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题名脂肪干细胞诱导分化为淋巴管内皮细胞信号通路的探究
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作者
豆倩影
薛斌
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机构
重庆医科大学附属第一医院烧伤整形外科
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出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期108-113,共6页
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基金
重庆市基础与前沿研究计划项目(编号:CSTC2013jcyja10062)
重庆市卫生局重点课题资助项目(编号:2013-1-014)
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文摘
目的:探讨血管内皮细胞生长因子C(vascular endothelial growth factor C,VEGF-C156s)诱导脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)向淋巴管内皮细胞(lymphatic endothelial cells,LECs)早期分化的调控通路。方法:取人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived stem cells,HADSCs)随机分为5组:空白对照组(常规DMEM/F12)、VEGF-C诱导组(含100ng/m L VEGF-C)、VEGF-C联合抑制剂a组(含100 ng/m L VEGF-C+5μmol/L的VEGFR3磷酸化酶抑制剂MAZ51)、VEGF-C联合抑制剂b组(含100 ng/m L VEGF-C+10μg/m L的Anti-Integrinα9功能封闭性抗体Y9A2)、VEGF-C联合抑制剂a+b组,连续培养10 d后,Western blot和细胞免疫荧光(IF)检测LECs标志性分子VEGFR3、Integrinα9、LYVE-1的相对表达量;VEGF-C诱导分化后的细胞用Anti-Integrinα9封闭性抗体和MAZ51作用后,Transwell小室检测各组细胞迁移数量的变化。结果:与诱导组相比,分别阻断VEGFR3和Integrinα9通路都会相应减弱LYVE-1的表达(PWestern=0.000,PIF=0.000),且在上述溶度下两抑制剂对LYVE-1的减弱作用无统计学差异(PWestern=0.164,PIF=0.927);而分别阻断任一通路对另一通路的表达量都没有影响(PWestern VEGFR3(BVSD)=0.804,PIF VEGFR3(BVSD)=0.528,PWestern Integrinα9(BVSC)=0.914,PIF Integrinα9(BVSC)=0.593)。与抑制剂作用之前相比,分别阻断Integrinα9和VEGFR3会使迁移细胞数量相应减少(P=0.000),而同时阻断Integrinα9和VEGFR3会使迁移细胞数量进一步减少(P=0.000)。结论:VEGF-C诱导HADSCs向LECs分化过程中有VEGF-C/VEGFR3和VEGF-C/Integrinα9两条独立信号通路,且Integrinα9和VEGFR3在诱导后的细胞的迁移中均发挥重要作用。
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关键词
脂肪干细胞
淋巴管内皮细胞
血管内皮生长因子C
人整合素α9
血管内皮生长因子受体3
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Keywords
human adipose-derived stem cells
lymphatic endothelial cells
vascular endothelial growth factor C
Integrinα9
vascular endothelial growth factor receptor 3
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分类号
R619.9
[医药卫生—外科学]
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