口腔黏膜黑色素瘤人源性移植瘤模型的建立及鉴定

目的:建立和鉴定口腔黏膜黑色素瘤(oral mucosal melanoma,OMM)人源性移植瘤(patient-derived xenograft,PDX)模型。方法:将4例原发性口腔黏膜黑色素瘤组织移植于免疫缺陷裸鼠皮下,观察并记录裸鼠成瘤情况,待移植瘤稳定生长后进行传代;利用H-E染色观察原发瘤和移植瘤的组织病理学特征,应用免疫组织化学染色检测黑色素瘤标志物HMB-45、Melan-A、S-100及Ki-67在两者组织的表达水平。结果:4例口腔黏膜黑色素瘤组织皮下移植成功并序列传代;H-E和免疫组织化学染色显示,移植瘤在组织病理形态和4个标志物表达情况上与原发瘤保持一致。结论:本研究成功建立4例口腔黏膜黑色素瘤人源性移植瘤模型,传代移植瘤保留了原发瘤的组织病理学和分子特征,可为口腔黏膜黑色素瘤研究提供理想的临床前动物模型。

人源性移植瘤发生淋巴瘤转变的特点和影响因素及预防措施分析

人源性移植瘤（patient-derived tumor xenografts，PDX）模型是指直接将患者手术或活检新鲜肿瘤组织接种到免疫缺陷小鼠体内而建立的动物模型，在肿瘤生物学研究中起着重要的作用，但是PDX发生淋巴瘤转变却会成为限制PDX模型应用的重要因素。PDX模型中肿瘤发生淋巴瘤转变的特点包括：上皮来源；多为B细胞型淋巴瘤；病理学呈现淋巴瘤的特点，失去上皮肿瘤表面标志物角蛋白以及原发肿瘤组织表面标志物．并表达淋巴瘤相关表面标志物CD45、CD20等：Epstein-Barr病毒（EBV）感染呈阳性。患者原发肿瘤组织的恶性程度、炎性细胞浸润程度、EBV感染状态及小鼠免疫状态是影响PDX发生淋巴瘤转变的重要因素。因此在接种前，对患者原发肿瘤组织的炎性细胞浸润程度及EBV感染情况进行判断与选择，有可能减少淋巴瘤转变的发生。

转化医学视角下头颈癌人源性肿瘤异种移植瘤模型队列的研究愿景

头颈癌位居全球第七大恶性肿瘤,现存多种治疗策略无法满足大部分患者的临床获益需求。同时,缺乏分子分型指导的头颈癌治疗策略也严重阻碍个性化疗法的发展。近年来,以临床前模型为纽带,加快临床问题与基础成果双向转化的新思路逐渐成为业界共识。PDX模型作为肿瘤基础研究和临床转化的桥梁,能够精准复制肿瘤遗传特征和肿瘤进化,在阐析肿瘤发生发展机制中显示出强大的生命力。借助PDX模型组成的治疗队列,彰显出小鼠为患者进行药物筛选和生物标志物分析的独特优势,这种理想的临床前模型能够在符合伦理范畴内最大可能的为患者寻找潜在的治疗策略。

非小细胞肺癌组织裸鼠皮下成瘤性与原发肿瘤临床病理特征的关系

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织在裸鼠皮下人源性移植瘤(patient-derived xenografts,PDX)模型的成瘤性及其与原发肿瘤临床病理特征的关系。方法选取15例NSCLC组织移植于裸鼠皮下,观察成瘤情况,比较移植成瘤组和未成瘤组对应患者的临床病理特征,采用免疫组织化学法检测对应患者癌组织中p63、细胞角蛋白5/6(cytokeratin 5/6,CK5/6)、甲状腺转录因子-1(thyoid transcription factor-1,TTF-1)和Ki-67的表达。结果 15例NSCLC组织在裸鼠皮下移植后成瘤6例,成瘤率为40%。非小细胞肺癌PDX模型的成瘤性与对应患者的TNM分期和肿瘤分化程度相关(P<0.05)。成瘤组对应患者NSCLC组织中TTF-1和Ki-67蛋白阳性表达率高于未成瘤组(83%vs22%;100%vs 22%,P<0.05),p63蛋白阳性表达率则低于未成瘤组(50%vs 100%,P=0.041)。结论 NSCLC组织在裸鼠皮下的成瘤性与对应患者癌组织中p63、TTF-1、Ki-67的表达水平有关,原发肿瘤的分化程度越低、分期越晚者在祼鼠皮下更易成瘤。

