人胚胎脑组织蛋白提取物诱导人胎盘间充质干细胞向神经细胞的分化

背景:选择合适的诱导方法诱导人胎盘间充质干细胞分化为神经元样细胞是临床治疗神经损伤的关键。目的:在人胎盘间充质干细胞中加入商品化的人胚胎脑组织蛋白提取物,观察其诱导分化为神经元样细胞的可行性。方法:采用酶消化法分离培养人胎盘间充质干细胞,传至第3代,将人早期胚胎脑组织蛋白提取物加入诱导培养基培养6 d,加入浓度为20 nmol/L全反式维甲酸和500μg/L音猬因子培养3 d,换新的培养液,包含体积分数为10%胎牛血清,10μg/L脑源性神经营养因子,20μg/L神经胶质细胞源性神经营养因子,50μg/L胰岛素样生长因子Ⅱ型继续培养3 d。结果与结论:胎盘组织经酶消化后获得贴壁细胞,传至第2代细胞形态为梭形,成漩涡样生长,传至第3代细胞形态较均一。诱导后细胞经免疫细胞化学法检测均表达神经元特异性烯醇化酶、巢蛋白、胶质纤维酸性蛋白、神经丝蛋白、神经生长相关蛋白43;ELISA法检测细胞培养上清脑源性神经营养因子、神经营养因子3、神经营养因子4为阳性表达;RT-PCR检测细胞微管相关蛋白、神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白、神经生长相关蛋白43均为阳性表达。结果表明人胚胎脑组织蛋白提取物使人胎盘间充质干细胞诱导分化为神经元样细胞。

早期干预联合小牛血去蛋白提取物治疗新生儿缺氧缺血性脑病的研究

目的探讨早期干预联合小牛血去蛋白提取物治疗对新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）的影响。方法将86例足月新生儿HIE随机分为两组，对照组单用脑活素或胞二磷胆碱，治疗组在对照组治疗的基础上，应用小牛血去蛋白提取物治疗，并早期干预，于生后行颅脑Cr扫描；发病后3～4周行新生儿行为神经测定（NBNA），3～6个月行Gesell发育量表检查。结果治疗组在颅脑CT恢复程度、NBNA测定、智力发育测定等方面明显优于对照组（P〈0．05或〈0．01）。结论早期干预并小牛血去蛋白提取物有明显促进HIE患儿中枢神经系统功能恢复的作用。

早期干预联合小牛血去蛋白提取物治疗新生儿缺氧缺血性脑病23例

目的:探讨早期干预联合小牛血去蛋白提取物治疗新生儿缺氧缺血性脑病的临床效果。方法:将45例新生儿缺氧缺血性脑病患儿随机分为观察组23例和对照组22例。对照组使用胞二磷胆碱或者脑活素进行治疗,观察组在对照组基础上给予小牛血去蛋白提取物加以治疗,实施早期干预和颅脑CT扫描。结果:观察组患儿的行为神经测定(NBNA)、颅脑CT恢复程度以及智力发育测定等优于对照组患儿。结论:早期干预联合小牛血去蛋白提取物治疗新生儿缺氧缺血性脑病能够有效促进患儿中枢神经系统功能的恢复。

银杏叶提取物对脑微空气栓塞损伤的保护作用

近年来，体外循环（CPB）心脏手术后死亡率显著下降，但术后神经系统并发症仍不少见，严重影响患者的生活质量。本研究旨在观察兔脑微空气栓塞对缺血脑组织bcl-2表达和血清S100β蛋白的影响以及银杏叶提取物对两者干预作用，探讨药物干预对脑组织的保护机制，为体外循环脑保护提供实验依据。

脑蛋白水解物-Ⅰ对缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用

目的探讨脑蛋白水解物(cerebroprotein hydrolysate, CH)-Ⅰ对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用及其机制。方法成年健康雄性SD大鼠80只, 随机分为假手术组、模型组、CH-Ⅰ干预组和脑活素(cerebrolysin, CBL)阳性对照组。应用线栓法短暂性闭塞左侧大脑中动脉建立缺血再灌注损伤模型。CH-Ⅰ组和CBL组在再灌注0、3、6和12 h腹腔注射CH-Ⅰ和CBL, 剂量均为20 mg/kg;假手术组和模型组注射同体积生理盐水。在再灌注后24 h, 应用改良神经功能缺损评分(modified Neurological Severity Score, mNSS)检测大鼠行为功能变化, TTC染色检测脑梗死体积, Nissl染色观察缺血皮质区神经细胞形态结构, TUNEL染色检测缺血皮质区神经元凋亡情况, 蛋白质印迹法检测缺血皮质区磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated kinase, pERK)1/2、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶(phosphorylated mitogen-activated protein kinase ERK kinase, pMEK)1/2、磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(phosphorylated cAMP response element-binding protein, pCREB)和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)表达的变化。结果再灌注后24 h, 模型组mNSS评分及脑梗死体积显著高于和大于假手术组(P均<0.001);CH-Ⅰ组和CBL组mNSS评分及脑梗死体积均较模型组显著降低(P均<0.05), 但CH-Ⅰ组与CBL组之间差异无统计学意义。Nissl染色和TUNEL染色显示, CH-Ⅰ组变性细胞指数和凋亡细胞指数均显著低于模型组(P均<0.01), 但与CBL组相比差异无统计学意义。蛋白质印迹分析显示, 与假手术组相比, 模型组缺血皮质区pMEK1/2、pERK1/2和pCREB表达显著增强, BDNF表达显著减弱(P<0.05);与模型组比较, CH-Ⅰ组pMEK1/2、pERK1/2和pCREB表达显著降低(P均<0.05), BDNF表达显著增高(P<0.05)。结论 CH-Ⅰ能缩小脑梗死体积和改善神经功能, 其机制可能与抑制MEK-ERK-CREB通路以及增强BDNF表达相关。

广防己致大鼠慢性肾小管-间质损伤的实验研究Ⅰ

目的: 观察广防己醇提取物(RAFE)急性以及不同剂量的RAFE对肾脏慢性毒性。方法:采用常规的急性毒性实验方法和用不同剂量的RAFE(2 5 . 0 ,12 .0 0 ,2 0 0. 0mg·kg-1·d-1)以及马兜铃总酸(10. 0mg·kg-1·d-1)给大鼠间断灌胃13周,分别于给药第4 ,8,13周留取血、尿和肾组织标本,检测相关肾功能和组织学变化。结果:RAFE的LD50 为36. 8g·kg-1,LD50 95 %可信限为38 .8～2 .8 .9g·kg-1;不同剂量的RAFE作用早期,大鼠肾功能改变为氮质血症、大量蛋白尿以及尿NAG酶升高。肾脏组织形态学:中、大剂量和总酸组给药早期主要表现以皮髓质交界为主的急性肾小管坏死,而后可见部分动物肾间质纤维化。结论:NAG可作为大鼠早期肾功能损伤的观测指标之一;RAFE中、大剂量间断灌胃13周均可导致大鼠肾小管功能损害。