重组牛碱性成纤维细胞生长因子联合牙周基础治疗牙龈炎对减少患者龈沟出血与复发的效果

目的观察重组牛碱性成纤维细胞生长因子联合牙周基础治疗牙龈炎对减少患者龈沟出血与复发的效果。方法选取2021年1月—2022年1月于松滋市人民医院诊治的牙龈炎患者98例,采用随机数字表法分为观察组和对照组,每组49例。对照组给予常规牙周基础治疗,观察组在对照组治疗基础上给予重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗,2组均治疗2周。比较2组治疗效果,治疗前后牙周指标[牙周探诊深度(PD)、牙龈指数(GI)与菌斑指数(PLI)]、龈沟出血指数(SBI)、龈沟液炎性指标[C反应蛋白(CRP)、前列腺素E 2(FGE 2)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)],牙龈炎复发率。结果治疗后4周,观察组总有效率为93.88%,高于对照组的75.51%(χ^(2)=6.376,P=0.012)。2组PD、GI及PLI低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.01)。治疗后7 d、14 d,2组SBI低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.01)。治疗后4周,2组龈沟液CRP、FGE 2、IL-6及IL-1β水平低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.01)。随访3个月,观察组牙龈炎复发率为2.04%(1/49),低于对照组的22.45%(11/49)(χ^(2)=9.496,P=0.002)。结论重组牛碱性成纤维细胞生长因子联合牙周基础治疗对牙龈炎患者龈沟出血具有显著改善效果,并能改善患者牙周健康,减轻牙龈炎症,减少牙龈炎复发。

活性氧响应的纳米颗粒对炎性环境下牙龈成纤维细胞功能的影响及机制

目的 探讨在牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis-lipopolysaccharide,P.g-LPS)诱导的牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)炎症环境下,活性氧(reactive oxygen species,ROS)响应型纳米颗粒PssL-NAC对HGFs内ROS、炎症因子、胶原蛋白生成、细胞迁移功能以及Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)-核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路蛋白表达的影响。方法 本研究已通过单位伦理委员会审查批准。通过响应ROS的硫缩酮键(thioketal,TK)连接聚己内酯(polycaprolactone,PCL)的疏水端和聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)的亲水端,水相油相自主装的方式得到内部包裹油溶性的抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine-NAC)的PssL-NAC微球,制备NAC水溶液,并使用透射电镜观察验证纳米粒子合成成功。在提取的HGFs中分别加入P.g-LPS(0、5、10μg/mL),P.g-LPS(0、5、10μg/mL)+NAC,P.g-LPS(0、5、10μg/mL)+PssL-NAC,共聚焦显微镜观察不同组别细胞内ROS水平,确定后续实验使用的P.g-LPS浓度。将HGFs随机分为空白对照组(对照组,不做处理),P.g-LPS组(P.g-LPS处理细胞),NAC组(P.g-LPS+NAC处理细胞),PssL-NAC组(P.g-LPS+PssL-NAC处理细胞)。通过细胞增殖与毒性实验验证PssL-NAC的生物安全性。使用2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐探针与细胞共孵育通过荧光实时定量检测细胞内炎症因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和Ⅰ型胶原蛋白(collagen 1,COL1)、Ⅲ型胶原蛋白(collagen 3,COL3)的基因水平;通过划痕实验观察PssL-NAC对牙龈成纤维细胞的迁移功能的影响;通过免疫印迹法检测TLR4-NFκB信号通路相关蛋白的表达。结果 PssL-NAC具有良好生物相容性,对HGFs的细胞增殖能力无显著影响(P>0.05);在P.g-LPS浓度升高的条件下,PssL-NAC能维持细胞内大约两倍对照组的ROS水平(P<0.001);PssL-NAC能显著降低P.g-LPS诱导升高的IL-6(P<0.001)、TNF-α基因水平(P<0.001),上调COL1基因水平(P<0.001);P.g-LPS刺激后,PssL-NAC能将细胞迁移能力恢复至对照组水平(P>0.05),并降低TLR4-NF-κB通路中TLR4(P<0.001)、p65(P=0.006)、p-p65(P=0.017)蛋白的表达。结论PssL-NAC维持细胞内适宜浓度ROS,通过TLR4-NF-κB通路减轻P.g-LPS诱导的细胞炎症,并恢复炎症条件下的细胞胶原生成和细胞迁移功能。

