土大黄提取物对人永生化表皮角质形成细胞(HaCaT)增殖的影响

目的土大黄根醇提物化学组分分析及其对人永生化表皮角质形成细胞(HaCaT细胞)增值的影响。方法利用D101大孔树脂、HPLC对土大黄根70%乙醇提取物(原粗提取物)进行分离纯化、主要化学组分分析,同时观察对HaCaT细胞增殖的作用。结果通过D101大孔树脂处理得到了30%、50%、70%、90%乙醇洗脱部位的出膏率分别为5.4%、14.8%、11%、0.72%。HPLC检测得知,30%洗脱部位占0.151%,成分为大黄素;50%洗脱部位占1.952%,成分为芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄素甲醚;70%洗脱部位占21.409%,成分为芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄素甲醚;90%洗脱部位占1.927%,成分为大黄酸、大黄素、大黄素甲醚;土大黄根70%乙醇提取物(原粗提取物)占1.591%,成分为芦荟大黄素和大黄酸;对HaCaT细胞增殖的抑制作用由强到弱依次为90%乙醇洗脱部位、70%乙醇洗脱部位、50%乙醇洗脱部位、70%乙醇提取物(原粗提取物)、30%乙醇洗脱部位,抑制率分别为17.55%、16.66%、10.99%、10.25%和7.86%。结论土大黄根醇提物70%乙醇洗脱部位是最佳富集部位(21.409%)、也是最佳洗脱部位。土大黄根70%乙醇提取物(原粗提取物)及其不同洗脱部位均对HaCaT细胞增殖具有一定的抑制作用,其作用可能与土大黄所含的蒽醌类成分有关,提示土大黄具有治疗银屑病的作用。

姜黄素诱导人永生化表皮HaCaT细胞凋亡中Nucleophosmin的表达和定位变化

该文以姜黄素诱导处理前后的人永生化表皮HaCaT细胞为研究对象,对核仁磷酸蛋白(nucleophosmin,NPM)在核基质中存在、分布及其与凋亡相关基因产物在姜黄素处理前后HaCaT细胞中的共定位关系进行观察研究。Western blot结果显示,NPM存在于人永生化表皮HaCaT细胞核基质蛋白组分中,并在姜黄素处理后的细胞核基质中表达下调,免疫荧光显微镜观察显示,NPM定位在核基质上,经姜黄素处理后出现分布位置与表达水平的变化,激光共聚焦显微镜观察可见NPM与HaCaT细胞中凋亡相关基因Bax、Bcl-2、mtP53和Rb基因产物均存在共定位关系,但在姜黄素处理后细胞中其共定位分布区域出现变化。研究结果证实NPM是一种核基质蛋白,定位于核基质上,NPM在HaCaT细胞诱导凋亡过程中的表达分布及其与凋亡相关基因产物的共定位现象值得进一步探索和研究。

hnRNP A2/B1在人永生化表皮HaCaT细胞凋亡过程中的表达及其调控作用研究

该文以姜黄素诱导人永生化表皮HaCaT细胞凋亡为基础,对hnRNP A2/B1在核基质中的存在、分布及其与细胞凋亡相关基因产物的共定位及相互作用关系进行了研究。蛋白质印迹结果显示,hnRNP A2/B1存在于HaCaT细胞核基质蛋白组分中,在经过姜黄素处理后,表达下调;激光共聚焦显微镜观察显示,hnRNP A2/B1在HaCaT细胞中分别与Fas、p53和Bax等基因产物具有共定位关系,姜黄素处理后其共定位区域出现由核膜或核仁向胞质转移的趋势。GST pull-down实验证实,hnRNPA2/B1分别与Fas、p53和Bax有直接相互作用关系。结果表明,hnRNPA2/B1作为一种核基质蛋白,通过与细胞凋亡相关基因产物的相互作用参与HaCaT细胞的凋亡诱导调控过程,这对深入认识核基质蛋白在细胞凋亡过程中的调控机制具有重要意义。

