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人源抗菌肽LL-37 被引量:5
1
作者 杨应华 马文儒 +1 位作者 郑国光 吴克复 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第6期847-851,共5页
LL 3 7是迄今在人体中发现的抗菌肽cathelicidin家族中的唯一成员 ,也是人体内唯一的双亲性α螺旋结构的抗菌肽 .LL 3 7在人体的血液细胞和上皮细胞中广泛分布 ,具有广谱抗菌作用 .抗菌活性依赖其螺旋构象的形成 ,通过“地毯样”机制杀... LL 3 7是迄今在人体中发现的抗菌肽cathelicidin家族中的唯一成员 ,也是人体内唯一的双亲性α螺旋结构的抗菌肽 .LL 3 7在人体的血液细胞和上皮细胞中广泛分布 ,具有广谱抗菌作用 .抗菌活性依赖其螺旋构象的形成 ,通过“地毯样”机制杀灭细菌 .LL 3 7有中和内毒素的作用 ,能与LPS和CD14结合 ,中和LPS的生物活性 ,还能利用formylpeptidereceptor like 1(FPRL1)作为受体介导趋化作用 ,招募免疫细胞到感染部位 ,清除病原物 .很多感染性疾病都与LL 3 7低表达或功能失活有关 .LL 3 7是一种多功能的抗菌肽 。 展开更多
关键词 人源抗菌肽 LL-37 活性 趋化作用 防御反应
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人源抗菌肽LL-37对柯萨奇B3病毒诱导的病毒性心肌炎小鼠病毒复制及炎症反应的影响 被引量:2
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作者 刘敬 李薇 孙国文 《岭南心血管病杂志》 CAS 2022年第4期349-354,共6页
目的探讨人源抗菌肽LL-37对病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)小鼠病毒复制和炎症反应的影响及其可能的分子机制。方法将48只BALB/c小鼠随机分成4组:正常对照组(Blank)、模型组(VMC)、LL-37低剂量组(LL-37-L)和LL-37高剂量组(LL-37-... 目的探讨人源抗菌肽LL-37对病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)小鼠病毒复制和炎症反应的影响及其可能的分子机制。方法将48只BALB/c小鼠随机分成4组:正常对照组(Blank)、模型组(VMC)、LL-37低剂量组(LL-37-L)和LL-37高剂量组(LL-37-H),每组12只。除Blank组外,其他组均采用腹腔注射柯萨奇B3病毒(Coxsackie virus B3,CVB3)病毒液构建VMC模型小鼠。于抗菌肽LL-37干预第7天后将小鼠处死并取材。采用苏木素伊红染色观察心肌组织病理学变化;全自动生化仪检测血清心肌损伤标志物心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)浓度;50%终点法测定心肌组织CVB3病毒滴度;实时定量聚合酶链反应法检测心肌组织中CVB3 RNA表达水平;酶联免疫吸附试验法检测心肌组织炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)浓度;Western blot法检测心肌组织TLR-4、MyD88和p-NF-κB p65蛋白表达水平。结果与Blank组比较,VMC组小鼠心肌组织出现明显炎性损伤,且心肌病理积分显著增加[(3.18±0.33)分vs(0.00±0.00)分,P<0.05];血清中心肌肌钙蛋白I、肌酸激酶同工酶和肌红蛋白浓度显著上升;心肌组织中CVB3病毒滴度,CVB3 RNA及IL-1β、IL-6和TNF-α浓度,以及心肌组织中TLR-4、MyD88和p-NF-κB p65等蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。与VMC组比较,LL-37-H组小鼠心肌病理积分显著降低[(1.56±0.27)分vs(3.18±0.33)分,P<0.05],并且以上各检测指标均明显降低(P<0.05),而LL-37-L组小鼠以上各指标均无显著性变化(P>0.05)。结论人源抗菌肽LL-37可抑制VMC小鼠心肌组织中CVB3病毒复制和炎症反应,改善心肌损伤,其机制可能与TLR-4/NF-κB通路的抑制有关。 展开更多
关键词 人源抗菌肽LL-37 病毒性心肌炎 柯萨奇B3病毒 病毒复制 炎症反应 小鼠
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人源抗菌肽LL-37与皮肤病 被引量:1
