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人源性基因PLC-γ1中SH2-SH2-SH3结构域的克隆、表达及纯化
1
作者
金玉莲
金宁一
+2 位作者
项泽萍
任云霞
陈庆森
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第11期9-13,共5页
利用RT-PCR技术将人源性PLC-γ1中的SH2-SH2-SH3结构域基因扩增并克隆到载体pGEX-2T中,经热激反应转化到大肠杆菌BL21菌株内,在低温(33℃)下、利用IPTG诱导表达构建的重组基因的高效表达体系,利用谷胱甘肽琼脂糖(sepharose)4B纯化得到...
利用RT-PCR技术将人源性PLC-γ1中的SH2-SH2-SH3结构域基因扩增并克隆到载体pGEX-2T中,经热激反应转化到大肠杆菌BL21菌株内,在低温(33℃)下、利用IPTG诱导表达构建的重组基因的高效表达体系,利用谷胱甘肽琼脂糖(sepharose)4B纯化得到高表达的重组蛋白。SDS-PAGE和Western blot检测表明,PLC-γ1的SH2-SH2-SH3结构域重组基因可在低温(33℃)条件下在E.coliBL21细胞中稳定完整表达,但是在较高温度下(37℃)会产生SH2-SH2-SH3结构域不完全表达的现象。上述研究结果为人源性重组基因PLC-γ1中SH2-SH2-SH3结构域的深入研究和广泛应用奠定了基础。
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关键词
人源性plc-γ1
SH2-SH2-SH3结构域
基因克隆
表达
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职称材料
题名
人源性基因PLC-γ1中SH2-SH2-SH3结构域的克隆、表达及纯化
1
作者
金玉莲
金宁一
项泽萍
任云霞
陈庆森
机构
天津市食品生物技术重点实验室
天津商业大学生物技术与食品科学学院
中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第11期9-13,共5页
文摘
利用RT-PCR技术将人源性PLC-γ1中的SH2-SH2-SH3结构域基因扩增并克隆到载体pGEX-2T中,经热激反应转化到大肠杆菌BL21菌株内,在低温(33℃)下、利用IPTG诱导表达构建的重组基因的高效表达体系,利用谷胱甘肽琼脂糖(sepharose)4B纯化得到高表达的重组蛋白。SDS-PAGE和Western blot检测表明,PLC-γ1的SH2-SH2-SH3结构域重组基因可在低温(33℃)条件下在E.coliBL21细胞中稳定完整表达,但是在较高温度下(37℃)会产生SH2-SH2-SH3结构域不完全表达的现象。上述研究结果为人源性重组基因PLC-γ1中SH2-SH2-SH3结构域的深入研究和广泛应用奠定了基础。
关键词
人源性plc-γ1
SH2-SH2-SH3结构域
基因克隆
表达
Keywords
Human
plc-γ
1
SH2-SH2-SH3domain
Cloning
Expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人源性基因PLC-γ1中SH2-SH2-SH3结构域的克隆、表达及纯化
金玉莲
金宁一
项泽萍
任云霞
陈庆森
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
0
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职称材料
已选择
0
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参考文献
引证文献
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