抗人晚期糖基化终产物受体胞外段不同表位单克隆抗体的制备

目的 制备抗人晚期糖基化终产物受体(RAGE)胞外段单克隆抗体。方法 用纯化人重组RAGE胞外段(氨基酸序列23～342)免疫Balb／c小鼠，取其脾细胞与NS—1融合制备杂交瘤，经筛选和两次克隆化，从制备的腹水中纯化单克隆抗体。结果和结论 获得两株杂交瘤细胞B2．2和E10，其分泌单抗的亚型均为IgG2b。经ELISA、Westernblot和流式细胞仪鉴定，证明两株单抗均可结合重组RAGE及表达于细胞表面的RAGE，且两株抗体识别的位点为远隔表位，所建立的双夹心法可用于检测可溶性重组RAGE。这两株抗体将为研究RAGE相关疾病提供有效的工具。

人晚期糖基化终产物受体胞质内段融合蛋白表达载体的构建与表达

目的构建人晚期糖基化终产物受体胞质内段(hRAGE-C)GST融合蛋白的重组原核基因表达载体并进行表达与纯化,研究其功能并鉴定与其相互作用的蛋白。方法采用PCR方法扩增hRAGE基因编码区的胞质内段,并将其重组于pGEX-KG载体中。重组质粒经PCR、酶切、序列鉴定分析后,转化大肠杆菌BL21,以异丙基β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导产生hRAGE胞质内段的GST融合蛋白。结果PCR、酶切和测序结果表明所克隆的GST/hRAGE-C原核表达载体完全正确,继而表达、纯化获得了相对分子质量约35 000的融合蛋白(符合预期大小)。结论将hRAGE胞质内段构建于含有GST标记的载体上并获得融合蛋白的高效表达。

利拉鲁肽通过抑制AGEs与RAGE结合对2型糖尿病颈动脉内膜厚度的影响

探讨胰高糖素样肽-1受体激动剂(GLP-1RA)利拉鲁肽对于2型糖尿病患者人晚期糖基化终产物(advancedglycationendproducts,AGEs)与人晚期糖基化终产物受体(the Receptor of advanced glycation endproducts,RAGE)表达的影响,并探讨与颈动脉内膜厚度的关系。方法 选取2022年6月至2023年4月收治的42例2型糖尿病患者,对所有患者进行基线检测。给予利拉鲁肽治疗6个月后,再次检测所有指标。另选44例同时期在院体检的非糖尿病患者作为对照组。采用配对T检验、二分类logistic回归的方法分析利拉鲁肽治疗前后AGEs和RAGE水平变化与颈动脉内膜厚度变化的关系。结果 探讨2型糖尿病患者接受利拉鲁肽治疗对其颈动脉内膜厚度的影响。研究期限为6个月,结果 表明在治疗后,患者的右侧颈动脉内膜厚度相较于治疗前显著减少,这一变化在统计上具有显著性(P<0.05)。然而,左侧颈动脉内膜的厚度变化则未显示出统计学上的显著性(P>0.05)。此外,通过对多种因素进行二分类logistic回归分析,研究还发现AGEs(晚期糖基化终产物)和其相应的受体RAGE是2型糖尿病发展的重要危险因素。结论 与非糖尿病患者相比,2型糖尿病患者AGEs和RAGE水平较高,给予利拉鲁肽治疗后AGEs和RAGE水平可显著降低,并可影响颈动脉内膜厚度的变化。利拉鲁肽通过对AGEs/RAGE通路的调控,减缓动脉粥样硬化的进展,发挥心血管保护效应。