人生长分化因子-15对不同原因急性呼吸困难患者的诊断价值

目的探索血浆生长分化因子(GDF)-15浓度在不同原因急性呼吸困难的变化情况、评价GDF-15水平对呼吸困难病因鉴别诊断的意义。方法选择因急性呼吸困难就诊的急诊患者120例,依据引起呼吸困难病因分为单纯肺部疾病组、肺源性心脏病组、左心功能不全组、其他原因呼吸困难组,选取同期健康体检者120例作为正常对照组。检测所有参与研究对象的GDF-15、左室舒张末径(LVEDD)、舒张末室间隔(IVS)、左室后壁(LVPW)、左房前后径(LAD)、左室射血分数(LVEF)、舒张期E峰与A峰比值(E/A值),分组比较并评价各参数对于急性呼吸困难病因鉴别诊断的价值。结果急性呼吸困难组患者与正常对照组在LVEDD、LAD、LVEF、LVPW、IVS和E/A比值等方面比较差异均有统计学意义(P<0.05),在年龄及性别组成方面差异无统计学意义(P>0.05);急性呼吸困难患者平均GDF-15水平显著高于正常对照组(P<0.05);不同原因急性呼吸困难患者GDF-15平均水平也均显著高于正常对照组(P<0.05);左心功能不全组患者GDP-15平均水平显著高于其余3组(P<0.05);其他原因呼吸困难组患者GDP-15平均水平显著高于单纯肺部疾病组和肺源性心脏病组患者(P<0.05);单纯肺部疾病组和肺源性心脏病组患者GDP-15平均水平比较差异无统计学意义(P>0.05);左心功能不全组患者GDF-15的ROC曲线下面积最大,为0.876。结论单纯肺部疾病、肺源性心脏病以及左心功能不全等原因造成急性呼吸困难的患者在临床诊断和治疗中,GDF-15可作为鉴别呼吸困难病因的特异性指标。

人生长分化因子15的原核表达、纯化与多克隆抗体制备

目的:原核表达并纯化、鉴定人生长分化因子15(GDF-15),制备其多克隆抗体。方法:从人结肠癌细胞系HT29的cDNA扩增出GDF-15基因片段并插入pET-32a(+)原核表达载体,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达重组GDF-15,用镍亲和柱纯化,SDS-PAGE、Western印迹鉴定重组蛋白。用纯化的重组GDF-15免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,鉴定并检测其效价。结果:制备了pET-32a(+)-GDF-15表达载体;经IPTG诱导重组蛋白表达后,采用Ni亲和柱纯化蛋白,并经SDS-PAGE和免疫印迹鉴定;免疫BALB/c小鼠后获得了GDF-15多克隆抗体,ELISA检测抗体效价为1∶100000,并应用于肿瘤细胞的GDF-15检测中。结论:用基因工程和免疫学方法制备了重组人GDF-15及其多克隆抗体,为后续的分子机制和靶向治疗研究奠定了基础。

人生长分化因子3、前列腺特异性抗原与黏蛋白1联合检测在乳腺癌诊断中的临床意义

目的探讨人生长分化因子3（growth differentiation factor 3,GDF3）、前列腺特异性抗原（prostate specific antigen,PSA）与黏蛋白1（mucin 1,MUC1）联合检测在乳腺癌诊断中的临床意义。方法选取2013年8月~2014年12月于绿城心血管病医院已确诊为乳腺癌的患者50例作为乳腺癌组;同期选取住院的乳腺良性疾病患者50例作为乳腺良性疾病组;同期选取体检中心体检的健康女性50例作为正常组。检测各组血清GDF3、PSA、MUC1和肿瘤标志物糖类抗原（carbohydrate antigen,CA）15-3、CA125、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen,CEA）的表达水平,对比分析其敏感度、特异度和准确度。结果乳腺癌组血清GDF3、PSA、MUC1水平均高于良性乳腺疾病组和正常组（P〈0.05）,CA15-3、CA125、CEA水平均高于良性乳腺疾病组和正常组（P〈0.05）;PSA＋MUC1两两检测的敏感度、特异度、准确度均高于其他2组（P〈0.05）;血清GDF3、PSA、MUC1三者联合的敏感度、特异度、准确度高于单项检测以及两两检测（P〈0.05）。结论 GDF3联合检测PSA和MUC1对乳腺癌的早期诊断更有确诊意义。