紫铆花素对人黑色素瘤细胞A375与人永生化角质形成细胞HaCaT共培养细胞生物学活性的影响

目的探讨紫铆花素对人黑色素瘤细胞A375与人永生化角质形成细胞HaCaT共培养细胞生物学活性的影响。方法建立A375细胞与HaCaT细胞的共培养细胞体系,实验分为对照组(等体积培养液),紫铆花素低、中、高剂量组(以下简称低、中、高剂量组,0.5,1.0,5.0μg/L)。采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;采用流式细胞仪检测细胞的周期分布和线粒体膜电位;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测干细胞因子(SCF)和其受体c-Kit,以及小眼畸形相关转录因子(MITF)的mRNA表达水平;采用Western blot法检测细胞酪氨酸酶相关蛋白1,2(TRP-1,TRP-2)及SCF,c-Kit,MITF的蛋白表达水平。结果与对照组比较,中、高剂量组细胞的增殖率均显著升高(P<0.01);与对照组比较,各剂量组G0/G1期细胞比例均显著降低,S期和G_(2)/M期细胞比例均显著升高(P<0.01),高线粒体膜电位细胞比例均显著升高(P<0.05或P<0.01),SCF,c-Kit,MITF的mRNA表达水平及SCF,c-Kit,MITF,TRP-1,TRP-2的蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论紫铆花素可能通过调节SCF,cKit,MITF的表达而影响A375细胞与HaCaT细胞共培养细胞的增殖、细胞周期和线粒体膜电位等细胞生物学活性。

亚砷酸钠诱导人永生化表皮细胞恶性转化模型的建立

目的探讨砷诱发永生化人表皮细胞(HaCaT)的恶性转化作用。方法 (1)长期低浓度亚砷酸钠(NaAsO2)处理HaCaT,观察细胞生长性状变化;(2)流式细胞术检测细胞周期;(3)注射处理后的HaCaT至裸鼠皮下致瘤试验。结果 (1)0.05 mg/L NaAsO2处理的HaCaT传代培养25代以后,细胞形态和生长方式均发生明显改变,增殖能力旺盛,倍增时间明显缩短;(2)0.05 mg/L NaAsO2处理的HaCaT细胞周期发生改变,处于S期的细胞比例增加;(3)0.05 mg/L NaAsO2所致恶性转化的HaCaT能在裸鼠皮下形成肿瘤;肿瘤组织病理切片显示为低分化鳞癌。结论长期暴露于低浓度NaAsO2可引起HaCaT发生恶性转化,且具有致瘤性。

驱虫斑鸠菊中紫铆素对人永生化角质形成细胞株HaCaT增殖及细胞分泌因子的影响

目的:研究驱虫斑鸠菊(VW)中紫铆素对人永生化角质形成细胞株HaCaT的增殖及细胞分泌因子的影响,初步探讨VW中紫铆素治疗白癜风的机制。方法:采用MTT法测定0(空白对照)、0.1、0.5、1.0、5.0、10.0 μg/mL紫铆素作用于HaCaT细胞48 h后的细胞存活率;采用酶联免疫吸附法测定0.5、1.0、5.0 μg/mL紫铆素作用于HaCaT细胞48 h后培养液中细胞分泌因子内皮素1(ET-1)、ET-3、黑素细胞刺激素(MSH)、干细胞因子(SCF)、碱性纤维细胞生长因子(bFGF)的含量。结果:与空白对照比较,0.1~5.0 μg/mL紫铆素作用48 h后细胞存活率均有不同程度升高,而10.0 μg/mL紫铆素作用后细胞存活率降低;0.5、1.0、5.0 μg/mL紫铆素作用48 h后培养液中ET-1、SCF、bFGF含量均显著增加(P<0.01),1.0、5.0 μg/mL紫铆素作用48 h后培养液中ET-3、MSH含量显著增加(P<0.01)。结论:紫铆素可促进HaCaT细胞的增殖,其作用机制可能与促进细胞分泌因子ET-1、ET-3、MSH、SCF、bFGF的分泌有关。

中波紫外线辐射对原代及永生化角质形成细胞损伤能力的比较研究

目的 : 观察原代角质形成细胞和永生化HaCaT角质形成细胞对中波紫外线照射的反应差异。方法 : 采用不同剂量中波紫外线 (UVB)照射上述两种细胞 ,评估UVB对细胞作用的时间及剂量效应 ,以倒置光学显微镜观察细胞受损程度 ,MTT法检测细胞活性。结果 : UVB照射后 ,细胞损伤程度均随照射剂量加大而加重 ;另经 2 4h、4 8h及 72h孵育后 ,对两种细胞进行不同时间段的细胞活性 (MTT)比值比较(72h 2 4h ,72h 4 8h) :分别为原代角质形成细胞 (1.16和 1.6 3)和HaCaT细胞 (0 .96和 0 .91)。MTT结果显示低剂量紫外线照射时 ,细胞损伤恢复可发生在照射后 4 8h;高剂量紫外线照射后 ,两种细胞的损伤程度均随孵育时间延长而加重。结论 : 原代角质形成细胞抵抗紫外线照射损伤的能力较强 ,而HaCaT细胞相对较易受损。

