三氧化二砷通过JNK信号通路诱导K562细胞凋亡

目的:探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在三氧化二砷(As2O3)诱导K562细胞凋亡中的作用及机制。方法:体外培养K562细胞,用As2O3及特异性JNK抑制剂SP600125对K562细胞进行处理;倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化;MTT法检测不同时间点细胞增殖抑制率;AnnexinV/PI染色结合流式细胞术检测细胞凋亡率;ELISA检测p-JNK蛋白表达的变化;流式细胞术检测突变型P53表达。结果:ELISA显示4μmol/LAs2O3作用48h后p-JNK蛋白表达增强,经SP600125预处理后,As2O3诱导的K562细胞p-JNK蛋白表达明显减弱(P<0.01),As2O3诱导的细胞增殖抑制率和细胞凋亡率均下降,与As2O3单作用组相比突变型P53表达增加(P<0.05)。结论:JNK信号转导通路在As2O3诱导K562细胞凋亡过程中发挥重要作用,是As2O3诱导K562细胞凋亡的主要途径之一。

线粒体膜电位在三氧化二砷诱导K562细胞凋亡中的作用

目的探讨三氧化二砷 （As2O3） 诱导 K562 细胞凋亡的发生机制。方法分别以1、2、4、8、16 μmol/L As2O3 诱导 K562 细胞凋亡，MTT法检测不同时间点细胞增殖抑制率，DNA Ladder 法检测细胞凋亡，Annexin V/PI 染色结合流式细胞术检测细胞凋亡率，Rhodamine 123 染色流式细胞术检测线粒体膜电位（ΔΨm） 变化，ELISA 法检测胞浆细胞色素C（CYTC）水平，分光光度法检测 Caspase-3 活性，流式细胞术检测 Bcl-2 和 Bax 表达。结果MTT结果显示 As2O3 能抑制 K562 细胞生长，且呈现时间剂量依赖性；4～16 μmol/L 的 As2O3 作用 24 h 均可诱导 K562 细胞凋亡，同时伴有ΔΨm下降，胞浆内 CYTC 蛋白浓度及 Caspase-3 活性增高，胞浆 Bcl-2/Bax 值下降，且均呈剂量依赖性。结论 As2O3 诱导 K562 细胞凋亡可能是通过降低ΔΨm，激活线粒体凋亡途径实现的，Bcl-2/Bax值下降可能与其有关。