肺源性心脏病病人心功能与B型钠尿肽、肌钙蛋白T及人生长分化因子-15的相关性分析

目的分析肺源性心脏病病人心功能与B型钠尿肽(BNP)、肌钙蛋白T(cTnT)及人生长分化因子-15(GDF-15)的相关性。方法选取2017年1月—2019年1月我院收治的100例肺源性心脏病病人作为观察组,同期100名体检健康者作为对照组。检测BNP、cTnT及GDF-15水平,参照美国纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级标准评估病人的心功能。结果观察组BNP、cTnT及GDF-15水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);不同心功能分级组病人血中BNP、cTnT及GDF-15水平差异有统计学意义(P<0.05),其中心功能Ⅲ级病人血中BNP、cTnT及GDF-15水平最高,Ⅰ级最低;肺源性心脏病病人心功能与血中BNP、cTnT及GDF-15水平呈负相关(P<0.05)。结论随着肺源性心脏病病人心功能恶化,血中BNP、cTnT、GDF-15水平升高,心功能与BNP、cTnT、GDF-15呈负相关。

人生长分化因子5重组质粒转染大鼠骨髓间充质干细胞体外成软骨观察

目的观察人生长分化因子5(h GDF5)重组质粒转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外成软骨的能力,为其用于体内修复软骨损伤提供理论基础。方法在特殊诱导液中体外单层培养h GDF5重组基因质粒转染的BMSCs,离心成细胞球观察。于14、28 d取组织块进行HE及甲苯胺蓝染色。于28 d取组织块进行软骨胶原免疫组化及免疫荧光染色。未转染h GDF5的BMSCs作对照亦同样处理和观察。结果 h GDF5重组质粒转染BMSCs体外培养可形成具有类似透明软骨组织学和生物化学性质的组织块,转染细胞合成分泌Ⅱ型胶原和蛋白聚糖(PG)。结论 h GDF5重组质粒转染BMSCs在体外可形成软骨组织,有望用于关节软骨损伤的基因治疗。

人生长分化因子11基因原核表达质粒的构建、表达及其蛋白的纯化

目的构建及表达人生长分化因子11(growth differentiation factor 11,GDF11)基因原核表达质粒,并对重组表达蛋白进行纯化。方法 PCR法扩增人源GDF11 cDNA全长序列,插入至载体pCold-I,构建重组质粒pCold-GDF11,转化感受态Rosetta(DE3)菌株,经终浓度为0.5 mmol/L的IPTG诱导表达后,超声破碎获得GDF11包涵体,添加8 mol/L尿素溶解,与Ni^(2+)NTA Agarose充分混匀后装柱,用含谷胱甘肽(glutathione,GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)的复性液进行复性,经含咪唑的洗脱液洗脱获得目的蛋白,进行Western blot检测。结果重组质粒pCold-GDF11经双酶切及测序鉴定,构建正确;诱导表达蛋白的相对分子质量约45 000,主要以包涵体形式存在;GDF11蛋白纯化产物纯度达85%以上,每升菌液获得2.5 mg的目的蛋白,且可与小鼠抗His单克隆抗体发生特异性结合。结论成功构建了GDF11基因原核表达质粒,且表达产物经纯化后可获得纯度较高的目的蛋白。

人生长分化因子3白细胞介素-1β及胸苷激酶1在乳腺癌患者中的表达及意义

目的探讨人生长分化因子3(GDF3)、白细胞介素-1β(IL-1β)及胸苷激酶1(TK1)在乳腺癌患者中的表达及其临床意义。方法收集2017年1月-2019年6月在该院就诊的女性乳腺癌患者65例,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测GDF3和IL-1β,采用点印迹免疫酶化学发光法检测TK1。结果GDF3、IL-1β和TK1在乳腺癌组中的表达水平显著高于对照组(P<0.05);GDF3、IL-1β和TK1表达水平在年龄和肿瘤直径方面无统计学意义(P>0.05);在分化程度、TNM分期和淋巴结转移方面有统计学意义(P<0.05);GDF3对乳腺癌的诊断效能(AUC)为0.922,IL-1β对乳腺癌的AUC为0.887,TK1对乳腺癌的AUC为0.840,三者均具有较高的诊断效能。结论GDF3、IL-1β和TK1在乳腺癌患者中表达水平升高,对乳腺癌的诊断和病情监测有重要的临床价值。

生长分化因子15基因的克隆及重组原核表达载体的构建

为克隆人生长分化因子15基因,构建h GDF15基因的重组原核表达载体,为研究该基因的功能奠定实验基础,利用PCR技术克隆其基因序列,将其分别连接至p ET28a和p Cold I载体,构建重组p ET28a-h GDF15和p Cold I-h GDF15原核表达载体,并进行质粒PCR和双酶切验证以及测序验证。结果表明:重组载体构建成功,为进一步研究h GDF15蛋白的作用机制奠定基础。

