单胺氧化酶单克隆抗体对大鼠血管源性脑水肿的保护作用

目的观察单胺氧化酶单克隆抗体(MAO mAb)对大鼠血管源性脑水肿(VBE)的治疗作用。方法75只Wistar大鼠随机分为无脑水肿组、脑水肿未治疗组、脑水肿生理盐水组、脑水肿甘露醇组与脑水肿MAO mAb组。用腹腔注射苯肾上腺素的方法制成VBE模型,然后分别注射生理盐水、甘露醇或MAO mAb到大鼠腹腔,通过远红外线水分分析仪分别测定各组脑灰、白质水分含量百分比。用Evans blue (EB)测定血脑屏障(BBB)的通透性。结果MAO mAb对减少VBE大鼠脑灰、白质水分含量、降低BBB通透性均有显著效果(P<0.01 ),尤其对白质的脱水作用更显著(P<0.01),而与无脑水肿组想比无显著差异(P>0.05)。甘露醇组也可降低灰质、白质水肿,但对灰、白质无特异性差异,降低BBB通透性差。结论VBE中BBB的通透性改变与单胺氧化酶活性有关,MAO mAb对VBE尤其对脑白质水肿有选择性治疗作用。

抗人脑源性神经营养因子单克隆抗体的制备及初步鉴定

目的制备抗人脑源性神经营养因子(BDNF)单克隆抗体.方法利用BDNF纯品与酸处理后的沙门氏菌菌体(抗原:菌体为1:5)混合免疫BALB/C小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb.结果获得3株抗BDNF的单克隆抗体,分别命名为B1、B2和4D1,mAb的Ig亚类均为IgG1.ELISA间接法测定腹水mAb效价为1×10-6～1×10-5,各单抗相对亲和力结果为B2＞B1＞4D1.结论成功研制出抗人BDNF单克隆抗体,为进一步研究BDNF在体内组织的表达及分布提供了一种工具,并为基因工程制备BDNF提供了检测方法.

碱性磷酸酶单克隆抗体对大鼠血管源性脑水肿的治疗作用

目的 观察碱性磷酸酶单克隆抗体 ( AAP)对大鼠血管源性脑水肿 ( VCE)的治疗作用。方法 60只大鼠随机分为正常组、VCE组与 AAP组。用 AAP注射到已制成的 VCE模型的 Wistar大鼠腹腔 ,通过远红外线水分分析仪分别测定各组脑灰、白质水分含量百分比。用 Evan' s blue( EB)测定血脑屏障 ( BBB)的通透性。结果 AAP组对减少 VCE大鼠脑灰、白质水分含量 ,降低 BBB通透性均有显著效果 (均 P <0 .0 1) ,而与正常组比较无显著差异 ( P >0 .0 5 )。结论 AAP具有治疗 VCE的作用 。

非鼠源性单克隆抗体技术及其在兽医学上的应用

自从1975年kohler和Milstcin创立淋巴细胞杂交瘤技术以来,单克隆抗体(mAb)已在生物学和医学领域显示了极其广阔的应用前景.但是,由于鼠源性mAb存在着难以识别动物种类之间的等位差异性和用于动物(包括人)

非鼠源性单克隆抗体技术及其在兽医学上的应用

自从1975年Khler和Milstein创立淋巴细胞杂交瘤技术以来,单克隆抗体(mAb)已在生物学和医学领域显示了广阔的应用前景。

人源性抗肝癌单克隆抗体的免疫组化及细胞免疫化学研究

目的 建立人源性抗肝癌单克隆抗体细胞株，探讨其特异性。方法 用IL-2和美洲商陆（PWM）体外刺激肝癌患者外周血淋巴细胞，再与小鼠骨髓瘤细胞NS-1融合，获得3株人源性抗肝癌单克隆抗体AF3，CB7，CH1，同时进行免疫组化及细胞免疫化学研究。结果 3株人源性抗肝癌单克隆抗体AF3，CB7，CH1，可以和肝癌组织发生强阳性反应，和胃癌有微弱阳性反应，和其他3种癌组织无反应，3株单抗均能和肝癌QGY-7703细胞呈强阳性反应，与胃癌细胞有微弱阳性反应，与其他3种癌细胞反应为阴性。结论 通过人-鼠杂交瘤技术获得了3株能分泌人源性抗肝癌单克隆抗体杂交瘤细胞株，免疫组化与细胞免疫化学证实该单抗具有较好的特异性。

