七叶洋地黄双苷滴眼液联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶治疗青光眼患者药源性干眼症的临床观察

目的探究七叶洋地黄双苷滴眼液联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶治疗青光眼患者药源性干眼症的临床疗效。方法按照随机数字表法将2020年10月~2023年11月期间收治并确诊的青光眼药源性干眼症患者60例分为对照组(重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶,n=30)和研究组(重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶+七叶洋地黄双苷滴眼液,n=30)。评估两组治疗效果、泪液动力学水平、生活质量。结果研究组总有效率(96.67%)高于对照组(73.33%)(P<0.05);治疗4周后,研究组泪液动力学、生活质量各指标水平均优于对照组(P<0.05)。结论七叶洋地黄双苷滴眼液联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶治疗青光眼患者药源性干眼症可有效缓解症状,改善泪液动力学水平,提高生活质量。

促肝细胞生长素联合还原型谷胱甘肽治疗肝衰竭患者的疗效观察

目的探讨促肝细胞生长素联合还原型谷胱甘肽治疗肝衰竭患者的临床疗效。方法选取2019年1月至2021年1月我院收治的68例肝衰竭患者,随机分为研究组(n=34)与对照组(n=34)。对照组采用促肝细胞生长素静脉滴注治疗,研究组在对照组基础上采用还原型谷胱甘肽静脉滴注治疗。对比两组患者的凝血功能、肝功能、临床疗效及复发率。结果治疗前,两组的凝血功能和肝功能指标比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,研究组的凝血功能和肝功能指标明显优于对照组(P<0.05)。研究组总有效率97.06%,明显高于对照组的79.41%(P<0.05)。随访6个月,研究组复发率为2.94%,明显低于对照组的17.65%(P<0.05)。结论促肝细胞生长素联合还原型谷胱甘肽治疗肝衰竭患者的临床疗效显著,可有效改善患者的肝脏功能,复发率低,药物安全性高,值得临床推广。

肝细胞生长因子联合B型钠尿肽对慢性心力衰竭患者中长期死亡事件的预测价值

目的探索肝细胞生长因子(HGF)联合B型钠尿肽(BNP)对慢性心力衰竭(CHF)患者中长期死亡事件的预测价值。方法回顾性分析2015年8月至2017年9月就诊安徽医科大学第一附属医院心内科CHF患者131例,根据随访12、24、36个月不同时间节点全因死亡事件是否发生分为12个月生存组119例和12个月死亡组12例;24个月生存组96例和24个月死亡组35例;36个月生存组89例和36个月死亡组42例,采用ROC曲线评估各指标对12、24、36个月死亡危险因素的预测效能。结果12个月生存组BNP、HGF明显低于12个月死亡组(P<0.05)。24个月生存组年龄、BNP、HGF明显低于24个月死亡组(P<0.05,P<0.01)。36个月生存组BMI明显高于36个月死亡组,BNP、HGF明显低于36个月死亡组(P<0.01)。HGF、BNP是CHF患者随访12个月死亡的独立危险因素(P<0.05),二者联合预测12个月全因死亡的ROC曲线下面积(AUC)为0.786(95%CI:0.676~0.897)。年龄、HGF、BNP是CHF患者随访24个月死亡的独立危险因素(P<0.05,P<0.01),三者联合预测的AUC为0.754(95%CI:0.654~0.854);HGF、BNP、BMI是CHF患者随访36个月死亡的独立危险因素(P<0.05,P<0.01),三者联合预测的AUC为0.748(95%CI:0.704~0.871)。结论HGF、BNP是CHF随访12、24、36个月全因死亡事件的独立危险因素。HGF联合BNP对预测CHF患者中长期死亡事件的价值更高。