周期性拉伸应力与人永生化角质形成细胞的黏附和铺展

背景:皮肤组织所处的力学环境以及上皮细胞的铺展状态与伤口愈合和瘢痕形成过程关系密切。目的:分析胞外力学刺激对细胞铺展的作用,并检测细胞的增殖状态进一步分析铺展形态对细胞增殖等生理活动的影响。方法:通过FX-4000柔性基底加载系统对人永生化角质形成细胞(HaCaT)进行周期性拉伸应力正弦波加载,加载程式0.2 Hz,10%拉伸幅度。在0,24,48 h对细胞的铺展形态进行对比,利用流式细胞仪检测分析细胞的增殖,并利用免疫荧光染色方法对比分析纽蛋白在细胞内的分布。结果与结论:HaCaT细胞在加载24 h后分裂期细胞较多,铺展形态无明显变化;加载48 h后HaCaT细胞形态发生较为明显的变化,分裂期细胞较静态对照组略有减少;拉伸应力作用下纽蛋白的分布由细胞核周围的膜区域向细胞边缘集中。结果表明:适度的力学加载能够在保持细胞铺展和黏附状态下,促进细胞增殖;周期性持续拉伸应力的作用时间是HaCaT细胞铺展形态和与基底黏附位点的重要影响因素。

中波紫外线照射对HaCaT细胞Janus激酶-信号转导及转录激活因子信号通路和白细胞介素-10、12表达的影响

目的:探讨中波紫外线辐照对人永生化表皮细胞(HaCaT)中Janus激酶(JAK)-信号转导及转录激活因子(STAT)信号通路和相关炎症因子白细胞介素(IL)-10、IL-12表达的影响。方法:实验分正常对照组(0 m J/cm^(2))和3个不同剂量辐照组,辐照组分别采用紫外线(30、60、90 mJ/cm^(2))辐照HaCaT细胞,辐照后24 h,通过光镜观察细胞形态的变化;细胞计数法(CCK8)检测细胞活力;实时荧光定量PCR检测IL-10 mRNA和IL-12 mRNA的表达水平;酶联免疫吸附试验检测IL-10和IL-12的含量;蛋白免疫印迹实验检测JAK1、JAK2、p-JAK1、p-JAK2和p-STAT1、p-STAT3的蛋白表达水平。结果:与正常对照组相比,HaCaT细胞经不同剂量紫外线辐照24 h后,细胞出现皱缩、变成圆形、细胞核突出,细胞活力随着辐照剂量的增加而降低(P<0.01);IL-10、IL-12的含量及IL-10 mRNA、IL-12 mRNA的表达水平随着辐照剂量的增加而升高(P<0.05);p-JAK1、p-JAK2和p-STAT1、p-STAT3蛋白表达水平随着辐照剂量的增加而升高(P<0.05);JAK1和JAK2蛋白表达水平的变化差异无统计学意义。结论:中波紫外线辐照HaCaT细胞引起了JAK-STAT信号通路及炎症相关因子IL-10、IL-12的表达改变。

五味子乙素对UVB辐射诱导HaCat细胞凋亡的抑制作用及其机制

目的研究五味子乙素(SchB)对中波紫外线(ultraviolet radiation b,UVB)辐射诱导人表皮角质永生化细胞(HaCat)凋亡的抑制及其作用。方法 MTT法检测五味子乙素(SchB)对UVB辐射诱导HaCat细胞凋亡的抑制作用;Hoechst染色检测细胞凋亡;RT-PCR检测SchB对HaCaT基因表达的影响。结果 SchB对HaCaT细胞生长未显示出抑制作用,且可以抑制由UVB辐射引起的细胞凋亡,并降低了UVB诱导的p53、p21、Caspase-3等与凋亡有关基因的表达。结论 SchB可通过降低紫外线辐射后细胞的凋亡基因的表达从而抑制UVB对皮肤细胞的损伤,发挥其抗光老化作用。

