人甲状旁腺激素相关蛋白片段对骨质疏松大鼠股骨和腰椎骨密度的影响

目的观察人甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP1-34)对去卵巢的骨质疏松大鼠股骨、腰椎骨密度(BMD)的影响。方法80只4月龄Wistar健康雌性大鼠,其中60只行双侧卵巢摘除术,20只做假手术,6w后各处死10只证实骨质疏松造模成功。剩余50只骨质疏松模型鼠随机分为5个治疗组,每组10只,其他10只假手术组作对照。PTHrP治疗组(PTHrP20组,PTHrP40组,PTHrP80组)分别用20、40、80μg/kg剂量,每日皮下注射1次PTHrP1-34;雌二醇治疗组(E2组)用苯甲酸雌二醇40μg/kg,每3天注射1次;安慰剂组及假手术对照组分别用生理盐水,每3d注射1次。治疗3个月后,测定并比较股骨、腰椎不同部位BMD及血清钙、磷、碱性磷酸酶(ALP)水平。结果双侧卵巢摘除6w后,大鼠腰椎BMD明显低于假手术组(P<0.05)。3个月治疗后,PTHrP40组和PTHrP80组大鼠股骨、腰椎BMD明显高于安慰剂组,与E2组无显著差异,腰椎BMD较PTHrP20组明显升高(P<0.05);PTHrP40组与PTHrP80组无明显差异。结论每日每公斤体重皮下注射40和80μg PTHrP1-34对去卵巢骨质疏松大鼠股骨、腰椎BMD均有增高作用,对腰椎作用更为明显。

不同咀嚼负荷对幼兔髁突软骨内印度豪猪蛋白-人甲状旁腺激素相关蛋白通路表达的影响

目的分析不同咀嚼负荷作用下,幼兔髁突软骨内印度豪猪蛋白(Ihh)-人甲状旁腺激素相关蛋白(PThrP)通路表达的差异性,探讨咀嚼应力负荷对髁突软骨Ihh-PThrP信号通路的影响。方法选取10d龄幼兔48只,随机分为硬食组和软食组,分别喂以同种颗粒状(硬食)和粉状(软食),于饲养的第2、4、6、8周处死。采用苏木精-伊红(HE)染色、免疫组织化学、免疫印迹、实时定量荧光聚合酶链反应检测Ihh和PThrPmRNA和蛋白的动态变化。结果HE染色显示硬食组髁突软骨厚度高于软食组的厚度;第2、4、6、8周,Ihh蛋白、PThrP蛋白和mRNA表达量在两组中呈递减趋势;软食组中Ihh和PThrP蛋白以及mRNA表达量显著低于硬食组。结论较低的咀嚼负荷会造成髁突软骨生长因子Ihh和PThrP分泌减少,Ihh-PThrP通路表达迟缓,软骨发育受阻碍;适当的咀嚼负荷对髁突的正常发育有至关重要的作用。

重组人甲状旁腺激素相关蛋白1-141序列的克隆和表达载体构建

目的:构建人甲状旁腺激素相关蛋白1-141(hPTHrP1-141)基因的表达载体。方法:提取人基因组DNA,PCR扩增PTHrP1-141基因,将其克隆入原核表达载体pQE-30Xa,构建重组表达载体pQE-30Xa/hPTHrP1-141。结果:重组载体pQE-30Xa/hPTHrP1-141经限制性核酸内切酶PvuⅡ酶切鉴定,得到符合预期大小的核酸片段。结论:表达载体pQE-30Xa/hPTHrP1-141构建成功。

重组人甲状旁腺激素相关蛋白1-141的表达和生物活性测定

目的:建立表达及纯化重组人甲状旁腺激素相关蛋白1-141(rhPTHrP1-141)的方法。方法:将已构建好的表达载体pQE-30Xa/hPTHrP1-141重组质粒转化大肠杆菌M15[PREP4],IPTG诱导表达,WesternBlot鉴定表达产物。金属螯合亲和层析去除杂蛋白后,超滤离心进一步纯化目的蛋白。使用UMR106细胞测定所制备的rhPTHrP1-141对cAMP生成的刺激作用。结果:SDS-PAGE可见与预期大小相符的蛋白条带,WesternBlot证实该条带即为rhPTHrP1-141。目的蛋白经纯化后,能刺激UMR106细胞内cAMP浓度升高,有剂量依赖关系。结论:成功建立了rhPTHrP1-141的制备及纯化方法,PTHrP1-141的表达量可达到60mg/L培养基。表达产物经体外实验证实具有生物活性。