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作者 丁娟 李家文 《国外医学(皮肤性病学分册)》 2004年第2期98-101,共4页
LL - 37是一种近年来在人体内发现的属于cathelicidins家族的抗菌肽。与防御素相比 ,他不含有半胱氨酸 ,无链内二硫键 ,为具有α螺旋结构的两性分子。他具有广谱的抗菌活性 ,在先天性免疫中发挥着重要的作用 ,并广泛参与获得性免疫及一... LL - 37是一种近年来在人体内发现的属于cathelicidins家族的抗菌肽。与防御素相比 ,他不含有半胱氨酸 ,无链内二硫键 ,为具有α螺旋结构的两性分子。他具有广谱的抗菌活性 ,在先天性免疫中发挥着重要的作用 ,并广泛参与获得性免疫及一些炎症性疾病的发生发展过程。文中就其分子结构、表达调控。 展开更多
关键词 人源抗菌肽 LL-37 皮肤病 活性 血浆 细胞因子
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内含肽介导PHB纯化人源抗菌肽LL-37体系的构建 被引量:3
4
作者 顾银霞 周学章 +1 位作者 宋振威 王玉炯 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期72-76,共5页
新颖的内含肽介导PHB纯化蛋白体系,是一种高效表达、自动切割、纯化方便、费用低廉的蛋白表达纯化体系,有利于蛋白规模化纯化。选用对原核细胞具有毒害作用的小肽——人源抗菌肽LL-37作为纯化对象,通过基因工程技术,构建内含肽介导PHB... 新颖的内含肽介导PHB纯化蛋白体系,是一种高效表达、自动切割、纯化方便、费用低廉的蛋白表达纯化体系,有利于蛋白规模化纯化。选用对原核细胞具有毒害作用的小肽——人源抗菌肽LL-37作为纯化对象,通过基因工程技术,构建内含肽介导PHB纯化人源抗菌肽LL-37体系,并利用该体系纯化LL-37。结果表明,构建的内含肽介导PHB纯化人源抗菌肽LL-37体系可高效表达LL-37融合蛋白,利用构建的纯化体系能对目的蛋白进行纯化。 展开更多
关键词 蛋白表达聚 β-羟基丁酸酯(PHB) 内含 人源抗菌肽LL-37
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人源抗菌肽LL-37原核表达载体的构建及表达
5
作者 顾银霞 周学章 +2 位作者 宋振威 李敏 王玉炯 《宁夏大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2008年第4期337-339,347,共4页
为了使人源抗菌肽LL-37在原核表达载体中获得高效表达,在不改变LL-37氨基酸的基础上,根据大肠杆菌偏爱密码子表,替换LL-37部分密码子,设计一段新的LL-37序列.采用DNA Work设计4条互补引物,利用SOE-PCR技术扩增完整的LL-37目的片段,以pET... 为了使人源抗菌肽LL-37在原核表达载体中获得高效表达,在不改变LL-37氨基酸的基础上,根据大肠杆菌偏爱密码子表,替换LL-37部分密码子,设计一段新的LL-37序列.采用DNA Work设计4条互补引物,利用SOE-PCR技术扩增完整的LL-37目的片段,以pET-PPPI为载体,构建原核表达载体pET-PPPIL,并制备表达菌BL21(DE3)(pET-PPPIL),该菌经诱导高效表达LL-37融合蛋白,为后续纯化LL-37奠定了基础. 展开更多
关键词 聚合酶链式反应 人源抗菌肽LL-37 蛋白表达
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人源抗菌肽LL-37的原核表达及活性鉴定 被引量:3
6
作者 丁静 沈娟 +4 位作者 朱家勇 金小宝 卢雪梅 梅寒芳 李小波 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期18-22,共5页
目的:实现大肠杆菌高效可溶表达人源抗菌肽LL-37。方法:LL-37基因克隆至原核载体pET32a,于大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。运用相关生物信息学软件分析重组蛋白Trx-LL-37的理化性质、亲/疏水性、蛋白质二级结构及其可溶表达概率。实验还... 目的:实现大肠杆菌高效可溶表达人源抗菌肽LL-37。方法:LL-37基因克隆至原核载体pET32a,于大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。运用相关生物信息学软件分析重组蛋白Trx-LL-37的理化性质、亲/疏水性、蛋白质二级结构及其可溶表达概率。实验还考察了不同诱导温度对重组蛋白可溶表达比例的影响。结果:生物信息学分析显示,Trx-LL-37分子量21.5kD,理论等电点6.3,物理性质稳定,二级结构简单,具有可溶表达倾向。重组蛋白最佳诱导温度为17℃,与37℃相比,可溶表达比例由37.2%提高至50.2%,并且总表达量也提高了5%左右。抑菌结果显示纯化产物对多种常见细菌的生长具有抑制作用。结论:可采用融合方式通过原核系统高效可溶表达LL-37,为LL-37的功能研究打下基础。 展开更多
