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题名人NT-proBNP的克隆及原核表达
被引量:1
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作者
史跃杰
李慧
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机构
河南省中医院检验科
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出处
《放射免疫学杂志》
CAS
2006年第3期250-253,共4页
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文摘
目的:克隆人氨基末端脑钠肽(am ino-term inal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)基因,构建原核表达载体并纯化表达产物。方法:采用PCR从正常成人cDNA中扩增NT-proBNP基因,将其克隆至pGEM-T中,测定其核苷酸序列。然后构建原核表达载体pGXE4T-2-NT-proBNP,用IPTG诱导表达,GSH-agarose亲和纯化蛋白。结果:经PCR扩增获得NT-proBNP基因,测序正确,在大肠杆菌中融合表达后,该蛋白的表达量占菌体总蛋白的20%,用SDS-PAGE和W estern b lot鉴定,显示其相对分子量34600。经亲和纯化后的GST-NT-proBNP的纯度可以达到96%,得率为1.8mg/100m l。结论:NT-proBNP的纯化成功,为建立NT-proBNP检测方法奠定了基础。
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关键词
人氨基末端脑钠肽
克隆
原核表达
纯化
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Keywords
human amino- terminal pro- brain natriuretic peptide, cloning, prokaryotic expression, purification
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分类号
R543.3
[医药卫生—心血管疾病]
R394
[医药卫生—医学遗传学]
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