马钱子组分对人HaCaT细胞毒性作用的比较

目的研究马钱子生物碱及其不同组分对人永生化表皮细胞系Ha Ca T细胞的毒性作用。方法体外培养Ha Ca T细胞,加入相同质量浓度的马钱子碱、士的宁、马钱子碱与士的宁的混合物,和马钱子总生物碱作用于细胞24 h后,采用MTT比色法测定不同生物碱的细胞增殖抑制作用;流式细胞仪检测对Ha Ca T细胞的凋亡,比较马钱子生物碱不同组分对Ha Ca T细胞的毒性作用。结果士的宁对Ha Ca T细胞的抑制率和细胞凋亡率大于马钱子碱;马钱子碱和士的宁混合物组对Ha Ca T细胞的抑制率和细胞凋亡率大于马钱子总生物碱。结论马钱子生物碱组分均对Ha Ca T细胞存在细胞毒作用,呈剂量依赖关系,但马钱子碱的细胞毒性明显小于士的宁。

中药白疕合剂对体外培养HaCaT细胞肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6表达的影响

目的观察中药白疕合剂对体外培养人永生化表皮角质形成细胞(Ha Ca T细胞)分泌肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6及TNF-αm RNA、IL-6 m RNA表达的影响,并探讨其作用机制。方法采用ELISA法检测白疕合剂对Ha Ca T细胞分泌TNF-α、IL-6的影响;采用RT-PCR方法检测白疕合剂对Ha Ca T细胞TNF-αm RNA、IL-6m RNA表达的影响。结果白疕合剂低、中、高剂量组干预Ha Ca T细胞后,对TNF-α、IL-6的分泌量及TNF-αm RNA、IL-6 m RNA的表达均有明显的抑制作用。白疕合剂高剂量组对IL-6分泌量的抑制作用及降低TNF-αm RNA、IL-6m RNA的表达与消银颗粒组和阿维A组比较差异无统计学意义;对TNF-α的抑制作用与消银颗粒组比较差异有统计学意义,与阿维A组比较差异无统计学意义。结论白疕合剂可能通过抑制TNF-α、IL-6的分泌和降低TNF-αm RNA、IL-6 m RNA的表达,发挥对银屑病的治疗作用。

中药白疕合剂对体外培养HaCaT细胞增殖与凋亡的影响

目的:观察中药白疕合剂对体外培养人永生化表皮角质形式细胞(HaCaT细胞)增殖与凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:SD大鼠50只随机分为空白血清组,白疕合剂低、中、高剂量组和阿维A组,用药后制备血清,干预体外培养HaCaT细胞模型,采用MTT法检测白疕合剂对HaCaT细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测白疕合剂对HaCaT细胞凋亡的影响。结果:用白疕合剂低、中、高剂量组干预HaCaT细胞,分别培养24 h、48h、72 h后,对HaCaT细胞增殖均有明显抑制作用且呈现浓度依赖性,白疕合剂对HaCaT细胞增殖的抑制作用72h时最强;流式细胞术结果示白疕合剂低、中、高剂量组细胞凋亡率明显增高,凋亡率随药物浓度增高而上升。结论:白疕合剂发挥治疗银屑病的作用,可能与通过抑制HaCaT细胞增殖并诱导其凋亡相关。

中药白秓合剂对HaCaT细胞CXCR2蛋白表达及TNF-α诱导的HaCaT细胞IL-6表达的影响

目的:观察中药白疕合剂对人永生化角质形成细胞(Ha Ca T细胞)CXC趋化因子受体2(CXCR2)蛋白表达及肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导的Ha Ca T细胞分泌白细胞介素(IL)-6和IL-6 mRNA表达的影响,并探讨其作用机制。方法:用白疕合剂干预Ha Ca T细胞,Western-blot检测CXCR2蛋白表达;用白疕合剂干预TNF-α诱导的Ha Ca T细胞,ELISA检测IL-6分泌量,RT-PCR检测IL-6 mRNA表达。结果:白疕合剂中、高剂量组对CXCR2蛋白的表达有明显的抑制作用;白疕合剂低、中、高剂量组对IL-6分泌量和IL-6 mRNA表达均有明显的抑制作用且呈浓度依赖性。结论:白疕合剂可能通过抑制IL-6分泌,降低IL-6 mRNA、CXCR2蛋白表达发挥对银屑病的治疗作用。