车前草苷通过抑制NF-κB/IL-6信号通路减弱LPS诱导的人牙龈成纤维细胞的炎症反应

目的:探究车前草苷(PMS)通过抑制核因子-κB(NF-κB)/白细胞介素-6(IL-6)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞的炎症反应的影响。方法:将培养的人牙龈成纤维细胞(HGnF)随机分为:对照组、模型组(10mg/L LPS)、PMS低、高剂量组(50、100μg/mL PMS+10mg/L LPS)、激活剂组(10μM BAY11-7085+10mg/L LPS)、PMS高剂量+激活剂组(10μM BAY11-7085+100μg/mL+10mg/L LPS)。CCK-8法检测HGnF细胞活力,ELISA法检测HGnF细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素18(IL-18)含量,Western blot法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、IL-1β及NF-κB/IL-6信号通道相关蛋白表达水平。结果:低、高剂量PMS可升高LPS诱导的HGnF细胞活力,降低上清液IL-1β、IL-6、IL-18含量、细胞IL-1β、iNOS及p-NF-κB/NF-κB、IL-6表达水平(P<0.05);激活剂BAY11-7085逆转了高剂量PMS对LPS诱导的HGnF细胞的上述指标的作用(P<0.05)。结论:PMS可能通过抑制NF-κB/IL-6信号通路改善由LPS诱导HGnF细胞的炎症。

TDP-43对LPS刺激下小鼠牙龈成纤维细胞影响的实验研究

目的:探究TARDNA结合蛋白-43(TARDNA binding protein-43,TDP-43)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的炎症微环境中小鼠牙龈成纤维细胞(mouse gingival fibroblasts cells,MGFs)的影响。方法:分离培养野生型C57BL/6J小鼠的牙龈成纤维细胞。设置不同浓度及处理时间的LPS刺激,通过实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)技术检测相关炎症因子的mRNA表达量,筛选出最佳处理条件。对细胞进行免疫荧光染色,观察炎症微环境下MGFs中TDP-43的变化。使用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染技术敲低MGFs中的TDP-43,并测定转染效率。设置3个实验组:阴性对照组(NC组)、LPS诱导对照组(NL组)和TDP-43敲低+LPS诱导组(SL组)。利用RT-qPCR技术检测部分炎症因子、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)、黏附相关因子mRNA的表达情况。应用蛋白质印迹法(western blotting)检测部分炎症因子、黏附相关因子蛋白表达情况。使用天狼星红染色法探究细胞内胶原沉积情况。结果:最佳LPS刺激的浓度为100 ng/mL,时间为6 h;在无LPS刺激的状态下,MGFs中的TDP-43基本在细胞核内,LPS刺激后,TDP-43出现在细胞核和细胞质中;成功使用siRNA转染MGFs构建敲低TDP-43的细胞模型,转染效率接近50%;在LPS刺激下,TDP-43敲低的实验组(SL组)与对照实验组(NL组)相比,炎症因子、基质金属蛋白酶、黏附相关因子mRNA的表达量出现下调(P<0.05),且部分黏附相关蛋白及炎症因子蛋白的表达量也显著下调;在胶原沉积方面,SL组和NL组相较于NC组都有减少(P<0.05),但NL组和SL组差异不大,无统计学意义(P>0.05)。结论:当LPS诱导MGFs处于炎症微环境时,TDP-43出现由核内向核外移动的趋势;且TDP-43对LPS诱导的MGFs炎症微环境下炎症因子、黏附相关因子及基质金属蛋白酶表达起正向调控作用,对胶原沉积的影响不明显。