重组腺病毒介导的肝细胞生长因子基因体外转染骨髓间充质干细胞源性脂肪细胞

背景：肝细胞生长因子可促进血管内皮细胞增生及新生血管形成，已广泛应用于病理性瘢痕、心肌缺血等的实验性治疗。目的：鉴于重组腺病毒的宿主范围广，探讨重组腺病毒介导的人肝细胞生长因子对骨髓间充质干细胞源性脂肪细胞转染效率、目的蛋白表达及细胞活性的影响。设计、时间及地点；2006—08／2007-07在解放军兰州军区兰州总医院完成的细胞对比实验。材料：清洁级2月龄Wistar大鼠25只用于制备骨髓间充质干细胞。携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒毒株、重组腺病毒介导的人肝细胞生长因子由解放军兰州军区兰州总医院博士后科研工作站哈小琴博士惠赠。方法：向体外培养至第3代的骨髓间充质干细胞中加入含地塞米松、IBMX、牛胰岛素、吲哚美辛、胎牛血清的L-DMEM进行成脂诱导。以不同感染强度的携带绿色荧光蛋白基因重组腺病毒转染诱导后的脂肪细胞。重组腺病毒介导人肝细胞生长因子以最佳感染强度转染诱导后的脂肪细胞。主要观察指标：油红。染色检测成脂情况。流式细胞仪计数绿色荧光蛋白阳性表达，计算转染效率。ELISA法检测转染上清中肝细胞生长因子的表达，MTT法检测转染脂肪细胞的活性。结果：①骨髓间充质干细胞成脂诱导后胞质内富含橙红色的脂滴，成脂率（97-31±0．46）％。②以100pfu／cell携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒转染脂肪细胞72h后，绿色荧光蛋白表达量达高峰，此时转染效率为65．39％。③以100pfu／cell作为最佳感染强度转染脂肪细胞72h后，肝细胞生长因子的表达量为峰值。与未转染空白对照比较，转染后24，48，72，96，168h脂肪细胞活性均无明显变化（t=-0．024～0．092，P〉0．05）。结论：重组腺病毒可介导肝细胞生长因子基因转染骨髓间充质干细胞来源的脂肪细胞，有效表达目的蛋白，且转染该基因对脂肪细胞的活性无影响。

重组人源性肝细胞生长因子的纯化及其生物学活性的初步研究

目的获取高纯度的重组人源性肝细胞生长因子(rhHDSSF),并探讨rhHDSSF在体外的生物学活性。方法收获大量培养的表达细胞,以冻融法提取蛋白质;以IMAC pH递减非变性法纯化表达的rhHDSSF;以MTT法测定其对HepG2,T24,Fibroblast和Hela细胞的增殖效应。结果从细胞裂解物中纯化得到20 kD左右的单一蛋白条带,其纯度达89％。细胞增殖实验证实这一蛋白产物对HepG2,Hela细胞有显著的增殖作用,并表现出良好的量效和时效关系,而对T24,Fibroblast细胞则增殖效果不明显。结论 本研究证实,人源性肝细胞生长因子(HDSSF)转染细胞株中有20 kD左右HDSSF相应蛋白表达,与HDSSF、598 bp开放读码框理论值相一致,且纯度达89％,并发现其有良好的细胞增殖作用。rhHDSSF是一种非特异性促细胞增长物质,但它也有一定的选择性,这可能与不同细胞表达的细胞受体差异而导致蛋白信号传导不同有关。

基因重组鲎试剂检测促肝细胞生长素注射液中细菌内毒素含量适用性研究

目的 探讨基因重组鲎试剂用于测定促肝细胞生长素注射液中细菌内毒素含量的适用性。方法 分别使用基因重组鲎试剂和天然美洲鲎试剂建立细菌内毒素标准曲线,采用供试品干扰试验测定供试品溶液中外加内毒素的回收比,采用动态显色法测定供试品中细菌内毒素含量,并比较2种鲎试剂检测结果的差异。结果 2种鲎试剂细菌内毒素浓度在0.008~5 EU/mL范围内与反应时间线性关系较好(|r|≥0.998)。供试品在稀释2倍或20倍时对反应无干扰,细菌内毒素回收比均在50%~200%之间,26批供试品的细菌内毒素含量均小于限值(37.5 EU/mL)。2种鲎试剂细菌内毒素含量检测结果无显著差异(P> 0.05)。结论 该研究中建立了该制剂细胞内毒素的定量检测方法,准确性和灵敏度好,可用于该产品生产、流通环节细菌内毒素的质量控制。

