H_3N_2亚型人流行性感冒病毒HA_1的蛋白序列同源性比较、变异规律及结构与功能的分析

应用生物信息学数据库和工具,结合自身的实验结果,对现有的H3N2亚型人流行性感冒(流感)病毒全球分离株的HA1氨基酸序列和蛋白分子结构进行了分析研究。初步的进化分析结果表明,历史上的分离株大致分为以年代划分为特征的两大谱系,即1968～1984/1985年的谱系,时间跨度为18年;1984/1985～1997/2000年的谱系,时间跨度为13～17年。它们分别起源于两类毒株,并在各自的谱系内发展演化,基本上不存在大规模相互交叉渗透的现象。在1984/1985年,两大谱系发生交替转换和过渡,说明流感病毒的起源、发展和演化是有一定规律性的,这可能对流感的监测预报有一定的指导意义。绝大多数毒株的二硫键组成位点和糖基化位点是极其保守的。受体结合位点(RBS)的一部分构成成份保守;其他构成成份发生变异甚至高变,并与某些抗原决定簇位点重合,可能参与了抗原抗体相互作用。5个抗原决定簇位点的变异各有其特点。A和B位点的变异表现最活跃,抗原性最强,但B位点稍弱于A位点。C和D位点的抗原性一般,且D位点的变异性低于C位点。E位点抗原性一般。在各位置的变异中,大多常是相同相近性质或相同种类的氨基酸相互替换。HA1蛋白全序列的熵(entropy)峰值作图的分析表明,HA1蛋白上121～126位等区域或位点可能独立,或参与构成了某些已知或未知?

在疫苗免疫选择压力下H_9N_2亚型禽流行性感冒病毒HA基因的遗传变异

为了解H9N2 亚型禽流行性感冒 (流感 )病毒在同亚型灭活疫苗的选择压力下的遗传变异情况 ,对某鸡场的感染鸡群进行连续 4年的跟踪监测 ,对使用疫苗前和持续使用疫苗后不同时段分离到的H9N2 亚型禽流感病毒的HA基因进行全序列分析。结果表明 ,在使用第一次分离的病毒株制备的疫苗后 8个月分离到的病毒株 ,其HA基因仅发生一个氨基酸的差异 ;但在继续使用该疫苗的第二个和第三个年头分离的病毒株 ,它们的HA基因则一直在发生较大的变化。这一发现对进一步研究禽流感病毒在不断使用疫苗的选择压力下发生变异的规律 。

表达流行性感冒病毒HA基因非复制型重组腺病毒的构建及免疫效果的研究

通过RT PCR扩增流行性感冒(流感)病毒HA基因,克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack CMV,该重组质粒与腺病毒DNA共转化E.coliBJ5183,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒DNA,将其转染293细胞获得重组腺病毒。PCR证实HA基因已整合至腺病毒基因组中,Westernblot结果检测到重组病毒感染293细胞中HA的表达。重组病毒经滴鼻和灌胃两种途径免疫小鼠,结果2次免疫后滴鼻组和灌胃组均产生明显的免疫应答,血清IgG抗体滴度分别为1∶10000和1∶1000。除血清IgG外,还在肺灌洗液中检测到分泌型IgA。滴鼻组的免疫效果强于灌胃组。经小剂量攻毒实验显示,重组腺病毒保护率为100%。该文成功构建了表达流感病毒HA基因的非复制型重组腺病毒,重组病毒免疫小鼠可产生较好的免疫效果。

两株H_9N_2亚型禽流行性感冒病毒HA基因序列分析

The complete cDNA sequences of HA genes of two AIV isolates were presented in this paper The result of comparative sequence analysis seemed to suggest that these two isolates may be identical to three other AIV strains(H 9N 2) isolated from HongKong recently and these five strains may have the same origin in that the identity of the HA protein sequences of these AIV isolates is higher than 95%

危重症甲型H1N1流行性感冒病毒肺炎的临床特征——附17例报告

目的:探讨危重症甲型H1N1流行性感冒病毒(甲流)肺炎患者的主要临床特点,分析各临床检验指标与病情严重程度的关系。方法:收集入住呼吸重症监护病房(RICU)的17例危重症甲流肺炎患者的临床资料,归纳分析其临床特征。结果:17例患者以发热、咽痛、咳嗽、肌肉酸痛为主要症状。双肺多发实变影12例(71%)。入院后白细胞为(3.4～25.1)×109/L,中性粒细胞(2.72～21.84)×109/L,中性粒细胞比例58.6%～96.4%,淋巴细胞5.1%～21.6%。CRP 34.6～381.9 mg/L,乳酸脱氢酶(LDH)310～820 U/L,白蛋白<30 g/L10例(59%),ALT升高6例(35%),血清肌酐升高5例(29%),脑钠肽升高4例(24%)。氧合指数<300 mm Hg 13例(76%)。均予奥司他韦治疗,气管插管机械通气支持治疗3例(18%)。死亡2例(12%),均为男性,均为气管插管机械通气者。结论:LDH、CRP升高、炎性细胞增多提示危重症甲流肺炎患者肺部损害加重;机械通气支持治疗对于部分肺内广泛实变者效果不理想,且相关的并发症是部分患者病情加重或死亡的促发因素。