钼靶和超声多普勒结合血清肿瘤标志物诊断早期乳腺癌研究

目的:探讨钼靶、超声多普勒和血清肿瘤标志物中血清前列腺特异抗原(PSA)、血清糖类抗原15-3(CA153)、黏蛋白1(MUC1)、人类生长分化因子3(GDF3)单独及联合检测在早期乳腺癌诊断中的价值。方法:选取2018年1月至2021年12月在唐山市人民医院经病理检查确诊的96例乳腺癌患者(乳腺癌组)和同期在本院接受诊治的70例乳腺良性疾病患者(良性病灶组)以及同时选取在本院体检健康的50名体检者(健康对照组),以术后病理检查为“金标准”,比较钼靶、超声多普勒检查以及血清PSA、CA153、MUC1、GDF3单独及6者联合应用对乳腺癌的诊断价值。结果:乳腺癌组96例乳腺癌患者中有78例乳腺超声诊断为恶性,阳性检出率为81.3%;80例钼靶X射线检查诊断为恶性,阳性检出率为83.1%;乳腺癌组的血清PSA、CA153、MUC1及GDF3的水平明显高于良性病灶组和健康对照组,差异均有统计学意义(t_(良性病灶组)=8.783、10.361、11.258、18.965;t_(健康对照组)=9.564、12.658、12.688、20.163,P<0.05);以乳腺癌作为因变量,血清PSA、CA153、MUC1及GDF3为自变量,进行Logistic回归分析,血清PSA、CA153、MUC1及GDF3是乳腺癌的重要危险因素(OR=1.165、1.168、1.472、1.248,P<0.05);受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标单独应用时:乳腺超声、钼靶,血清PSA、CA153、MUC1及GDF3的ROC曲线下面积(AUC)(95%CI)、灵敏度和特异度分别为0.723(0.595~0.851)、82.56%和67.32%,0.761(0.636~0.886)、85.79%和65.36%,0.833(0.726~0.941)、81.48%和85.73%,0.837(0.738~0.926)、61.25%和70.17%,0.768(0.648~0.889)、71.49%和80.87%,0.613(0.469~0.758)、52.94%和50.57%;而6项联合应用时AUC(95%CI)、灵敏度和特异度分别为0.958(0.905~0.999)、96.37%和84.83%,其诊断效能更高。结论:钼靶、超声多普勒和血清PSA、CA153、MUC1、GDF3联合检测效能高于单独检测,有助于早期鉴别和诊断乳腺癌。

血清HAS2、GDF3及CEACAM1在乳腺癌患者行根治术前后的变化特征及其与术后切口部位感染、局部复发的相关性分析

目的探讨血清透明质酸合成酶2(HAS2)、人生长分化因子3(GDF3)及癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)在乳腺癌患者行根治术前后的变化特征及其与术后切口部位感染、局部复发的相关性。方法回顾性选取商洛市中心医院2020年10月至2022年10月收治的乳腺癌患者80例作为研究对象,所有患者均采取根治性手术治疗,对所有患者进行1年随访,分别记录所有患者手术前、术后1周、术后1个月及术后1年HAS2、GDF3及CEACAM1水平变化情况。根据患者术后切口部位感染情况分为感染组(n=15)和非感染组(n=65),分析HAS2、GDF3及CEACAM1与术后切口部位感染的关系,并分析影响术后切口部位感染的危险因素。对所有患者进行1年随访,依照其术后1年内局部复发情况分为复发组(n=20)与非复发组(n=60),分析HAS2、GDF3及CEACAM1与术后局部复发的关系,并分析影响术后局部复发的危险因素。结果乳腺癌患者行根治术后1周、术后1个月及术后1年,HAS2表达水平分别为(211.80±23.82)、(173.69±19.75)、(171.43±22.64)pg/mL,均明显低于手术前[(256.57±38.24)pg/mL],GDF3表达水平分别为(121.23±25.16)、(98.27±13.35)、(95.85±17.84)pg/mL,均明显低于手术前[(157.19±26.24)pg/mL],CEACAM1水平分别为(21.57±5.24)、(34.46±4.46)、(25.34±3.75)μg/L,均高于手术前[(7.80±3.82)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。感染组与非感染组患者HAS2水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);感染组GDF3表达水平为(166.35±23.61)pg/mL,高于非感染组[(148.83±30.68)pg/mL],CEACAM1水平为(5.65±1.14)μg/L,低于非感染组[(8.15±2.36)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。GDF3与术后切口部位感染呈正相关(r=0.425,P<0.05),CEACAM1与术后切口部位感染呈负相关(r=-0.537,P<0.05)。且经多因素Logistics回归分析发现,GDF3为乳腺癌根治术后切口部位感染的独立危险因素(P<0.05)。复发组HAS2、GDF3表达水平分别为(315.63±42.63)pg/mL、(179.46±32.53)pg/mL,均明显高于非复发组[(216.83.±27.85)pg/mL、(143.64±21.63)pg/mL],CEACAM1水平为(3.52±1.06)μg/L,低于非复发组[(6.78±2.62)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。HAS2、GDF3与术后局部复发呈正相关(r=0.426、0.634,P<0.05),CEACAM1与术后局部复发呈负相关(r=-0.542,P<0.05)。且经多因素Logistics回归分析发现,HAS2、GDF3为乳腺癌根治术后局部复发的独立危险因素,CEACAM1为乳腺癌根治术后局部复发的保护因素(P<0.05)。结论乳腺癌患者行根治术前后血清HAS2、GDF3及CEACAM1水平均会出现显著变化,且发现GDF3是术后切口部位感染发生的影响因素,HAS2、GDF3及CEACAM1是术后局部复发的影响因素。