关键词 人源抗菌肽LL-37 生物信息学分析 原核表达 低温诱导 活性
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不同浓度人源性抗菌肽LL-37/PLGA/β-TCP复合支架对兔骨髓间充质干细胞增殖、分化的影响
7
作者 罗万荣 易伟宏 +2 位作者 胡广询 李夏林 赖伟群 《中国医学创新》 CAS 2020年第12期6-11,共6页
目的:研究不同浓度人源性抗菌肽LL-37/聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)/β-磷酸三钙(β-TCP)复合支架对于兔骨髓间充质干细胞(rBMSCs)增殖、分化的影响。方法:制备LL-37/PLGA/β-TCP复合支架材料,按LL-37浓度分为0、1、5、10μmol/L组,另设... 目的:研究不同浓度人源性抗菌肽LL-37/聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)/β-磷酸三钙(β-TCP)复合支架对于兔骨髓间充质干细胞(rBMSCs)增殖、分化的影响。方法:制备LL-37/PLGA/β-TCP复合支架材料,按LL-37浓度分为0、1、5、10μmol/L组,另设置空白rBMSCs培养基为N组,每组三个培养皿,细胞密度为5×10^5个/皿。扫描电镜下观察不同浓度LL-37/PLGA/β-TCP复合支架形态。采用CCK-8检查方法检测各组干预rBMSCs 0、24、48、72、96、120 h后rBMSCs细胞增殖活力。干预rBMSCs 24 h后,采用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测各组成骨相关基因碱性磷酸酶(ALP)、骨形态发生蛋白-1(BMP-1)及骨形态发生蛋白-7(BMP-7)的mRNA相对表达量。干预rBMSCs 24 h后,采用ELISA检测各组ALP、BMP-1及BMP-7的蛋白水平。每个实验独立重复三次。结果:LL-37/PLGA/β-TCP复合支架材料随着LL-37浓度增加而呈现多孔、细胞吸附增多的趋势,促进细胞贴附生长。干预24 h后,10μmol/L组细胞增殖能力明显高于N组(P<0.05);随着干预时间延长,1、5、10μmol/L组均对rBMSCs有促进增殖作用,且呈浓度依赖作用。1、5、10μmol/L组ALP、BMP-1及BMP-7的mRNA相对表达量与蛋白表达水平均高于N组(P<0.05);1、5、10μmol/L组ALP、BMP-1及BMP-7的mRNA相对表达量与蛋白表达水平均呈高表达,且呈浓度依赖。结论:LL-37/PLGA/β-TCP复合支架可以显著促进rBMSCs增殖与分化,是一种潜在的骨组织工程支架。 展开更多
关键词 人源 PLGA/β-TCP复合支架 兔骨髓间充质干细胞 碱性磷酸酶 骨形态发生蛋白
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抗菌肽LL-37抗寄生虫活性研究进展
8
作者 楼俊超 何小芹 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期98-104,共7页
由原虫、蠕虫感染导致的寄生虫病在全球范围内广泛流行,尤其是在热带和亚热带地区,对儿童和成人生命健康均造成威胁。抗寄生虫药的长期使用导致寄生虫对药物敏感性下降甚至出现耐药性。研究表明抗菌肽可抑制寄生虫生长发育,具有潜在抗... 由原虫、蠕虫感染导致的寄生虫病在全球范围内广泛流行,尤其是在热带和亚热带地区,对儿童和成人生命健康均造成威胁。抗寄生虫药的长期使用导致寄生虫对药物敏感性下降甚至出现耐药性。研究表明抗菌肽可抑制寄生虫生长发育,具有潜在抗寄生虫价值,其中LL-37作为组织蛋白酶抑制素(cathelicidin)家族中唯一的人源抗菌肽被广泛研究。本文综述了LL-37抗寄生虫作用的研究进展,并对其作为抗寄生虫药物的候选资源的应用前景进行了探讨。 展开更多
关键词 寄生虫 人源抗菌肽 LL-37 作用机制
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杂合抗菌肽MLH在大肠埃希菌中的融合表达及其抑菌活性研究
9
作者 魏媛 龚国利 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第8期741-746,共6页