电化学脱合金Ti6Al4V基台对人牙龈成纤维细胞的影响

目的探讨电化学脱合金Ti6Al4V基台对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)的影响,为种植基台表面改性设计提供实验依据。方法根据试样不同表面进行分组:NC组(阴性对照,光滑表面无其他处理)、NM-1组(纳米网-1,1 mol/L NaOH电化学脱合金处理1 h,电压2 V)、NM-2组(纳米网-2,5 mol/L NaOH电化学脱合金处理1 h,电压2 V)。扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)观察不同试样表面形貌及HGFs在其表面的黏附状态,接触角测量仪测定试样表面亲水性。CCK-8评估HGFs在不同试样表面的增殖情况;qRT-PCR检测HGFs在不同试样表面Ⅰ型胶原(collagenⅠ,COL1A1)、Ⅲ型胶原(collagenⅢ,COL3A1)、纤连蛋白1(fibronectin 1,FN1)、黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、黏着斑蛋白(vinculin,VCL)、整合素α2(integrinα2,ITGA2)、整合素β1(integrinβ1,ITGB1)等黏附相关基因表达水平;免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)观察HGFs在不同试样表面vinculin蛋白表达情况;天狼猩红染色评价HGFs在不同试样表面胶原纤维分泌合成情况。结果SEM观察到NM-1组和NM-2组表面形成有序均一的三维网状结构,网格直径NM-1组约为30 nm,NM-2组约为150 nm;NM-1组和NM-2组对比NC组,水接触角显著下降(P<0.0001);NM-1组细胞增殖能力较NC组显著提高(P<0.01),NM-1组和NM-2组的水接触角及细胞增殖能力差异无统计学意义(P>0.05)。SEM镜下可见HGFs黏附24 h后在各组试样表面均黏附良好,NM-1组和NM-2组细胞与NC组对比伸展面积更大,形态纤长,细胞伪足更发达。qRTPCR结果显示NM-1组中COL1A1、COL3A1、FN1、FAK、VCL等黏附相关基因表达水平显著高于NC组和NM-2组(P<0.01)。vinculin蛋白免疫荧光结果表明,NM-1组vinculin蛋白表达水平最高,单个细胞黏着斑数量最多(P<0.01)。天狼猩红染色结果显示NM-1组胶原纤维分泌合成量最高(P<0.0001)。结论Ti6Al4V经电化学脱合金改性后所构建的三维纳米网状结构有促进HGFs黏附增殖和胶原分泌合成的作用,其中网格直径约为30 nm的NM-1组对HGFs的促进作用明显。

灯盏花素对牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞损伤的影响

目的探讨灯盏花素(breviscapine,BVP)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(porphyromonas gingivalis,Pg-LPS,简称LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblasts,HGFs)损伤的影响。方法体外培养HGFs细胞,分为对照组、LPS组、LPS+BVP低、中、高剂量组。CCK-8法检测细胞增殖;ELISA法检测细胞上清液中IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、IL-6水平及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;蛋白质印迹法检测细胞中细胞周期素D1(Cyclin D1)、细胞周期素B1(Cyclin B1)及凋亡相关B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、BCL-2相关X蛋白(BCL-2-associated X protein,Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达水平;TBA比色法检测细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;二氢荧光素二乙酸酯(dichloro-dihydro-fluorescein diacetate,DCFH-DA)法测定细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果与对照组比较,LPS组HGFs细胞存活率、细胞迁移率、Cyclin B1、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平及SOD活性显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达水平、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平及MDA、ROS水平显著升高(P<0.05);与LPS组比较,LPS+BVP低、中、高剂量组细胞存活率、细胞迁移率、Cyclin B1、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达水平及SOD活性显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、Caspase-3蛋白表达、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平及MDA、ROS水平显著降低(P<0.05)。结论BVP可通过抗炎、抗氧化作用减轻LPS诱导的HGFs细胞损伤。