宁波市2002～2004年流行性感冒的检测与HA1序列分析

目的:为了解近年来宁波市流行性感冒的流行情况以及病毒抗原性的变异情况.方法:采用MDCK细胞培养和鸡胚培养法分离流感病毒,交叉血凝抑制法进行抗原分析,对甲3型流感病毒的HA1血凝素基因作了核苷酸序列测定.结果:2002年～2004年共分离到流感病毒330株,其中甲3型324株(98.2%)、甲1型1株(0.3%)、乙型5株(1.5%).甲3型毒株2002年与2003年及2004年的抗原比分别为1.9和2.45,核苷酸序列测定结果2002年～2004年HA1区约以5个氨基酸改变的速度变异.结论:3年来宁波市一直以甲3型流感为主要流行株,甲1型及乙型流感则以散发存在.甲3型流感病毒虽说没有发生重大变异,但其抗原性每年都有一定的漂移.

一株2011年出现的季节性甲型H1N1流行性感冒病毒血凝素基因特性的研究

本文通过比较2011年分离培养的1株季节性甲型H1N1流行性感冒(简称流感)病毒(A/Shanghai/1167/2011(H1N1))与历年季节性甲型H1N1流感病毒的血凝素(HA)基因,追溯该病毒的基因变异与来源,探讨该毒株的出现对流感防控工作的意义。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增病毒的HA和神经氨酸酶(NA)片段,并进行测序;应用分子生物学软件对获得的序列进行分析,绘制基因进化树;同时,通过血凝抑制试验检测2011年下半年健康人群中该流感病毒的抗体水平。结果显示,A/Shanghai/1167/2011(H1N1)的HA基因序列与世界卫生组织(WHO)2007～2008年季节性甲型H1N1流感病毒疫苗株A/Brisbane/59/2007(H1N1)最接近,同源性达99.2%,与新型甲型H1N1流感病毒A/California/07/2009疫苗株同源性仅为72.4%。其HA基因裂解位点为PSIQSR↓GLF,尚未出现高致病性的分子特征。HA片段共编码557个氨基酸,有9个潜在的糖基化位点,序列与2009年前WHO疫苗株A/NewCaledonia/20/1999(H1N1)、A/SolomonIslands/3/2006(H1N1)和/Brisbane/59/2007(H1N1)相比,分别有15、12和4处不同,这些差异分布在Sa、Sb、Ca1、Ca2、Cb5个抗原决定簇的氨基酸差异分别有5、5和2处。该毒株在健康人群血清的抗体阳性率为34.33%,几何平均效价(GMT)为10.38。A/Shanghai/1167/2011(H1N1)是2011年出现在上海地区的一个季节性甲型H1N1流感病毒毒株,其抗原变异与既往季节性甲型H1N1流感病毒相比不大,但在以A(H1N1)pdm09为主要流行株的年份检测到散在发生的既往季节性甲型H1N1流感病毒毒株应当引起重视,其在人群中的抗体水平较低,易引起流行,需要提高对类流感人群中此种毒株的持续监测。

上海2009甲型H1N1流行性感冒病毒全基因组分析

2009年全球暴发2009甲型H1N1流行性感冒(简称流感)疫情,上海于2009年5月出现第1例输入型病例。为了解上海地区输入型2009甲型H1N1流感病毒的生物学特征,以上海较早发现的2例输入型甲型H1N1流感患者作为研究对象,分离出A/Shanghai/37T/2009和A/Shanghai/71T/2009病毒,利用实时定量荧光反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定病毒,通过扫描透射电子显微镜观察、免疫荧光检测、全基因组测序和生物信息软件分析,对这2株流感病毒形态、结构、耐药性、基因特点和病毒型别等进行研究。结果显示,病毒呈现正黏病毒颗粒形态特征;犬肾(MDCK)细胞内的病毒能与患者恢复期血清反应。此2株病毒的全基因核酸序列和氨基酸序列与美国参考株A/California/04/2009(H1N1)有较高同源性,其中第31位氨基酸残基发生改变。对金刚烷胺耐药,而对奥司他韦敏感。基于全基因组的系统发育分析,确认此2株病毒属2009甲型H1N1流感病毒。