目的设计合成杂合肽MLH基因并在大肠埃希菌(Escherichia coli)表达系统中高效融合表达,获得具有抑菌活性的重组蛋白。方法以家蝇抗菌肽Md-Cec、人源抗菌肽LL-37和幽门螺杆菌肽Hp为母体肽,通过生物信息学分析筛选出一条具有抗菌潜力的新... 目的设计合成杂合肽MLH基因并在大肠埃希菌(Escherichia coli)表达系统中高效融合表达,获得具有抑菌活性的重组蛋白。方法以家蝇抗菌肽Md-Cec、人源抗菌肽LL-37和幽门螺杆菌肽Hp为母体肽,通过生物信息学分析筛选出一条具有抗菌潜力的新型杂合抗菌肽MLH并根据E.coli密码子的偏好性编码基因。采用重叠延伸基因扩增(SOE-PCR)技术,通过设计合成3条互补引物合成所需的目的基因,与表达载体pET-32a(+)连接后转化至E.coli表达菌株BL21(DE3),构建基因工程菌pET-32a-MLH/BL21(DE3),用含氨苄青霉素(Amp)的抗性平板筛选阳性菌株,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后采用SDS-PAGE电泳和Western blot检测目的蛋白的表达。对发酵条件进行优化以获得融合蛋白的大量表达,采用Ni 2+亲和层析柱纯化和透析复性的方法将表达的融合蛋白进行纯化和复性,获取具有活性的融合蛋白,采用琼脂孔穴扩散法测定其抑菌活性。结果成功合成基因MLH并与表达载体连接形成重组质粒pET-32a-MLH,构建重组基因工程菌株pET-32a-MLH/BL21(DE3),经IPTG诱导表达相对分子质量单位(Mr)约25×10~3的重组蛋白且主要以包涵体形式存在。对发酵条件进行优化,确定最优发酵条件为:IPTG终浓度为1.0mmol/L;诱导时间为4h;诱导温度为37℃。通过纯化以及复性处理得到重组蛋白对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌均有抑制作用。结论杂合抗菌肽MLH可在大肠埃希菌中融合表达且有一定抑菌活性。 展开更多
关键词 家蝇 人源抗菌肽LL-37 幽门螺杆 杂合 融合表达 活性
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LL-37对COPD模型大鼠Th17/Treg平衡及炎症反应的调节作用
10
作者 李琳 刘菊 +3 位作者 王爱利 肖方喜 戴朝博 李秀娟 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1100-1104,I0001,共6页
目的观察人源抗菌肽LL-37对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡、炎症反应的影响,并探讨可能机制。方法40只Wistar大鼠随机分为正常组、COPD组、LL-37组、LL-37联合DAPT(Notch1/Jagged1信号通路抑制... 目的观察人源抗菌肽LL-37对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡、炎症反应的影响,并探讨可能机制。方法40只Wistar大鼠随机分为正常组、COPD组、LL-37组、LL-37联合DAPT(Notch1/Jagged1信号通路抑制剂)组。正常组室温下正常喂养,COPD组、LL-37组、LL-37联合DAPT组采用烟熏法建立COPD模型。LL-37组大鼠经鼻滴入LL-37(10μg)50μL,LL-37联合DAPT组大鼠经鼻滴入总体积50μL的LL-37(10μg)+DAPT(10μg)。正常组、COPD组大鼠分别经鼻滴入等体积的生理盐水。检测外周血Th17、Treg细胞占比;检测肺泡灌洗液(BALF)中白介素-8(IL-8)、白三烯B4(LTB4)含量;HE染色检测气道重塑指标;Western Blot法检测肺组织Notch1、Jagged1、发状分裂相关增强子1(Hes1)蛋白表达量。结果与COPD组比较,LL-37组外周血Th17占比和Th17/Treg、BALF中IL-8、LTB4含量、管壁厚度/外径(MT%)及管壁面积/气管总面积(MA%)均降低,Treg占比升高(P<0.05);与LL-37组比较,LL-37联合DAPT组外周血Th17占比和Th17/Treg、BALF中IL-8、LTB4含量、MT%及MA%均升高,Treg占比降低(P<0.05)。与COPD组比较,LL-37组Notch1、Jagged1、Hes1蛋白表达量升高(P<0.05);与LL-37组比较,LL-37联合DAPT组Notch1、Jagged1、Hes1蛋白表达量降低(P<0.05)。结论人源抗菌肽LL-37可调节COPD大鼠外周血Th17/Treg失衡,抑制炎症反应及气道重塑,激活Notch1/Jagged1信号通路可能是其发挥治疗作用的机制之一。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 人源抗菌肽LL-37 辅助性T细胞17 调节性T细胞