A型肉毒杆菌毒素抑制大鼠牙龈肌成纤维细胞作用的体外研究

研究A型肉毒杆菌毒素(BTXA)对大鼠牙龈肌成纤维细胞的抑制作用,探究控制扭转牙正畸术后复发可能的方法。方法 体外分离、培养大鼠牙龈成纤维细胞,观察TGF-β1+BTXA诱导干预下,牙龈成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的情况,同时分别设置阴性对照组,牙龈FB组;阳性对照组,TGF-β1诱导牙龈肌成纤维细胞组进行对照。TGF-β1和TGF-β1+BTXA两组分别诱导72小时后收样,然后检测Western-blot、RT-PCR、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的免疫组化等相关指标。结果 经过原代培养干预之后但是没有经过诱导处理的大鼠模型其牙龈成纤维细胞α-SMA表达为阴性,提示没有显著的成纤维细胞表达出现。使用TGF-βl进行诱导处理之后,α-SMA表达为阳性,且水平较高,提示成功诱导,同时也表明成纤维细胞会转化为肌成纤维细胞。而后又再次使用BTXA进行干预,α-SMA表达为阳性,但是与TGF-βl诱导组相比的表达量显著更低,提示BTXA干预能够对成纤维细胞会转化为肌成纤维细胞这一过程产生抑制作用。结论 BTXA对能够抑制牙龈当中的肌成纤维细胞功能蛋白α-SMA,减少其功能表达。提示可以采用BTXA抑制肌成纤维细胞的出现和持续表达,从而减少局部牙龈组织的张力,降低扭转牙复发的可能性,但是具体抑制机制还需进一步深入研究。

不同来源成纤维细胞对角质形成细胞再上皮化影响

目的比较人牙龈及皮肤来源成纤维细胞条件培养基对永生化角质形成细胞再上皮化作用的差异,分析成纤维细胞促进再上皮化作用的关键因子,探究牙龈来源成纤维细胞在创伤修复中的可能应用。方法分别制备人牙龈成纤维细胞(hGFs)和人真皮成纤维细胞(hDFs)条件培养基(CM),添加到人永生化角质形成细胞(Human keratinocyte cells,HaCaT)中,采用CCK-8、EdU染色检测HaCaT细胞增殖能力;细胞划痕实验、Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移能力;通过ABplex多因子检测及酶联免疫吸附法(ELISA)对hGFs、hDFs分泌的多种与创伤修复相关的生长因子、细胞因子和趋化因子进行定量分析。结果CCK-8、EdU染色、细胞划痕实验、Transwell细胞迁移实验结果表明:2种条件培养基均能显著提高HaCaT细胞的增殖及迁移能力(P<0.05),hGFs-CM对HaCaT细胞增殖和迁移能力的促进作用显著强于hDFs-CM(P<0.01);hGFs和hDFs分泌的因子有较大的差异,其中hGFs分泌的生长因子如肝细胞生长因子(HGF)、血管内皮生长因子(VEGF)明显多于hDFs。结论人牙龈来源成纤维细胞较人皮肤来源成纤维细胞的条件培养基对角质形成细胞的增殖和迁移能力的有更强的促进作用,可能与其旁分泌产生的因子不同有关。

人牙龈成纤维细胞和牙周膜成纤维细胞的培养和生物学特征

目的 :探讨采用不同方法建立体外培养人牙龈成纤维细胞和人牙周膜成纤维细胞并对其生物学特性作初步探讨。方法 :分别采用消化培养法和组织块培养法培养人的牙龈和牙周膜成纤维细胞。通过倒置显微镜活体观察 ,以及光镜、透射电镜、免疫组化和生长曲线等方法对其生物学特性作初步观察。结果 :消化培养法成功率低于组织块培养法。光镜下和透射电镜下观察两种细胞在形态和结构上相似。免疫组化染色证实此两种细胞均来源于中胚层的纤维母细胞。生长曲线表明牙龈成纤维细胞的倍增时间比牙周膜成纤维细胞稍短 ,而牙周膜成纤维细胞的增殖活性比牙龈成纤维细胞高。结论 :组织块培养法适用于此二种细胞的培养。细胞生物学特征方面有许多相似形 。