纳升液相色谱-飞行时间质谱鉴定HaCaT细胞膜蛋白

[目的]探讨通过纳升液相色谱-飞行时间质谱检测人永生化表皮细胞的膜蛋白质的方法。[方法]对人永生化表皮细胞进行贴壁培养,然后对处于对数生长期细胞的膜蛋白进行提取、富集和酶解,用nano-HPLC-TOF/TOF-MS对蛋白质进行鉴定,最后用生物信息学技术对鉴定蛋白进行分析和归类。[结果]在鉴定的15个蛋白中,与细胞膜相关的蛋白有9个,占比例的60%。生物信息学分析表明,这些蛋白在分子功能上主要涉及催化,结构分子活性和结合;在生物学进程上,这些蛋白主要归类为代谢,细胞成分形成和细胞生物进程等。[结论]纳升色谱-飞行时间质谱是鉴定膜蛋白的有效方法。

纳豆提取物对UVB诱导HaCaT细胞炎症因子表达的影响

为研究纳豆提取物对中波紫外线(UVB)诱导角质形成细胞炎症因子表达的影响,以蒸煮法制备纳豆提取物,使用不同浓度的纳豆提取物与人永生化表皮细胞(HaCaT细胞)进行共培养24h,采用UVB照射HaCaT细胞,以MTT法检测细胞存活率,以酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的含量。结果表明,HaCaT细胞在UVB照射下有明显的损伤,1.25%、2.50%、5.00%(体积分数,下同)的纳豆提取物可显著抑制HaCaT细胞中TNF-α和IL-6表达(P<0.01),5.00%纳豆提取物可显著抑制HaCaT细胞中IL-1β表达(P<0.01)。说明纳豆提取物可显著抑制UVB照射后HaCaT细胞中炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)表达,具有减轻紫外线辐射后引起的皮肤炎症性损伤的潜力。

红树莓对UVB诱导HaCaT光损伤的抑制作用

为研究红树莓对中波紫外线(UVB)诱导的人表皮角质形成细胞(HaCaT)光损伤的抑制作用,用20、40、80mg/mL3个不同剂量的红树莓果汁预处理人永生化表皮角质形成细胞(HaCaT细胞)6h,再采用60mJ/cm2强度UVB照射细胞;用MTT法检测细胞的生存率,采用比色法检测细胞中丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(Hyp)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH–Px)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性,用荧光法检测细胞内活性氧自由基(ROS)的含量,用倒置显微镜和流式细胞仪观察、检测细胞的凋亡状况。结果表明:UVB辐射对HaCaT细胞造成比较严重的损伤;相比于空白对照组,UVB辐射模型组HaCaT细胞活性下降了29.54%,SOD和GSH–Px活性极显著降低(P<0.01);相比于模型组,红树莓各剂量组可显著提高UVB照射后HaCaT细胞的活性(P<0.05或P<0.01),提高SOD和GSH–Px活性(P<0.01),减少MDA和ROS含量(P<0.05或P<0.01),降低LDH活性和增加Hyp含量(P<0.01),呈剂量依赖关系,减轻UVB所导致的细胞损伤,凋亡率降低。红树莓可以明显减少UVB诱导HaCaT细胞的氧化损伤和凋亡,具有显著的光保护功效,其作用机理与增强细胞抗氧化能力、加速清除氧自由基以及促进胶原蛋白合成有关。

人的原代上皮角质形成细胞和永生化的上皮角质形成细胞HaCaT的增殖能力的比较

目的:筛选适合充当组织工程皮肤的种子细胞,比较原代培养的人原代上皮角质形成细胞和永生化的上皮角质形成细胞HaCaT的增值能力。方法:将两种细胞(小儿包皮环切术后的组织培养表皮角质形成细胞,永生化的上皮角质形成细胞HaCaT),分别接种于96孔板,通过MTT检测细胞1,3,5,7,9,11天的生长情况;当两种细胞融合至60%时分别取1×106个细胞,通过流式细胞检测细胞的周期。结果:永生化的上皮角质形成细胞HaCaT每隔一天即可传代一次,原代上皮角质形成细胞每3天传代一次;细胞周期:永生化上皮角质形成细胞HaCaT的G1期和S期的比例高于原代上皮角质形成细胞。生长曲线:MTT检测两种细胞1,3,5,7,9,11的生长情况,永生化的上皮角质形成细胞HaCaT的生长速度明显高于原代上皮角质形成细胞。结论:永生化上皮角质形成细胞HaCaT的增殖能力要高于原代培养的上皮角质形成细胞。