人源化治疗性单克隆抗体的研究进展

治疗性单克隆抗体结合了免疫学和药理学的原理，应用于疾病治疗已有几十年。单克隆抗体在治疗中的运用要特别考虑到生物药效率、耐受性、变化性和适用性。抗体的临床应用结果反映出了单克隆抗体药物存在的一些问题：（1）鼠源性单抗容易产生人抗鼠抗体（HAMA），从而削弱其治疗的有效性：（2）由于鼠单抗是异源蛋白，在体内很快就被清除掉，并对清除抗体的器官产生损害；（3）抗体的分子量相对较大，所以抗体分子到达靶部位不足；（4）鼠源性单抗在人体中常不能有效地活化补体和Fc受体相关的效应功能，因此其应用受到了较大的限制．这些就推动了人源性单抗的产生。

基于单个外周血浆细胞技术筛选MRSA人源性单克隆抗体的实验研究

目的建立耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(meticillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)人源性单克隆抗体筛选方法。方法从52份重组MRSA多价亚单位疫苗的Ⅰ期临床研究受试者血液样本中筛选出抗体滴度高的血样,利用流式细胞术分选其外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中浆细胞,以mRNA为模板PCR扩增抗体重链、轻链可变区基因,通过重叠延伸PCR分别将将抗体重链、轻链可变区基因与CMV启动子、人恒定区及多聚A尾连接,构建成单克隆抗体线性表达载体,PEI瞬时转染293T细胞进行抗体表达。结果流式细胞术分选出1 120个浆细胞,筛选出了39个针对MRSA 5种保护性抗原α-溶血素(Hla)、铁离子表面决定蛋白B(Isd B)、金葡菌蛋白A(SpA 5)、肠毒素B(SEB)及锰离子结合蛋白C(Mnt C)的人源性单克隆抗体,ELISA结果显示抗体能与抗原蛋白结合。结论通过单个外周血浆细胞技术,成功筛选出了能够与抗原结合的MRSA人源性单克隆抗体,为研究MRSA治疗性人源性抗体奠定了良好基础。

人源性单克隆抗体识别的血清卵巢癌相关抗原

应用体外致敏和ＤＮＡ转染技术构建的永生化Ｂ淋巴细胞系所产生的抗卵巢癌人源性单克隆抗体ＡＴ４为探针，所建立的夹心ＥＬＩＳＡ法测定了人血清卵巢癌相关抗原ＣＡＴ４。以２０例正常妇女血清的Ａ４９０均值加３个标准差（Ｘ±３Ｓ）之和（０．１９Ａ４９０Ｕ）为阳性阈值，对２０例卵巢癌和１２例卵巢囊肿病人的血清进行了检测，结果发现，卵巢癌为１５／２０阳性，卵巢囊肿２／１２阳性；此外，２例卵巢癌腹水及卵巢癌细胞ａｏ１０／１７培养上清液均为阳性。经统计学分析，ＡＴ４识别的卵巢癌相关抗原ＣＡＴ４存在于卵巢癌病人血清中，其敏感性为７５％，特异性为８３．３３％。因此，ＡＴ４－ＥＬＩＳＡ对于人血清卵巢癌相关抗原的测定，具有较好临床应用前景。

卵巢癌组织表达人源性单克隆抗体识别的肿瘤相关抗原

应用抗卵巢癌人源性单克隆抗体（ＭｃＡｂ）ＡＴ４对人卵巢肿瘤进行免疫组织化学分析，以观察ＡＴ４识别的肿瘤相关抗原在人卵巢癌组织中表达的发生率和意义。所用材料为福尔马林固定和石蜡包埋的活检标本。切片经过氧化物酶抗过氧化物酶（ＰＡＰ）染色。结果发现：原发性卵巢癌的ＭｃＡｂＡＴ４免疫组织化学染色的阳性率为５／６，转移性卵巢癌为３／６，良性卵巢肿瘤为３／２１。本研究结果表明。

新型人源化CCR5单克隆抗体leronlimab治疗未用药的转移性三阴性乳腺癌的Ⅰb/Ⅱ期临床试验首位患者开始用药

CytoDyn公司宣布新型人源化CCR5单克隆抗体来罗单抗(leronlimab,PRO 140)治疗未用药的转移性三阴性乳腺癌(mTNBC)的Ⅰb/Ⅱ期临床试验首名患者开始用药。在mTNBC上进行的临床试验结果将确定批准途径,包括寻求突破性疗法资格和FDA的加速审批。