GDF3联合CA125、CA153、CEA等血清指标在乳腺癌诊断中的价值

目的探讨血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原153(CA153)、糖类抗原125(CA125)、人生长分化因子(GDF3)单独或联合检测对乳腺癌的诊断价值。方法选取承德医学院附属第二临床学院暨承德市中心医院肿瘤科2012年12月~2013年11月期间经病理学诊断证实的52例乳腺癌患者,40例良性乳腺疾病患者,40例健康体检者,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定GDF3,电化学发光免疫分析法测定CEA、CA125、CA153。结果三组在血清CEA和CA125以及CA153、GDF3水平等指标进行比较,乳腺癌组明显要比较良性乳腺疾病组以及健康组高,差异有统计学意义(P【0.05)。结论在临床上,对乳腺癌患者进行血清学诊断时,不能够单独地依赖某一个指标来对患者进行诊断,需要对各项指标进行联合分析来提高对乳腺癌的诊断率。此外,在良性疾病中,各项指标也出现部分升高的情况,所以,不能将乳腺癌血清学的检查取代病理学检查,同时也不能因单独几项指标的升高来诊断乳腺癌。为了能够提高诊断率,需要结合患者的临床症状和相关影像学检查以及病理学等,防止出现误诊和漏诊的情况发生。

PSA、MUC1、GDF3联合检测在乳腺癌患者中的临床诊断价值研究

目的探析人生长分化因子3(GDF3)、前列腺特异抗原(PSA)、MUC1蛋白联合检测在乳腺癌患者早期诊断中的临床价值。方法分析2013年1月—2015年11月在本院接受治疗的62例乳腺癌患者(A组)的临床资料,选取同期接受诊治的56例乳腺良性疾患者(B组)和接受健康体检的45例正常健康者(C组)作为本次研究的对照组。比较三组患者的一般资料、血清PSA、MUC1及GDF3水平。结果三组患者的一般资料无明显统计学差异(P>0.05)。A组患者的血清PSA、MUC1及GDF3水平明显高于B、C组(P<0.05)。PSA+MUC1+GDF3联合检测的敏感度、特异度及准确度均明显高于单项检测(P<0.05)。结论PSA+MUC1+GDF3联合检测在乳腺癌患者的早期诊断中具有重要的临床价值,值得推广。

血清CYFRA21-1、TPS、GDF-3与乳腺癌患者临床分期的相关性研究

目的分析血清细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、组织多肽特异性抗原(TPS)、人生长分化因子3(GDF-3)与乳腺癌患者临床分期的关联性。方法选取73例乳腺癌患者作为实验组,纳入同期75例乳腺良性疾病患者作为对照组、70例健康体检者作为正常对照组。统计血清CYFRA21-1、TPS、GDF-3水平。结果实验组血清CYFRA21-1、TPS、GDF-3水平高于对照组、正常对照组(P<0.05);实验组I～II期患者血清CYFRA21-1、TPS、GDF-3水平低于Ⅲ期、Ⅳ期(P<0.05);血清CYFRA21-1、TPS、GDF-3与乳腺癌患者临床分期呈正相关(P<0.05)。结论血清CYFRA21-1、TPS、GDF-3水平与乳腺癌临床分期呈正相关,监测血清CYFRA21-1、TPS、GDF-3水平可为临床诊治乳腺癌提供参考依据。