纳米二氧化硅致Nrf-2基因缺陷人永生化表皮细胞氧化损伤的研究

[目的]探讨纳米二氧化硅(nano-SiO_2)致核因子E2相关因子2(Nrf-2)基因缺陷型人永生化表皮细胞的氧化应激损伤效应。[方法]采用RNA干扰技术构建人永生化表皮细胞(HaCaT)Nrf-2基因缺陷细胞模型,以终质量浓度(后称浓度)为2.5、5.0、10.0 mg/L的nano-SiO(215 nm粒径)分别染毒HaCaT细胞和Nrf-2基因缺陷细胞24 h,检测细胞内活性氧(ROS)、8-羟化脱氧鸟苷(8-oHdG)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等氧化应激指标,并对细胞总蛋白和核蛋白中Nrf-2蛋白的表达水平进行分析。[结果]5.0、10.0 mg/L nano-SiO_2可引起HaCaT细胞的活力明显降低(P<0.05),而2.5 mg/L nano-SiO_2开始即可引起Nrf-2基因缺陷细胞活力呈剂量依赖性降低(r=-0.914,P<0.05),Nrf-2基因缺陷细胞的活力均明显低于同浓度组的HaCaT细胞(P<0.05)。各浓度组细胞内ROS、8-oHdG和MDA水平均呈剂量依赖性增高,而T-SOD和GSH-Px的含量则呈剂量依赖性降低;与同浓度组HaCaT细胞相比,Nrf-2基因缺陷细胞中相关指标的变异程度更大,差异有统计学意义(P<0.05)。正常HaCaT细胞中,低剂量组总Nrf-2蛋白和低、中剂量组核Nrf-2蛋白的表达水平增高(P<0.05);而随着nano-SiO_2暴露浓度的进一步增高,两种蛋白的表达水平又呈降低的趋势。与HaCaT细胞的阴性对照比较,Nrf-2基因缺陷细胞中总Nrf-2蛋白表达水平下降,核Nrf-2蛋白表达水平未见差异。[结论]5.0 mg/L nano-SiO_2可体外诱导HaCaT细胞发生氧化应激性损伤,Nrf-2基因缺陷可通过改变细胞的抗氧化防御能力,增加HaCaT细胞对nano-SiO_2的敏感性。

大黄酚及P38阻断剂对紫外线诱导人永生化表皮细胞光老化的影响及机制研究

目的 研究大黄酚及P38阻断剂SB203580抑制中波紫外线诱导的人永生化表皮细胞（HaCaT immortalizedhuman epidermal cells,HaCaT）光老化的作用及其作用机制.方法 采用MTT法检测不同浓度的大黄酚及SB203580对HaCaT细胞增殖的影响;将细胞按随机数字表法分为空白组、模型组、大黄酚组、P38阻断剂组.培养24 h后,大黄酚组及P38阻断剂组分别加入10-6 mol/L大黄酚及10-7 mol/L SB203580溶液.继续培养24 h,除空白组外,其他各组细胞于紫外灯下照射,照射强度0.61 mW/cm2,照射时间7 min,照射距离10 cm.继续培养24 h后,采用MTT法检测各组细胞的增殖活性;Western Blot检测各组细胞中P38、磷酸化P38（P-P38）、TNF-α 及IL-6蛋白表达.结果 与空白组比较,模型组HaCaT细胞增殖率降低（P〈0.01）;与模型组比较,大黄酚组及P38阻断剂组HaCaT细胞增殖率升高（P〈0.01）;与模型组比较,大黄酚组及P38阻断剂组细胞P-P38[（0.419±0.029）、（0.398±0.015）比（0.497±0.051）]、TNF-α[（0.435±0.025）、（0.411±0.021）比（0.509±0.040）]及IL-6[（0.457±0.027）、（0.432±0.018）比（0.478±0.036）]蛋白表达降低（P〈0.01）.结论 大黄酚及SB203580可抑制紫外线诱导的HaCaT细胞光老化,其作用机制可能与抑制P38MAPK通路及炎症因子表达有关.