2009A/H_1N_1流行性感冒病毒疫苗研究近况

2009年全球范围内暴发的流行性感冒（流感）是由一种新型甲型流感病毒2009A／H1N1引起，2009年4月首次将其命名为“猪流感”。目前，2009A／H1N1流感疫情仍在全球范围内进一步扩大，并无显著下降趋势。据世界卫生组织（WHO）报道，全球各大洲均已报道发现2009A／H1N1流感患者目，至2009年12月13日全世界已超过208个周家或地区报道了实验室明确诊断的2009A／H1N1流感，其中死亡病例超过10582例。

中国历年H_3N_2亚型人流行性感冒病毒血凝素基因的序列测定及分析

测定了 2 7株中国 196 8～ 2 0 0 0年的人H3 N2 亚型流行性感冒 (流感 )病毒分离株HA1基因的核苷酸全序列 ,其中包括 7株流行代表株 :A3/Beijing/ 1/ 6 8、A3/Guangdong/ 2 4 3/ 72、A3/Beijing/ 39/ 75、A3/Guangdong/ 38/ 77、A3/Beijing/ 2 6 6 / 85、A3/Beijing/ 30 / 95、A3/Shanghai/ 1/ 98。阐明了这些流感病毒分离株的基因结构、变异本质、进化发展过程以及这些毒株与其它分离株之间的遗传进化亲缘关系 ,为应用生物信息学研究流感病毒基因组变异规律等打下了基础。初步的进化分析表明 ,历年来的人流感病毒H3 N2 亚型的起源和进化分为两个分支谱系 ,并在 1984 /1985年进行了交替转换 ;且有一部分人的H3 N2

高致病性H5亚型禽流行性感冒病毒血凝素单克隆抗体的制备与初步应用

以禽流感病毒株Ck/HK/Yu22/02(H5N1)作为免疫原,利用常规杂交瘤技术和血凝抑制试验法成功地筛选出6株稳定分泌抗高致病性H5亚型禽流感病毒血凝素的单克隆抗体(单抗),分别命名为2F2、3C8、3FC1、7C6、10HD4和13G4。经血凝抑制试验法分析,结果发现这6株单抗具有特异性高、反应性强、识别谱宽且互补等特点。基于单抗2F2,初步建立了三种H5N1病毒诊断方法,经评估证实均具有很好的特异性。由此说明,研究制备的抗H5亚型禽流感病毒血凝素单抗可适用于H5N1病毒的诊断。

2009甲型流行性感冒病毒感染者常规免疫学检测的临床意义

本文旨在探讨2009甲型流行性感冒(流感)病毒(H1N1)感染者的常规免疫学指标与健康人的差异。采用流式细胞术检测32名甲型H1N1感染者外周血不同T细胞亚群,同时进行血清特定蛋白检测及血细胞计数。结果显示,与健康者相比,甲型H1N1感染者外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+T细胞(cells/μl)显著降低,血清补体成分C3、C4(g/L)及C反应蛋白(mg/L)显著升高,血小板、白细胞、淋巴细胞与嗜酸性粒细胞显著降低,单核细胞显著升高。结果提示,甲型H1N1感染者的常规免疫学指标出现异常发展趋势。

2001～2003年湖北省流行性感冒监测结果分析

目的 为控制湖北省流感流行提供参考。方法 总结、分析流感监测点病毒分离及流感样病人三间分布。结果 3年的监测结果表明 ,H 3N2、H1N1和 B型流感毒株在我省都有流行 ,三种毒株的流行优势交替出现 ,2 0 0 1年以流行 H1N 1为主 ,2 0 0 2年 B型流感是主要流行株 ,2 0 0 3年为 H3N2。湖北省的流感流行有三个流行峰 ,分别为 1～ 2月 ,7～ 9月和 12月 ,流感所累及的人群以 0～ 4岁儿童为主。结论 引起湖北省流感流行的毒株是 H3N2、H 1N1和 B型流感病毒 ,流行规律没有发生改变。

