人整合素αvβ3在CHO细胞表达的研究

目的 使人整合素αvβ3在CHO细胞表面有效表达 ,为从分子水平了解汉坦病毒 (han tavirus ,HV)的感染及致病机制。方法 构建含人整合素 β3ORF区基因的真核表达载体pcDNA3.1 β3;将其与含人整合素αv全长cDNA的质粒pcDNA3 αv分别及共转染至CHO细胞中进行表达 ;采用间接免疫荧光法、流式细胞仪、免疫沉淀及免疫印迹实验对外源基因的表达进行定性、定位及定量检测 ,并确证表达产物的免疫反应性。结果 人整合素αv、β3基因在共转染组细胞中有高效表达 ,目的蛋白主要定位于细胞膜上 ;β3基因在pcDNA3.1 β3单独转染组细胞中的表达明显弱于共转染组 ;而pcDNA3 αv单独转染组则未见有效的表达。结论 人整合素αvβ3在CHO细胞表面的有效表达需要 2个亚基共同参与。

补阳还五汤对脑缺血大鼠模型ITGαvβ3表达及脑皮质区新生血管的影响

目的研究补阳还五汤对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用,并观察对脑组织VEGF和ITGαvβ3的表达及脑皮质区新生血管的影响。方法采用"线栓法"制备大鼠脑缺血-再灌注模型;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中内皮生长因子(VEGF)、ITGαvβ3的含量;免疫组化法测定各组模型缺血侧大脑皮质区VEGF及CD34的表达。结果补阳还五汤可以显著升高血浆中VEGF和ITGαvβ3的表达(P<0.01),增加缺血侧大脑皮质区VEGF的表达和微血管密度(P<0.01)。结论补阳还五汤能够促使血管生成,改善脑循环,促进缺血脑组织的修复。