牙龈卟啉单胞菌脂多糖对人牙周膜成纤维细胞胶原吞噬作用的影响

目的研究牙周病致病菌牙龈卟啉单胞菌脂多糖(LPS)对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(hPDLF)胶原吞噬作用的影响。方法将不同质量浓度的LPS加入体外培养的hPDLF48h后,采用荧光定位术和流式细胞技术检测hPDLF胶原吞噬率的变化。结果LPS导致hPDLF胶原吞噬率显著增加(P<0.05)。结论牙龈卟啉单胞菌脂多糖具有促进hPDLF吞噬胶原的作用,可能是牙周组织破坏机制之一。

新型牙髓治疗材料iRoot BP Plus对人牙龈成纤维细胞的细胞毒性

目的：比较新型牙髓治疗材料i Root BP Plus与矿物三氧化物凝聚体（mineral trioxide aggregate,MTA）对人牙龈成纤维细胞的细胞毒性。方法：采用四甲基偶氮唑盐（methyl-thiazol-tetrazolium,MTT）法测定上述2种材料不同浸提时间（1、3、7 d）的浸提液原液及不同浓度稀（1：2、1：5）释液对体外培养的人牙龈成纤维细胞增殖的影响。细胞增殖率以x±s表示,采用SPSS20.0软件包对数据进行析因设计的方差分析。结果：i Root BP Plus和MTA的浸提液原液及不同浓度稀释液作用后的细胞增殖率界于77.31%~113.82%,细胞毒性分级为0或1级,评价结果为无细胞毒性。不同时间点、不同稀释度下,2种材料对体外培养的人牙龈成纤维细胞增殖率的影响无显著差异（F浓度＊时间＊材料=1.393,P=0.256）。结论 ：i Root BP Plus与MTA均对体外培养的人牙龈成纤维细胞无细胞毒性。

Beagle犬牙龈成纤维细胞的体外分离培养

背景:Beagle犬性情温和、遗传背景明确,且牙周结构与人类相似,是研究牙周疾病的常见大型动物模型。目的:体外分离、培养、纯化Beagle犬牙龈成纤维细胞。设计、时间及地点:观察对比实验,于2006-09/2007-02在福建医科大学附属口腔医院中心实验室和解放军南京军区福州总院比较医学科完成。材料:Beagle犬5只,12月龄,体质量10～13kg,雄性。方法:基础麻醉下,切取Beagle犬游离龈。使用半消化+改良组织块法分离、培养、纯化Beagle犬牙龈成纤维细胞;手术及组织学观察确定组织块来源。以经成骨诱导的骨髓基质干细胞作为阳性对照组,试剂盒内标准品作为标准组,蒸馏水作为空白组。主要观察指标:免疫细胞化学及碱性磷酸酶检测明确细胞来源;四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖状况。结果:未经胰酶处理的组织块边缘锐利,组织致密;上皮细胞迅速增殖,呈鹅卵石样占满组织块周边。经胰酶处理过的组织块疏松,其周围上皮细胞少,成纤维样细胞游出迅速。波形丝蛋白染色阳性,角蛋白染色阴性。结果证实所取组织块为Beagle犬游离龈;免疫细胞化学证实细胞源于中胚层。此成纤维样细胞基本不表达碱性磷酸酶,细胞增殖状况良好。结论:使用半消化+改良组织块法能够分离、纯化Beagle犬牙龈成纤维细胞。