一起甲型H1N1流行性感冒家庭聚集性发病事件分析

目的:探讨新型甲型H1N1流行性感冒(流感)家庭聚集性发病的流行病学情况、临床特点。方法:对一起家庭聚集性发病事件进行流行病学和临床分析。结果:该家庭4名成员全部发病,均发热,体温均高于38.0℃,全身酸痛症状明显,而上呼吸道症状略轻,均无肺部实变体征,仅有咽红充血,X线胸部摄片无肺炎征象,4例外周血白细胞数在正常范围,淋巴细胞降低,淋巴细胞绝对值均低于0.8×109/L。结论:新型甲型H1N1流感病毒传染性较强,临床表现较轻,外周血血白细胞未升高,淋巴细胞计数百分比降低,淋巴细胞计数绝对值均低于1.0×109/L,可考虑把以上表现作为病原学检测结果出来之前的诊断参考指标。

抗流行性感冒病毒药物研究进展

目的:介绍抗流行性感冒病毒(包括H5N1病毒)药物的研究进展、临床应用及耐药性。方法:采用近期国内外相关文献进行综述。结果:疫苗能有效预防流感的发生,抗病毒药物对流感的预防和治疗都有积极的效果,但其耐药性的发展不容忽视。结论:开发应用新疫苗及特异性抗流感病毒药物M2蛋白抑制剂和神经氨酸酶抑制剂等仍是防治流感的基本手段。

2018-2019年池州市流行性感冒病原学分析

目的分析2018—2019年池州市流行性感冒(简称流感)病原学特征,为流感防治提供科学依据。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)对流感样患者的咽拭子样本进行病毒核酸检测和分型。结果2018、2019年流感病毒检出率分别为30.09%、28.92%,差异无统计学意义(P>0.05)。流行特征表现为甲型和乙型流感病毒混合感染。男、女性之间流感病毒检出率差异无统计学意义(P>0.05)。5~14岁病毒检出率最高(37.03%)。流感疫情爆发时的病原检出率显著高于哨点监测检出率(P<0.01)。结论池州市流感的防控重点是甲型和乙型流感病毒的混合感染,重点人群是少年儿童,特别是中小学生。相关部门应加强流感病原学监测,及时掌握流行动态。

2016—2019年北海市人民医院流行性感冒流行病学特征分析

目的分析北海市人民医院近年来流行性感冒(简称“流感”)的流行特征和病毒变化。方法从《国家疾病监测信息报告管理系统》中导出北海市人民医院2016—2019年报告的流感病例资料,应用Logistic回归分析和χ2检验方法对流感病例的流行特征和病毒检测结果进行分析。结果2016—2019年北海市人民医院共报告流感病例2566例,其中2019年报告1982例;报告病例数男性(1398例)较高,年龄集中在25~59岁(790例),发患者群以散居儿童为主(1402例),发病高峰在12月至次年1月;共检出流感病毒833株,其中,甲型流感485株(H1N1289株),乙型流感348株(Victoria 194株)。15~24岁年龄段者患乙型流感的风险比0~4岁高,男性患乙型流感的风险比女性高,差异均具有统计学意义(P<0.05);5~14岁年龄段者患H3N2流感的风险比0~4岁高,而60岁以上者患Yamagata流感的风险比0~4岁高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论流行性感冒具有春冬高发的特性;甲型流感病毒为优势毒株,尤其是H1N1;15~24岁年龄段者更容易患乙型流感;2019年呈爆发流行,要继续加强流感的监测和爆发流行趋势的预测。

浅谈抗流行性感冒病毒药物

目的介绍抗流行性感冒病毒（包括H5N1病毒）药物的研究进展、临床应用及耐药性。方法采用近期国内外相关文献进行综述。结果疫苗能有效预防流感的发生，抗病毒药物对流感的预防和治疗都有积极的效果，但其耐药性的发展不容忽视。结论开发应用新疫苗及特异性抗流感病毒药物M2蛋白抑制荆和神经氨酸酶抑制剂等仍是防治流感的基本手段。

猪流行性感冒的中西医治疗措施研究

猪流行性感冒又称H1N1流感,是一种由H1N1型流感病毒引起的急性呼吸道传染病,具有较强的传播性和可变性,一旦爆发往往会在短时间内引起广泛的传播和感染,给人们的生命健康带来严重威胁。面对猪流感肆虐情况,中西医结合治疗措施备受关注。中西医结合的治疗措施在处理猪流行性感冒病情上具有显著的优势和潜力。中医重视整体调理和个体化治疗,能够有效改善患者的免疫能力和减轻症状;西医则强调早期诊断和药物治疗,可以迅速控制病情发展。将中西医结合运用于猪流感的防治工作中,有望在提高治愈率、降低传染率和改善患者生活质量等方面取得巨大成效。基于此,简单讨论猪流行性感冒的中西医治疗价值,以供参考。