汉坦病毒H8205株G1-G2/人源白细胞介素2融合基因的稳定表达和免疫效果

目的:探讨汉坦病毒H8205株G1-G2/人源性白细胞介素2(IL-2)融合基因在非洲绿猴肾(Vero)细胞获得稳定表达的可能性,评价融合基因pcDNA3.1/HisB-IL-2-G1-G2的DNA免疫效果。方法:在脂质体介导下,将pcDNA3.1/HisB-IL-2-G1-G2导入Vero细胞,通过G418筛选获得阳性克隆,用间接免疫荧光(IFAT)、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)等方法检测其在Vero细胞中稳定表达的情况。采用肌肉注射质粒的方法来免疫Balb/c小鼠,免疫3次,加强2次,间隔2周,然后用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清特异性抗体,用空斑减少中和试验检测中和抗体。结果:转染了pcDNA3.1/HisB-IL-2-G1-G2后在Vero细胞培养上清和胞质中有融合蛋白的表达,其相对分子量为110 ku。pcDNA3.1/HisB-IL-2-G1-G2可诱导小鼠产生特异性抗汉坦病毒抗体和中和抗体,其效价均高于其他对照组,差异有显著性(P<0.05)。结论:融合基因在脂质体介导下能导入Vero细胞并获得稳定表达。融合基因真核载体疫苗免疫Balb/c小鼠可诱导特异性体液免疫应答,为进一步将其用于我国汉坦病毒疫苗研制提供了依据。

重组人源化白细胞介素2治疗转移性肾癌的临床研究

目的观察重组人源化白细胞介素2皮下注射治疗转移性肾癌的疗效及安全性。方法入组转移性肾癌患者41例，经重组人源化白细胞介素2皮下注射治疗2～4个周期，每个周期共5周。第1个周期：9百万单位（MIU）、每12h1次、第1～5天；第2～4个周期：9MIU、每12h1次、第1～2天，9MIU、每天1次、第3～5天；停药1周后重复。2个周期后评价疗效，有效或稳定的患者继续2个周期治疗。结果意向治疗人群（ITT）集中，完全缓解（CR）0例，部分缓解（PR）7例（17．1％），病情稳定（SD）19例（46．3％），疾病进展（PD）15例（36．6％），总有效率为17．1％[95％可信区间（叫）为5．6％～28．6％]，疾病控制率为63．4％；中位疾病进展时间（下rP）为6个月，中位总生存时间（OS）为22．5个月，1年生存率为71．2％。符合方案人群（PP）集中，CR0例，PR7例（19．4％），SD16例（44．4％），PD13例（36．1％），总有效率为19．4％（95％ CI 为6．5％～32．3％），疾病控制率为63．9％；中位TTP为6个月，中位OS未达到，1年生存率为66．7％。随访显示，治疗获益能够改善患者的长期生存。患者的不良反应以轻中度为主，包括疲乏感（100％）和发热（82．9％）等，3级以上不良反应少见。结论重组人源化白细胞介素2治疗转移性肾癌在中国人中具有一定的疗效，且能延长患者的生存期，其不良反应大部分患者能够耐受。