重组人碱性成纤维细胞生长因子肽图分析方法的优化

随着重组人碱性成纤维细胞生长因子在临床应用越来越广泛,肽图分析是其质量控制的主要方法,探索并确定重组人碱性成纤维细胞生长因子的最佳酶解条件,建立酶解更完全、特异性更强的适用于重组人碱性成纤维细胞生长因子的HPLC肽图的分析方法尤为迫切。方法 采用蛋白酶裂解-反相高效液相色谱法,以2M UA溶液作为酶解缓冲液,加入酶解比例蛋白质:酶w/w =20:1的Trypsin,于37 ℃酶解16 h终止反应。通过梯度洗脱,采用超高效液相色谱质谱对各色谱峰进行目标肽段的分离和鉴定。结论 重组人碱性成纤维细胞生长因子基本完全酶解,酶解时间为16 h,缩短了8 h,酶解比例为蛋白质:酶w/w =20:1,酶量大大减少,节约实验成本,酶解的完全性与有效性大幅提高,产生的10个特征峰重复率高,特征肽段理论塔板数大于2000,特征肽段与相邻峰之间的分离度大于1.2,且色谱图基线平稳。

生长抑素及奥曲肽的肝细胞保护作用及其机制研究

目的:探讨生长抑素(SST)及其类似物奥曲肽(OCT)对大鼠肝细胞的保护作用及其机制。方法:以原代培养肝细胞建立无水乙醇/四氯化碳(CCl4)细胞损伤模型,观察SST及OCT预处理对培养上清液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)含量的影响。此外,将75只SD大鼠随机分为正常对照组、肝纤维化模型组及大、中、小剂量SST治疗组。除正常对照组外均以40%CCl4皮下注射8周,期间各SST治疗组分别给予SST200μg·kg-1·d-1、100μg·kg-1·d-1、50μg·kg-1·d-1。采用酶试剂法、末端核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷原位缺口末端标记法(TUNEL)分别检测肝功能及肝细胞凋亡指数。结果:经SST(10-8-10-6mol/L)及OCT(10-7-10-5mol/L)预处理后,损伤模型组肝细胞的培养上清液中ALT、AST水平显著下降。不同剂量SST治疗还能明显降低肝纤维化大鼠的血清ALT、AST、碱性磷酸酶(ALP)及总胆红素(TBIL)水平,提高血清清蛋白(ALB)水平,抑制肝细胞凋亡,其中小剂量SST治疗组最佳。结论:SST及OCT可减轻CCl4引起的肝细胞损伤,改善肝功能,并抑制肝细胞凋亡,可能在肝纤维化的防治中发挥重要作用。

奥曲肽联合阿司匹林增强对肝癌细胞生长的抑制作用

背景与目的:奥曲肽和阿司匹林均能抑制肝癌细胞生长,但两种非细胞毒性药物的抗肿瘤机制不同。从多环节发挥抗癌作用的角度考虑,联合治疗可使多种药物获得协同作用,产生最大的抑瘤效应,减少用药量,降低不良反应。本文旨在探讨奥曲肽联合阿司匹林对人肝癌细胞生长的作用。方法:采用3H-胸腺嘧啶核苷掺入法观察单独或联合应用奥曲肽和阿司匹林对体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721生长的影响,根据中效原理判断两者之间相互作用的关系。建立人肝癌裸鼠原位移植瘤模型,观察奥曲肽和阿司匹林单独或联合作用对体内肝癌生长的影响。结果:奥曲肽与阿司匹林在体外联合作用能显著抑制SMMC-7721生长,其合用浓度与3H-胸腺嘧啶核苷掺入量呈显著负相关,r=-0.9594,P<0.01。奥曲肽与阿司匹林的大多数效应范围尤其是高水平效应时合用指数小于1,具有明显的协同作用。奥曲肽联合阿司匹林能显著抑制人肝癌裸鼠原位移植瘤的生长,抑瘤率高达89.47%,较单用阿司匹林组(69.92%)明显升高,且联合组肿瘤内的纤维组织增生较对照组明显增多。在各组裸鼠的体内实验中未见明显不良反应。结论:奥曲肽联合阿司匹林不仅显著增加单用其中一种药物对人肝癌细胞株生长的抑制作用,也明显提高对裸鼠肝癌原位移植瘤的抑瘤率,提示两者联合应用对抑制肝癌?

