人早孕蜕膜单层细胞与鼠胚共培养系统的建立

目的 获得鼠胚与人早孕蜕膜单层细胞的共培养系统。方法 经过细胞培养、传代获得蜕膜单层细胞 ;冻融后接种获得冻融蜕膜单层细胞 ;对单层细胞作免疫组织化学检查其雌、孕激素受体的表达。结果 人早孕蜕膜细胞有良好的体外培养活力 ,易于获得培养及传代。将获得的冻融蜕膜单层细胞进行雌、孕激素受体检查 ,见阳性表达。获得昆明白小鼠超促排卵后的单细胞受精卵 ,分别与传代及冻融的蜕膜细胞共培养获得囊胚孵出。结论 人早孕蜕膜单层细胞与鼠胚共培养系统的建立为人胚胎与其冻融的自体子宫内膜单层细胞共培养的研究提供了可行性分析。

人早孕蜕膜间充质干细胞移植治疗大鼠宫腔粘连

目的：探讨人早孕蜕膜间充质干细胞（hDMSCs）治疗大鼠宫腔粘连（IUA）的可行性和有效性。方法：体外分离、培养、纯化、鉴定h DMSCs。将30只雌性SD大鼠随机分为3组：蜕膜间充质干细胞治疗组（IUA＋hDMSCs）、IUA模型组和假手术（sham）组,每组各10只。IUA＋hDMSCs组和IUA组复制IUA模型后10 min内,IUA＋hDMSCs组经尾静脉注射2×10~6个Dio标记的hDMSCs,每3天补充1次,连续注射3次;IUA组经尾静脉注射相同容量的PBS;sham组仅行开腹手术。3个动情周期后取子宫行HE染色和Masson染色,测量子宫内膜厚度、子宫内膜腺体数目、子宫内膜小血管数目和纤维化面积比率,并行免疫组化检测子宫内膜组织细胞角蛋白、波形蛋白、转化生长因子（TGF）-β1及整合素αγβ3的表达量,q PCR检测IUA相关基因含量,免疫荧光观察h DMSCs在内膜中的分布情况,并评估大鼠的生育能力。结果：IUA组部分子宫腔闭锁,内膜萎缩,腺体减少,大量纤维化改变。IUA＋hDMSCs组与IUA组相比子宫间质厚度明显增加（P〈0.05）,大量腺体增生和小血管新生（P〈0.05）,纤维化程度减小（P〈0.05）,与sham组比较无统计学差异。IUA＋hDMSCs组细胞角蛋白、波形蛋白和整合素αγβ3表达量明显高于IUA组（P〈0.05）,而TGF-β1表达量低于IUA组（P〈0.05）。qPCR结果显示与IUA组相比,除TNF-α和结缔组织生长因子下调外,IUA＋hDMSCs组的干细胞因子、血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和thrombospondin-1均明显上调。免疫荧光结果显示Dio- DMSCs主要分布于腔上皮层,部分位于间质。IUA＋hDMSCs组大鼠双侧子宫均妊娠,平均胎鼠数量与IUA组相比有统计学差异（P〈0.05）。结论：hDMSCs可在受损的大鼠子宫内膜中存活、增殖,有效修复大鼠的子宫内膜,抑制IUA。