治疗性单克隆抗体研究进展

杂交瘤技术使鼠源单克隆抗体(鼠单抗)被广泛用于人类疾病的诊断和研究,建立了治疗性抗体的第一个里程碑。但随后出现的人抗鼠抗体等副作用极大地限制了鼠单抗的临床应用。随着生物学技术的发展和抗体基因结构的阐明,应用DNA重组技术和抗体库技术对鼠单抗进行人源化改造,先后出现了嵌合抗体、改型抗体和全人抗体,同时也涌现了各种单抗衍生物,它们从不同角度克服了鼠单抗临床应用的不足,未人类疾病治疗带来新的曙光。我们就上述治疗性抗体人源化的研究进展做简要综述。

人源抗癌胚抗原单克隆抗体的获得与鉴定

目的:获得抗癌胚抗原(CEA)的单克隆抗体(mAb)。方法:采用特殊的5轮筛选法(逐轮降低抗原包被量,严格洗脱条件),以固相化的人源CEA抗原淘筛本室构建的人源特异性噬菌体抗体库。获得有特异结合活性的CEA噬菌体抗体,酶切鉴定插入的抗体基因。切去噬菌粒上衣壳蛋白gⅢ基因,构建表达载体,在大肠杆菌中可溶性表达抗CEA抗体Fab段,ELISA、Western blot检测抗体免疫学活性,测序分析抗体基因。结果:筛选出4株与CEA抗原特异结合而与BSA、HBsAg无交叉结合反应的噬菌体抗体。切去gⅢ基因,在大肠杆菌中表达可溶性抗体Fab段,表达量在细菌培养液上清和细菌裂解液中无统计学意义。可溶性抗体与人CEA抗原有特异结合活性,与BSA、HBsAg无交叉结合反应。Western blot显示在略大于相对分子质量(Mr)45000处有一明显条带,与Mr48000的Fab大小一致。DNA测序分析表明Fab段VH属于IgGVH3基因家族,VL属于Vκ1基因家族。结论:抗CEA噬菌体抗体库的构建和人源抗CEAmAb的制备,为CEA阳性表达肿瘤的靶向治疗奠定基础。

单胺氧化酶单克隆抗体对大鼠脑单胺氧化酶活性变化的研究

近年来,脑水肿尤其是血管源性脑水肿(VBE)的发病机制研究以及探讨其药物治疗已愈来愈被重视,因为VBE的解决将大大降低脑卒中、脑外伤等疾病的病死率和致残率,提高人类生存和生活质量.对VBE发病机制有血脑屏障开放、脑微循环障碍、自由基损伤、钙超载、酶屏障受损等学说,本研究从酶屏障的角度探讨VBE的发病机制及单胺氧化酶单克隆抗体对VBE的作用.

肿瘤人源单克隆抗体药物的研究进展及临床应用

自从杂交瘤技术诞生以来,单克隆抗体治疗临床疾病主要经历了鼠源单克隆抗体,人源化改造过的单克隆抗体和完全的人源单克隆抗体3个阶段,三者均能对肿瘤、自身免疫疾病和器官移植产生的排斥反应有效果[1],其中鼠源单克隆抗体的免疫原性和毒副作用最大[2],

抗人源IL-31受体A的单克隆抗体nemolizumabⅡ期临床试验资料公开发表

中外制药公司的抗人源IL-31受体A的单克隆抗体nemolizumab治疗中重度特应性皮炎的Ⅱ期临床试验资料在新英格兰医学杂志上发表。Ⅱ期临床XCIMA试验入选264名中重度特应性皮炎患者,随机按1∶1∶1∶1分到nemolizumab（0.1、0.5、2.0 mg/kg每4周1次）和安慰剂组。主终点是治疗12周后,与安慰剂组比,瘙痒数值评定量表得分改善情况。

治疗性单克隆抗体的市场现状及展望

继重组蛋白获得商业成功之后,治疗性单克隆抗体(单抗)的开发研制正成为生物技术工业的第二次创新高潮.2002年全球治疗性单抗市场较2001年增长37%,达到了54亿美元.其中嵌合型单克隆抗体占有绝对领先地位,其年增长率高达43%,销售额为38亿美元;其次是人源化单克隆抗体,其销售额超过14亿美元,年增长率约29%.目前,正在开发的治疗性单抗有132个,估计其中有16个产品能在2004年～2008年间获得批准.而随着治疗性单抗现有产品销售额的持续增长及又一轮新产品的集中上市,预计在2008年治疗性单抗的全球市场销售额可达近167亿美元,为2002年的3倍.