补充活性肽对大强度离心运动后大鼠骨骼肌肝细胞生长因子表达的影响

目的观察补充活性肽对大鼠骨骼肌肝细胞生长因子表达的影响,研究活性肽促进运动性骨骼肌微损伤修复的机制。方法雄性SD大鼠40只随机分为补充安慰剂安静组、运动组和补充活性肽安静组、运动组,所有动物膳食平衡1 w后,进行实验。运动组大鼠以20±1 m/min的速度,坡度为-16°,持续性跑台训练120 min。实验组和对照组所有动物在膳食平衡期间每天分别进行灌胃15%活性肽饮料2 ml和等量的安慰剂。结果运动可刺激骨骼肌卫星细胞的激活和肝细胞生长因子的表达,而补充活性肽可能对肌卫星细胞的激活有正性作用,可显著增加大鼠离心运动后骨骼肌肝细胞生长因子的表达。

重组人生长激素对人肝癌细胞Bel-7402裸小鼠移植瘤生长的影响

背景与目的:在原发性肝癌患者围手术期应用重组人生长激素(recombinanthumangrowthhormone,rhGH),于改善患者状况同时是否会促进原有肿瘤生长、转移与复发,鲜见相关的研究报道。大多数原发性肝癌能表达生长激素受体(growthhormonereceptor,GHR),本研究拟探讨rhGH对表达GHR的人肝癌细胞Bel-7402裸小鼠移植瘤生长的影响。方法:放射配体分析法证实肝癌细胞Bel-7402表达GHR后行裸鼠肝内移植,将32只肝内移植人肝癌细胞Bel-7402的裸小鼠随机分为4组:1组为对照组,实验组则根据rhGH剂量不同分为3组[即0.5u·(kg·d)-1、1.0u·(kg·d)-1、2.0u·(kg·d)-1]。在肝脏肿瘤移植术后2周开始动物皮下注射rhGH2周,实验结束处死动物,检查肿瘤情况;用抗增殖细胞核抗原(proliferationcellnuclearantigen,PCNA)单克隆抗体免疫组化染色检测瘤组织PCNA表达情况。结果:移植瘤组织的重量与体积在rhGH1.0u·(kg·d)-1、2.0u·(kg·d)-1组与对照组之间比较有显著性差异(P<0.05),但0.5u·(kg·d)-1组与对照组无显著性差异(P>0.05)。各实验组肿瘤PCNA标记指数(labelingindex,LI)均高于对照组(P<0.05),各实验组之间相互比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。rhGH用药剂量与LI显著相关(r=0.779,P<0.001)。结论:rhGH能促进裸小鼠肝脏人肝癌细胞Bel-7402移植瘤的生长,其作用有随用药量增加而增强的趋势,两者之间存在一定相关性。