肿瘤相关成纤维细胞促进原代胰腺癌细胞生长及人源性异种移植瘤模型体内成瘤

目的优化人原代胰腺导管癌(PDAC)细胞及肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)的分离及培养方法,验证CAFs对原代PDAC细胞的体外生长以及其对高度免疫缺陷模型NOG小鼠体内成瘤的影响,以探索人源性异种移植瘤(PDX)模型构建的新方法。方法首先原代培养手术切除的PDAC组织。以原代PDAC细胞单独培养为对照,观察CAFs和原代PDAC细胞共培养对PDAC细胞传代生长活性的影响。最后在NOG小鼠肩胛部注射混合培养的原代PDAC细胞和CAFs,观察PDX模型建模情况。结果原代PDAC细胞在体外单独培养传代少,均在5代及以内停止生长;与CAFs共培养可促进原代PDAC细胞生长活性,可稳定传至10代以上。NOG小鼠体内注射混合细胞(原代PDAC细胞+CAFs)建模2~3周即可形成肿瘤,而注射CAFs无肿瘤形成。混合细胞法建模有13例(92.9%)成瘤,单一细胞法有9例(64.3%)成瘤,可能因为样本量少,二者成瘤率比较差异无统计学意义(P=0.167);并且肿瘤细胞注射后2、4、6、8周时混合细胞法建模的肿瘤体积均明显大于对应观察时间点单一细胞法建模的肿瘤体积(P<0.01)。结论CAFs对原代PDAC细胞生长传代具有促进作用,原代PDAC细胞与CAFs共培养法可显著提高PDAC原代培养稳定传代,原代PDAC细胞与CAFs混合培养的细胞注射可提高NOG小鼠PDX建模成功率。

基于肿瘤临床前模型建立头颈癌新型药物基因组学的必要性及展望

头颈癌是全球第七大恶性肿瘤类型,超过60%患者初次确诊即为中晚期。靶向治疗和免疫治疗的发展已经显著推动了头颈癌治疗策略的转型,但是临床获益有待进一步提升。肿瘤临床前模型保留了患者肿瘤的基因和表型的异质性,已广泛应用于临床前药物筛选和验证体系。药物基因组学通过将基因组学和药物响应进行匹配,能够基于肿瘤异质性基础进行患者分层,优化治疗策略并挖掘新治疗靶点。本文概述药物基因组学的发展史,从头颈癌治疗现状和异质性特征出发,探讨借助临床前模型开展新型药物基因组学的必要性和可行性。

皮肤鳞状细胞癌小鼠模型建立与应用的研究进展

皮肤鳞状细胞癌(简称皮肤鳞癌)是常见的恶性肿瘤之一,建立相应的动物模型在发病机制研究、药物检测、临床前研究等方面具有重要作用。本文从皮肤鳞癌小鼠模型种类、建模方法、优缺点和应用领域等方面进行总结,以期为临床工作和科研探索提供参考。

口腔黏膜黑色素瘤临床前模型的研究进展

口腔黏膜黑色素瘤(oral mucosal melanoma,OMM)是一类好发于东亚人群的黑色素瘤亚型,具有病因不明、恶性程度高、预后极差等特点。构建不同类型的OMM临床前模型可以辅助进行药物筛选、药效评估,模拟肿瘤侵袭转移等临床特征,进而推动个性化治疗策略应用。临床前模型匮乏是阻碍黏膜黑色素瘤疾病认知和治疗困境突破的重要原因。近年来,OMM临床前模型的构建与应用取得了一定进展,多种OMM临床前模型已被成功构建并开展了实验研究,助力挖掘个性化治疗策略。本文主要对OMM临床前模型研究的最新应用进展进行综述,并对该领域的前景予以展望。