重组人成骨生长肽治疗去卵巢大鼠骨质疏松的实验观察

目的探讨重组人成骨生长肽(recombinanthumanosteogenicgrowthpeptide,rhOGP)对去卵巢大鼠骨质疏松的治疗作用。方法通过切除大鼠卵巢建立骨质疏松模型,经rhOGP治疗12周后,测定骨密度(BMD)、血清中的酸性磷酸酶(TRAP)、碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(BGP)。结果rhOGP治疗组碱性磷酸酶(233.77±42.07)U/L、骨钙素(1.95±0.15)μg/L和骨密度明显高于骨质疏松模型组(156.23±23.38)U/L、(1.33±0.24)μg/L(P<0.01),而酸性磷酸酶(19.27±4.24)U/L,明显低于骨质疏松模型组(29.98±3.08)U/L(P<0.05)。结论rhOGP能刺激成骨细胞的活性,增加骨密度,提高骨量,对去卵巢大鼠所引起的骨质疏松有效,有可能成为治疗骨质疏松症的有效药物。

重组人成骨生长肽对化疗小鼠白细胞减少的影响

目的研究重组人成骨生长肽(rhOGP)对环磷酰胺(Cy)化疗损伤小鼠白细胞减少的影响;观察rhOGP对人肺腺癌Anip细胞和人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。方法用Cy腹腔注射每日100mg/kg,连续3d,造成小鼠的化疗损伤模型。拮抗实验中,分别给予低、高剂量的rhOGP,连续13d,采用皮下注射给药途径,于第0d、第4d(Cy造模后)、第9d、第14d检测外周血白细胞(WBC)数变化。预防实验中,分别给予rhOGP、DTT与生理盐水,连续10d,并于第8、9、10d同时给予Cy,分别于实验前、实验后记取外周血WBC数。利用MTT法和细胞生长曲线观察rhOGP对人肺腺癌Anip细胞和人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。结果rhOGP能促进Cy损伤小鼠WBC数的恢复,高、低剂量组间略有差异。rhOGP能明显降低Cy损伤小鼠外周血白细胞减少的幅度。rhOGP对人肺腺癌Anip细胞及人胃癌SGC-7901细胞的增殖无明显促进作用。结论rhOGP可促进Cy损伤小鼠外周血白细胞的恢复,rhOGP对Cy化疗小鼠白细胞数减少有预防作用,且对人肺腺癌Anip细胞和人胃癌SGC-7901细胞的增殖无促进作用,提示rhOGP作为肿瘤治疗辅助用药的潜在价值。

用原核翻译增强子提高人成骨生长肽基因在大肠杆菌中的表达

目的 用原核翻译增强子提高人成骨生长肽基因在大肠杆菌中的表达。方法 将原核翻译增强子序列插入到质粒pRIT 2T启动子的下游 ,再与成骨生长肽融合蛋白基因重组。热诱导表达融合蛋白 ,经亲和层析、FactorXa酶切、凝胶过滤层析得到纯化的成骨生长肽。结果 提高了成骨生长肽基因在大肠杆菌中的表达水平 ,使成骨生长肽融合蛋白的表达量超过了大肠杆菌蛋白总量的 5 0 %。结论 原核翻译增强子可提高外源基因在大肠杆菌中的表达。插入了原核翻译增强子的pRIT 2T质粒可作为高效表达融合蛋白的通用质粒载体。