片仔癀对LncRNA-ANRIL介导大肠癌淋巴管新生的影响

目的:研究片仔癀(PZH)体外对长链非编码RNA-ANRIL(LncRNA-ANRIL)介导大肠癌淋巴管新生的抑制作用及其机制。方法:将体外培养人大肠癌细胞HCT-116用PZH进行干预,分为对照组和PZH干预组(0.25、0.50、0.75 mg/mL),采用CCK-8实验检测细胞活力,用RT-qPCR检测LncRNA-ANRIL的表达,用Western blot法检测促淋巴管新生因子VEGF-C蛋白表达;用Lipofectamine RNAiMAX转染HCT-116细胞,分为Si-NC组和Si-ANRIL组,采用RT-qPCR法检测LncRNA-ANRIL的表达,在倒置显微镜下观察细胞形态变化,用CCK-8实验检测细胞活力,Western blot检测促淋巴管新生因子VEGF-C蛋白表达;分别以Si-NC、Si-ANRIL和Si-NC+PZH(0.25 mg/mL)干预HCT-116细胞并收集细胞培养上清液即肿瘤培养上清(TSNs)用于培养人淋巴内皮细胞(HLEC),采用CCK-8实验检测细胞活力,Transwell实验观察细胞迁移能力和细胞侵袭能力,管腔形成实验观察细胞管腔形成能力。结果:不同浓度PZH干预HCT-116细胞均可显著抑制其活力(P<0.01),下调LncRNA-ANRIL表达(P<0.01)和VEGF-C蛋白表达,呈浓度依赖性;在HCT-116细胞中沉默LncRNA-ANRIL的表达,与Si-NC组比较,Si-ANRIL组LncRNA-ANRIL表达显著降低(P<0.05),且可降低细胞密度、细胞活力(P<0.01)和VEGF-C蛋白表达;收集的TSNs上清干预HLEC后,与Si-NC组比较,Si-ANRIL和Si-NC+PZH(0.25 mg/mL)组可显著降低HLEC活力、迁移能力、侵袭能力和管腔形成能力(P<0.01)。结论:PZH可抑制大肠癌细胞LncRNA-ANRIL表达及其介导的大肠癌淋巴管新生,LncRNA-ANRIL是PZH抑制大肠癌淋巴管新生的作用靶点之一。

华蟾素注射液对与人肝癌HepG-2细胞共培养下人淋巴管内皮细胞的增殖及管状结构形成的影响

目的探讨华蟾素注射液对与人肝癌HepG-2细胞共培养下人淋巴内皮细胞增殖、迁移及管状结构形成的影响。方法采用Transwell方法建立HepG-2细胞与人淋巴内皮细胞共培养系统;通过绘制细胞生长曲线,观察华蟾素注射液对共培养系统中人淋巴内皮细胞增殖的影响;通过细胞迁移实验,观察华蟾素注射液对共培养系统中人淋巴内皮细胞迁移的影响;通过基质胶实验,观察华蟾素注射液对共培养系统中人淋巴内皮细胞管状结构形成的影响。结果华蟾素注射液能够显著抑制与HepG-2细胞共培养下人淋巴内皮细胞增殖(P<0.05),迁移(P<0.05)及管状结构形成(P<0.05),呈剂量依赖性。结论华蟾素注射液抑制与HepG-2细胞共培养下人淋巴内皮细胞增殖,迁移及管状结构形成,可能是华蟾素注射液抑制肿瘤淋巴道转移的机制之一。

外泌体miR-217通过下调E-cadherin对宫颈癌Siha细胞淋巴管新生的影响

目的:初步探讨外泌体miroRNA-217(miR-217)影响宫颈癌淋巴管新生的可能机制。方法:将体外培养的Siha细胞分为空白组(Siha细胞)、阴性对照组(Siha细胞慢病毒空载组,LV-NC)、阳性实验组(Siha细胞慢病毒miR-217沉默组,LV-miR-217-siRNA)。收集各组细胞外泌体进行实验。Transwell实验检测细胞侵袭能力,基质胶小管形成法检测人淋巴内皮细胞(HLECs)成管情况,Western blot实验检测蛋白表达。结果:外泌体miR-217表达下调的Siha细胞组较另两组侵袭力明显减弱;外泌体miR-217表达下调会显著降低HLECs成管能力;外泌体miR-217对淋巴内皮细胞E-Cadherin蛋白表达显著抑制。结论:外泌体miR-217能促进Siha细胞的侵袭能力和淋巴管新生,可能是通过下调淋巴内皮细胞E-cadherin蛋白表达来发挥作用。