重组碱性成纤维细胞生长因子基因转染对于骨髓源性成骨细胞的生物学特性及对血管生成的影响

背景:碱性成纤维细胞生长因子对来源于中胚层和神经外胚层的细胞具有明显的促进增殖作用,对骨髓间充质干细胞具有间接的成骨作用。目的:观察碱性成纤维细胞生长因子基因转染对骨髓源性成骨细胞生物学特性和血管生成的影响,与骨髓间充质干细胞作对比。设计、时间及地点:对比分析基因转染效果实验,于 2007-11-27/2008-12-01 在南方医科大学珠江医院中心实验室和动物实验中心完成。材料:2 月龄新西兰大白兔用于骨髓间充质干细胞的分离培养及成骨细胞诱导。5 周龄 Wistar 大鼠用于移植实验。牛pcDNA3-bFGF 真核表达质粒由中山大学中山医学院免疫教研室徐霖博士惠赠。方法:分离兔骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞,采用脂质体介导将牛 pcDNA3-bFGF 真核表达质粒分别转染体外培养的兔骨髓间充质干细胞和诱导的骨髓源性成骨细胞,G418 筛选。稳定转染碱性成纤维细胞生长因子的骨髓源性成骨细胞与磷酸钙胶原材料复合培养,植于 Wistar 大鼠后腿肌袋内,正常饲养 2,4 周后取出植入的复合材料,观察血管新生情况。主要观察指标:碱性成纤维细胞生长因子转染前后骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞生物学特性参数的比较以及骨髓源性成骨细胞转染碱性成纤维细胞生长因子前后新生血管数目的比较。结果:利用 RT-PCR、免疫细胞化学染色分析转染细胞的碱性成纤维细胞生长因子表达情况。从形态、增殖特性和细胞周期、碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原等方面分析稳定表达碱性成纤维细胞生长因子的骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞生物学特性。重组牛 pcDNA3-bFGF 真核表达质粒成功转染目的细胞,经 G418 筛选稳定表达。转染的细胞有大量目的基因 mRNA 转录和目的蛋白表达。转染碱性成纤维细胞生长因子基因的骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞生长均加快,细胞周期中增殖期细胞比例明显增加,细胞形态无明显变化。转染与未转染的骨髓源性成骨细胞比较,碱性磷酸酶的分泌量无明显变化(P > 0.05),转染后骨髓间充质干细胞的碱性磷酸酶分泌量小于骨髓源性成骨细胞(P < 0.01)。骨髓源性成骨细胞转染与未转染碱性成纤维细胞生长因子基因组均有Ⅰ型胶原 mRNA 表达,但是,转染和未转染的骨髓间充质干细胞中均无Ⅰ型胶原基因mRNA 转录。转染有外源性碱性成纤维细胞生长因子基因的复合材料部分被增生纤维结缔组织包绕,内有新生血管生成,随着时间的延长而增多。结论:稳定表达碱性成纤维细胞生长因子的骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞增殖较快,但作为组织工程骨的种子细胞,骨髓源性成骨细胞较骨髓间充质干细胞更理想。外源碱性成纤维细胞生长因子基因转染后稳定表达,对新生血管的形成具有促进作用,可以作为组织工程化人工骨种子细胞转染的目的基因。

肝细胞生长因子基因重组腺病毒修饰间充质干细胞修复急性放射性损伤大鼠的创面

背景:基因药物与干细胞联合应用促进难治性大面积创面修复。目的:观察携带肝细胞生长因子基因的重组腺病毒(adenovirus hepatocyte growth factor,Ad-HGF)修饰的间充质干细胞对大鼠皮肤放射性损伤创面促愈合的作用。方法:体外分离、培养雄性Wistar大鼠骨髓间充质干细胞,转染Ad-HGF后备用。40只雌性Wistar大鼠用X射线局部照射制备急性放射性皮肤损伤模型。并将模型大鼠随机分为单纯间充质干细胞治疗组、单纯Ad-HGF治疗组、Ad-HGF修饰的间充质干细胞治疗组、溶剂对照组4组,制备模型即刻各组将相应细胞悬液、病毒悬液及溶剂行创面边缘多点注射。结果与结论:苏木精-伊红染色结果显示,伤后21d Ad-HGF修饰的间充质干细胞治疗组再生表皮明显薄于溶剂对照组,并可见丰富的新生小血管,且表皮较单纯间充质干细胞治疗组和单纯Ad-HGF治疗组更平整,新生小血管更丰富;免疫组织化学结果表明,Ad-HGF修饰的间充质干细胞治疗组创面中肝细胞生长因子表达均强于其他组;羟脯氨酸含量Ad-HGF修饰的间充质干细胞治疗组在7d后显著低于其他组(P<0.05);原位杂交结果显示,Ad-HGF修饰的间充质干细胞治疗组修复的皮肤组织中性别决定基因sry表达强于单纯间充质干细胞治疗组。结果提示,Ad-HGF修饰的间充质干细胞对皮肤放射性损伤创面有显著的促愈合修复作用,且优于二者单独应用。

