1 m RNA表达量[分别为(1.27±0.14)、(1.39±0.23)、(1.53±0.30)]升高,c-myc m RNA表达量[分别为(0.88±0.05)、(0.67±0.02)、(0.47±0.16)]降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);与对照组比较,30、60、120μg/m L漆姑草组NB4细胞中Jagged1蛋白表达量[分别为(0.95±0.10)、(0.69±0.02)、(0.59±0.01)]降低,Notch1蛋白表达量[分别为(0.56±0.08)、(0.81±0.03)、(1.33±0.14)]升高,c-myc蛋白表达量[分别为(0.82±0.14)、(0.70±0.07)、(0.65±0.20)]降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论漆姑草能诱导NB4细胞向成熟细胞方向分化,其分化诱导作用机制可能与Notch信号通路有关。