种植体穿龈部分氮化钛纳米涂层对牙龈成纤维细胞粘附和增殖的影响

目的:明确氮化钛纳米(TiN)涂层对人牙龈成纤维细胞(HGF)粘附形态和增殖的影响,作为选择合适的种植体穿龈部分涂层的依据之一。方法:利用磁控溅射技术制作氮化钛(TiN)和对照Ti涂层,测量各组材料表面形貌、元素含量、粗糙度和亲水性,原代培养人牙龈成纤维细胞(HGF),通过扫描电镜SEM和CCK-8观察分析不同纳米涂层上方细胞粘附和增殖差异。结果:TiN组表面HGF粘附形态与Ti组相似,而HGF增殖幅度大于对照Ti。结论:本实验所设计的氮化钛(TiN)涂层利于促进HGF增殖,推荐作为种植体穿龈部分涂层。

钙拮抗剂对牙龈成纤维细胞作用的体外实验研究

目的 :探讨钙拮抗剂硝苯地平对牙龈成纤维细胞的作用。方法 :体外培养牙龈成纤维细胞 ,细胞在不同浓度硝苯地平作用下计数观察。结果 :细胞计数在实验第 6、7天出现组间非常显著性差异。主要表现为硝苯地平 12 0 0 μg/L和 36 0 μg/L组 ,细胞计数明显高于低剂量组。 结论

蜂胶对牙龈卟啉单胞菌及牙龈成纤维细胞的影响

目的了解蜂胶对牙龈卟啉单胞菌（porphyromonas gingival，Pg）生长的抑制作用及对人牙龈成纤维细胞的毒性作用。方法采用液体稀释法测定蜂胶对Pg的最小杀菌浓度（MBC），用MTT法测定不同浓度蜂胶作用24h后牙龈成纤维细胞的细胞相对增殖率（RGR），了解蜂胶作用24h后细胞连续7d的增殖回复情况。结果蜂胶对取的MBC为1．56g／L，相当于0．125～0．25mg／L的奥硝唑。蜂胶浓度为MBC时RGR达到70％以上；4g／L蜂胶组的RGR为52．1％，作用细胞24h后，连续7d细胞数持续增加，吸光度逐渐接近阴性对照组。结论蜂胶对Pg的生长有显著抑制作用，且细胞毒性较小，毒性作用可逆。

体外诱导人牙龈成纤维细胞多向分化潜能的实验研究

目的探索人牙龈成纤维细胞(h GFs)是否具有多向分化潜能,为组织工程学提供新的细胞来源。方法经志愿者知情同意后收集健康牙龈组织,组织块法培养h GFs。取第3代h GFs进行成骨、成软骨和成脂诱导,未分化诱导的细胞为对照组。分别用碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色、阿利新蓝染色、油红O染色检测细胞成骨、成软骨和成脂能力。实时定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞中成骨分化标志基因ALP、runt相关转录因子2(Runx2)、成软骨分化标志基因聚集蛋白聚糖(AGR)和成脂分化标志基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)的表达。结果成骨诱导组培养至7 d时ALP染色可见大量的蓝紫色沉淀,28 d时细胞周围有大量红染的钙结节沉积,而对照组无钙结节,培养至14 d细胞中ALP和Runx2表达明显高于对照组(P<0.01)。14 d时成软骨诱导组阿利新蓝阳性,成脂诱导组可见红色的脂肪滴,而对照组2种染色为阴性,AGR、PPARγ2表达均明显高于对照组(P<0.01)。结论 h GFs具有成骨、成软骨和成脂分化的多向分化潜能。