人源性肝细胞生长因子稳定转染细胞株的建立(英文)

目的通过实验获得人源性肝细胞生长因子(hHDSSF)稳定转染细胞株,为重组产品的获得奠定基础。方法通过脂质体包裹重组质粒pcDNA3。1hisB-HDSSF转染Hela细胞,以G418筛选转染细胞;进而通过RT-PCR和NorthernBlot鉴定G418筛选后的单克隆抗性细胞株。结果重组质粒pcDNA3.1hisB-HDSSF转染Hela细胞后,第20天可见G418单克隆抗性细胞株的形成。G418抗性Hela细胞株RT-PCR扩增出600bp左右的目的条带;NorthernBlot获得了明显的阳性杂交影。结论我们的实验证实HDSSF表达重组体被成功转入Hela细胞,并稳定表达;从而获得了HDSSF稳定表达细胞株,为进一步研究HDSSF表达、蛋白纯化和测定其生物学活性奠定了基础。

HCVNS3蛋白对正常人源肝细胞生长及MAPK磷酸化的影响

目的:研究丙型肝炎病毒非结构区3(HCVNS3)蛋白对正常人源肝细胞的转化及MAPK磷酸化调节的作用.方法:利用脂质体介导转染技术和G418筛选得到稳定表达NS3蛋白的正常人源性肝细胞QSG7701,PCR和免疫组化S-P法检测细胞中NS3的表达;细胞记数和软琼脂实验鉴定其生物学性质;抗磷酸化MAPK抗体和抗MAPK抗体Westernblot检测转染细胞MAPK活性及表达.结果:HCVNS3转染的QSG7701肝细胞,其NS3蛋白过度表达于细胞质;真核表达质粒pRcHCNS3-5’转染细胞倍增时间为12h,较pRcHCNS3-3’、pRcCMV转染细胞和未转染的QSG7701明显缩短(分别24h,26h和28h).pRcHCNS3-5’、pRcHCNS3-3’和pRcCMV转染细胞及正常肝细胞在软琼脂中的克隆形成率分别为33%、1.33%、1.46%、1.11%,pRcHCNS3-5’形成的克隆明显高于其他三种细胞(P<0.01).pRcHCNS3-5’转染细胞MAPK磷酸化程度明显高于其他三种细胞(分别为8858±877,5612±656,2212±245和989±188).(P<0.01),而MAPK的表达量没有差异(P>0.05).结论:人源性正常肝细胞QSG7701是研究HCVNS3蛋白致病机制的较好的细胞系;HCVNS3蛋白N端多肽具有促进细胞增生和改变细胞表型的作用;HCVNS3蛋白N端多肽能上调MAPK活性,不影响MAPK的表达量.

水解氨基酸法测定注射用促肝细胞生长素中肽的含量

探讨注射用促肝细胞生长素中肽含量的测定方法并比较不同厂家产品的质量差异。采用盐酸水解多肽方法,利用AccQ-Tag氨基酸衍生技术,使用Kromasil 100-5 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)进行液相色谱分析,水解后游离氨基酸总量扣除水解前氨基酸总量即为肽含量。各氨基酸测定结果具有良好线性(r=0.999 1～0.999 9,n=6),游离氨基酸回收率为101.1%～104.6%,水解氨基酸平均回收率为101.8%～104.1%。本方法可作为注射用促肝细胞生长素中肽含量测定的方法补充和完善。