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Expression of human antimicrobial peptide LL- 37 in Nicotiana tabacum
11
作者 YANGYing-Hua FuBi 《海南师范学院学报(自然科学版)》 2004年第4期356-362,共7页
A cDNA fragment encoding human cathelicidin LL- 37 linked to a signal peptide sequence of tobacco pathogenesis-related protein lb gene was introduced into a plant expression vector, pBin438 and stably integrated into ... A cDNA fragment encoding human cathelicidin LL- 37 linked to a signal peptide sequence of tobacco pathogenesis-related protein lb gene was introduced into a plant expression vector, pBin438 and stably integrated into Nicotiana tabacum cv. NC - 89 genome using Agrobacterium mmefaciens - mediated transformation. The presence of the fusion cDNA in the transgenic plant was confirmed by PCR and its expression was confirmed by Western blot analysis. Protein extracts from transgenic tobacco plant leaves exhibited antibacterial activity. This is the first report of synthesis of biologically active LL - 37 in plants. 展开更多
关键词 人源抗菌肽 LL一37 烟草 基因表达 转基因植物 植物生物反应器
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CYFRA21-1、NSE、CEA、hCAP18、TPS联合检测对肺癌的诊断价值
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作者 陈芳 刘玲玲 《国际医药卫生导报》 2018年第7期1094-1097,共4页
探究血清细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、人源性阳离子抗菌肽18(hCAP18)及组织多肽特异性抗原(TPS)在肺癌诊断中的价值。方法选取肺癌患者52例(肺癌组),肺部良性疾病患者45例(良... 探究血清细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、人源性阳离子抗菌肽18(hCAP18)及组织多肽特异性抗原(TPS)在肺癌诊断中的价值。方法选取肺癌患者52例(肺癌组),肺部良性疾病患者45例(良性疾病组),健康体检者40例(正常组),测定比较三组血清CYFRA21-1、NSE、CEA、hCAP18及TPS水平及阳性检出率,评估各肿瘤标志物及联合检测的诊断效能。结果 肺癌组血清CYFRA21-1、NSE、CEA、hCAP18及TPS水平明显高于良性疾病组及正常组(P<0.05)。肺癌组CYFRA21-1、NSE、CEA、hCAP18、TPS及五项联合阳性检出率为61.54%、51.92%、55.77%、67.31%、75.00%及98.08%,明显高于良性疾病组的8.89%、11.11%、6.67%、11.11%、11.11%及13.33%和正常组的2.50%、2.50%、5.00%、5.00%、7.50%及7.50%(P<0.05)。五项肿瘤标志物联合检测灵敏度为96.15%,准确度为92.70%,明显高于各单项检测(P<0.05)。结论 血清CYFRA21-1、NSE、CEA、hCAP18及TPS联合检测诊断肺癌可减少漏诊的发生,提高准确度。 展开更多
关键词 肺癌 细胞角蛋白19片段 神经元特异性烯醇化酶 人源性阳离子18 癌胚 组织多特异性
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