尼古丁和烟草浸提液对人牙龈成纤维细胞生长和贴附能力的影响

目的 :体外观察尼古丁和烟草浸提液 (ST)对人牙龈成纤维细胞的生长和贴附影响。方法 :用不同浓度的尼古丁和ST作用于人牙龈成纤维细胞 ,用MTT法检测细胞的生长和贴附情况。结果 :随尼古丁和ST浓度的增加 ,细胞的生长率逐渐下降 ,尼古丁和ST对细胞生长半抑制浓度 (IC50 )分别为 0 .0 95 g/L和 11.88g/L ;与对照组相比 ,当尼古丁及ST浓度分别大于 0 .0 1g/L和 6 .2 g/L时差异有显著意义。而对细胞贴附的影响表明 ,随着尼古丁和ST浓度的增加 ,细胞的贴附率逐渐下降 ,尼古丁和ST对细胞贴附的IC50 分别是 0 .6 g/L和 10 .33g/L ;与对照组相比 ,当尼古丁及ST浓度分别大于 0 .1g/L和 12 .4 g/L时差异有显著意义。结论 :尼古丁和浸提取液均可抑制人牙龈成纤维细胞的生长和贴附 。

中药骨碎补对人牙髓、牙龈、牙周膜成纤维细胞体外增殖的实验研究

目的：探讨中药骨碎补对体外培养的人的牙髓、牙龈、牙周膜成纤维细胞增殖的影响。方法采用组织块法外培养人牙髓、牙龈、牙周膜成纤维细胞，取第4、5代培养细胞随机分为实验组和对照组，实验组加不同浓度的骨碎补，对照组只加培养液。通过HE染色观察其对牙髓、牙龈、牙周膜成纤维细胞的形态、结构及生长增殖的影响，通过MTT法和考马斯亮蓝法对实验组和对照组的细胞生长情况和总蛋白合成的检测。结果①在10-1000μg/ml浓度范围内骨碎补对人牙髓、牙龈、牙周膜成纤维细胞均有促增殖作用（ P ＜0.05），尤以100μg/ml浓度最为明显（ P ＜0.01）；②总蛋白测定结果显示在骨碎补浓度为10μg/ml时，对照组与其总蛋白含量差异无统计学意义（ P ＞0.05），实验组细胞总蛋白含量随骨碎补浓度增加高于对照组（ P ＜0.05），尤以500μg/ml骨碎补浓度组作用牙髓成纤维细胞最佳；而100μg/ml骨碎补浓度组作用牙龈、牙周膜成纤维细胞最显著。结论骨碎补在有效作用浓度范围内，其促增殖效应和总蛋白含量与骨碎补浓度呈剂量依赖关系，随着浓度的增加促增殖作用增强、总蛋白含量增加，浓度达到最大作用后，随着浓度增加作用反而呈现减弱趋势。

人牙龈成纤维细胞体外诱导成骨分化的实验研究

目的牙周组织工程是修复因牙周炎导致的牙周组织缺损的研究热点。牙龈成纤维细胞(gingival fibroblasts,GFs)作为一种新的牙周组织工程的种子细胞,越来越多地受到人们的关注。研究通过GFs体外培养,诱导其向成骨细胞方向分化,探究其成骨分化能力。方法提取人GFs,传代培养后进行成骨诱导培养,并检测碱性磷酸酶及钙结节。结果与对照组比较,实验组人GFs经诱导后碱性磷酸酶增强,并产生较多的钙结节。结论人GFs经过体外培养及成骨诱导后,在牙周组织再生修复中有一定的应用价值。

人牙龈成纤维细胞系的建立及其生物学特性

目的：建立人牙龈成纤维细胞系并观察其生物学特性。方法：用组织块法培养细胞，用形态学、免疫组化染色、染色体分析等方法鉴定细胞，通过活细胞观察、生长曲线测定及ＭＴＴ比色实验研究细胞体外生长特性。结果：２０例原代培养，成活率９０％。培养细胞呈梭形，胞浆波形丝蛋白阳性，能合成Ⅰ型和Ⅲ型胶原及纤维粘连蛋白，具有正常二倍体核型，体外贴壁快，生长迅速，细胞寿命为（２５０．７±１１３．３）ｄ。结论：本实验建立的细胞系符合人牙龈正常二倍体成纤维细胞系。