重组人成骨生长肽对化疗小鼠白细胞减少的影响

目的研究重组人成骨生长肽(rhOGP)对环磷酰胺(Cy)化疗损伤小鼠白细胞减少的影响;观察rhOGP对人肺腺癌Anip细胞和人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。方法用Cy腹腔注射每日100mg/kg,连续3d,造成小鼠的化疗损伤模型。拮抗实验中,分别给予低、高剂量的rhOGP,连续13d,采用皮下注射给药途径,于第0d、第4d(Cy造模后)、第9d、第14d检测外周血白细胞(WBC)数变化。预防实验中,分别给予rhOGP、DTT与生理盐水,连续10d,并于第8、9、10d同时给予Cy,分别于实验前、实验后记取外周血WBC数。利用MTT法和细胞生长曲线观察rhOGP对人肺腺癌Anip细胞和人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。结果rhOGP能促进Cy损伤小鼠WBC数的恢复,高、低剂量组间略有差异。rhOGP能明显降低Cy损伤小鼠外周血白细胞减少的幅度。rhOGP对人肺腺癌Anip细胞及人胃癌SGC-7901细胞的增殖无明显促进作用。结论rhOGP可促进Cy损伤小鼠外周血白细胞的恢复,rhOGP对Cy化疗小鼠白细胞数减少有预防作用,且对人肺腺癌Anip细胞和人胃癌SGC-7901细胞的增殖无促进作用,提示rhOGP作为肿瘤治疗辅助用药的潜在价值。

促肝细胞生长素联合谷胱甘肽治疗重度慢性乙型肝炎

目的研究促肝细胞生长素注射液联合谷胱甘肽治疗重度慢性乙型肝炎的疗效。方法重度慢性乙型肝炎58例分为两组,治疗组30例,用促肝细胞生长素注射液120μg,加入10%葡萄糖注射液500mL中静脉滴注,qd;谷胱甘肽1200mg,加入10%葡萄糖注射液500mL中静脉滴注,qd,疗程4周。对照组28例给予谷胱甘肽1200mg,加入10%葡萄糖注射液500mL中静脉滴注,qd,疗程同治疗组,两组均配合应用维生素C、甘草酸二铵和清蛋白。结果治疗组在降酶、退黄、降低门静脉高压和缓解症状方面疗效明显优于对照组,差异有显著性(P<0.05)。结论促肝细胞生长素注射液联合谷胱甘肽治疗重度慢性乙型肝炎有显著疗效。

重组人血小板源性生长因子对人视网膜血管内皮细胞生物学行为的促进作用及其机制

目的探讨重组人血小板源性生长因子-BB（rhPDGF-BB）对人视网膜血管内皮细胞（hRVECs）增生和迁移的影响及其作用机制。方法采用含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液培养hRVECs，分别将10、50和200 ng/ml rhPDGF-BB加入对数生长期hRVECs的培养液，未添加rhPDGF-BB者作为正常对照组。采用细胞计数试剂盒-8（CCK8）法检测各组细胞的增生情况；采用细胞划痕法检测细胞相对迁移面积（迁移后无细胞区面积/划痕初期无细胞区面积）；采用逆转录PCR法检测hRVECs中rhPDGF-BB受体（rhPDGF-BBR）mRNA的相对表达量；采用实时荧光定量PCR法检测hRVECs中VEGF mRNA和整合素mRNA相对表达量。结果培养的hRVECs生长良好，用rhPDGF-BBR引物能扩增出与引物设计长度相符的表达条带。正常对照组及10、50和200 ng/ml rhPDGF-BB组培养细胞后24 h细胞增生值（A）分别为1.01±0.05、1.09±0.04、1.10±0.02和1.13±0.05，10、50和200 ng/ml rhPDGF-BB组A值明显高于正常对照组，差异均有统计学意义（t＝2.504、3.430、3.483，均P〈0.05）；细胞划痕试验后24 h，正常对照组及10、50和200 ng/ml rhPDGF-BB组细胞相对迁移面积分别为0.42±0.10、0.38±0.09、0.55±0.06和0.61±0.05，划痕试验后48 h细胞相对迁移面积分别为0.75±0.06、0.81±0.02、0.87±0.02和0.98±0.02，总体比较差异均有统计学意义（F分组＝16.283，P＝0.000；F时间＝209.129，P＝0.000），随着rhPDGF-BB剂量增加和作用时间延长，细胞相对迁移面积均明显增加；实时荧光定量PCR法检测显示正常对照组及10、50和200 ng/ml rhPDGF-BB组hRVECs中整合素mRNA相对表达量分别为1.06±0.02、1.30±0.10、1.20±0.16和1.27±0.08，VEGF mRNA相对表达量分别为0.97±0.05、1.06±0.16、1.58±0.18和1.66±0.21，其中50 ng/ml和200 ng/ml rhPDGF-BB组细胞中整合素mRNA及VEGF mRNA相对表达量均明显高于正常对照组，差异均有统计学意义（整合素mRNA：t＝3.900、4.014，均P〈0.05；VEGF mRNA：t＝6.940、7.210，均P〈0.05）。结论rhPDGF-BBR促进hRVECs的增生和迁移，其作用呈剂量和时间依赖性，其可能与上调VEGF和整合素在细胞中的表达有关。

酸性肽对大鼠星形胶质细胞分泌神经生长因子和脑源性神经因子水平的影响(英文)

背景:神经生长因子和脑源性神经因子对神经细胞的存活和增殖非常重要。阿尔茨海默病患者的神经生长因子和脑源性神经因子水平均较低。目的:探讨酸性肽能否增加大鼠星形胶质细胞分泌神经生长因子和脑源性神经因子。设计:随机对照动物实验。单位:郑州大学医学院生物化学与分子生物学教研室。材料:实验于2003-09/2005-05在郑州大学生物活性肽研究所第一实验室和郑州大学基础医学院细胞培养中心完成。选取出生后2d内的SD乳鼠15只作为实验对象。方法:①将SD乳鼠在无菌条件下断头取出大脑皮质部分,进行星形胶质细胞的纯化培养,采用胶质纤维酸性蛋白免疫组化方法鉴定星形胶质细胞。②将培养的星形胶质细胞随机分为6组:空白对照组、血清对照组、阳性对照组、酸性肽37.5,75,150mg/L治疗组。空白对照组不施加任何实验因素,血清对照组加入体积分数为0.2的血清,阳性对照组加入1000U/mL干扰素,酸性肽治疗组则分别加入37.5,75,150mg/L的酸性肽。③将长满瓶底的第2代星形胶质细胞消化成单细胞悬液,以5×105mL等量接种于3块12孔培养板中。各组均于培养24,48,72h各时间点测定细胞存活率、细胞上清液中和细胞内神经生长因子及脑源性神经因子含量。主要观察指标:①不同培养时间各组细胞计数和存活率的检测结果。②酸性肽对大鼠星形胶质细胞增殖的影响。③不同培养时间各组星形胶质细胞上清液中神经生长因子及脑源性神经因子含量的变化。结果:①与空白对照组比较,酸性肽75,150mg/L治疗组细胞计数和细胞存活率在培养24,48,72h时均明显增加(P<0.05,0.01,0.001);酸性肽37.5mg/L治疗组虽有所增加但不明显。②与空白对照组比较,酸性肽37.5,75,150mg/L治疗组细胞增殖率均显著升高(0,17.5%,45.5%,72.5%,P<0.001)。③与空白对照组比较,酸性肽37.5,75,150mg/L治疗组细胞上清液中神经生长因子的吸光度值在培养24,48,72h时均明显增加(P<0.001);除了在培养24h时间点酸性肽37.5mg/L治疗组不能增加星形胶质细胞分泌脑源性神经因子外,其他各浓度酸性肽治疗组在培养24,48,72h时脑源性神经因子的吸光度值均显著提高(P<0.05,0.001)。结论:酸性肽能够不同程度地增加大鼠星形胶质细胞分泌神经生长因子和脑源性神经因子。