人甲状旁腺激素相关蛋白(1-34)对去卵巢大鼠骨密度和骨生物力学性能的影响

目的:观察人甲状旁腺激素相关蛋白氨基端肽(PTHrP1-34)对去卵巢的骨质疏松大鼠骨密度(BMD)和骨生物力学性能的影响。方法:80只4月龄Wistar健康雌性大鼠,其中60只行双侧卵巢摘除术,20只做假手术,6周后各处死10只证实骨质疏松造模成功。剩余50只骨质疏松模型鼠随机分为5个治疗组,每组10只,其它10只假手术组作对照。PTHrP治疗组(PTHrP20组,PTHrP40组,PTHrP80组)分别用20、40、80μg/kg剂量,每日皮下注射1次PTHrP1-34;雌二醇治疗组(E2组)用苯甲酸雌二醇40μg/kg,每3d注射1次;安慰剂组及假手术对照组分别用生理盐水,每3d注射1次。治疗3个月后,测定并比较股骨、腰椎BMD、骨生物力学参数及血清钙、磷、碱性磷酸酶(ALP)水平。结果:双侧卵巢摘除6周后,大鼠腰椎BMD及腰椎压缩最大载荷明显低于假手术组(P<0.05)。3个月治疗后,PTHrP40组和PTHrP80组大鼠股骨、腰椎BMD及骨生物力学性能明显高于安慰剂组,与雌二醇治疗组无显著差异,腰椎BMD明显高于PTHrP20组(P<0.05);PTHrP40组与PTHrP80组无明显差异。结论:每日每公斤体重皮下注射40和80μgPTHrP1-34对去卵巢骨质疏松大鼠有明显治疗作用。

血液透析患者蛋白质能量消耗与甲状旁腺激素水平相关性

目的:探讨维持性血液透析(MHD)患者蛋白质能量消耗(PEW)与甲状旁腺激素(PTH)水平相关性。方法:收集2021年1~12月在马鞍山市人民医院透析中心治疗的102例MHD患者临床资料及人体测量数据,采用国际肾脏营养及代谢协会制定的PEW诊断标准,纳入肌肉组织指数(LTI)、体细胞质量指数(BCMI)指标。根据PTH水平将患者分为低PTH组(PTH<150 pg/mL)、PTH目标组(150 pg/mL≤PTH<600 pg/mL)、高PTH组(600 pg/mL≤PTH<1000 pg/mL)、PTH极高组(PTH≥1000 pg/mL),采用Logistic回归分析PTH水平与PEW发生风险的关系。结果:MHD患者PEW发生率49%(50/102),低PTH组多项营养指标低于PTH目标组(P<0.05),PTH极高组部分营养指标低于PTH目标组(P<0.05)。根据营养不良-炎症评分(MIS)对患者PEW进行分度,不同PTH组患者PEW营养不良严重程度差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示透析龄增长、低PTH水平(P<0.05)是发生PEW的危险因素。结论:MHD患者PEW发生率较高,血清PTH水平与PEW发生密切相关,临床应重视并注意早期防治。

单核细胞与高密度脂蛋白比值、血清甲状旁腺激素、载脂蛋白A1、胱抑素C及同型半胱氨酸水平与急性心肌梗死患者合并心力衰竭的相关性研究

目的 研究单核细胞与高密度脂蛋白比值、血清甲状旁腺激素、载脂蛋白A1、抑素C及同型半胱氨酸水平与急性心肌梗死患者合并心力衰竭的相关性。方法 回顾性分析2022年1月至2024年1月常州市第一人民医院治疗的160例AMI患者的临床资料,并根据是否合并心力衰竭分为心衰组和非心衰组。比较两组的相关指标。结果 心衰组患者年龄、cTnI、CK-MB、BNP、Scr、MHR、PTH、Cys C及HCY水平均高于非心衰组,行PCI急诊手术及ApoA-Ⅰ水平低于非心衰组;使用Logistic回归进一步分析发现BNP、MHR、PTH、Cys C及HCY水平增高,ApoA-Ⅰ水平降低是AMI合并心力衰竭的独立危险因素。结论 单核细胞与高密度脂蛋白比值、血清甲状旁腺激素、载脂蛋白A1、抑素C及同型半胱氨酸是急性心肌梗死合并心力衰竭的独立因素,具有较好的临床价值。

孕激素相关子宫内膜蛋白在胃癌早期诊断、预后中的作用

为使用生物信息学系统分析孕激素相关子宫内膜蛋白(Progestagen-associated endometrial protein, PAEP)在胃癌中的早期诊断和预后预测性能及免疫浸润相关性,该研究构建预测模型ROC曲线和偏差校正曲线检验其性能准确性,并通过细胞实验进一步验证分析结果.生信分析结果显示,与正常组织相比,胃癌组织中PAEP的表达较高,在早期(T1期、N0期、M0期)即有统计学意义(P<0.001),且诊断胃癌的准确性较高(ROC曲线下面积为0.889);PAEP高表达的胃癌患者预后较差(P≤0.001);TNM分期越晚,年龄越大,PAEP表达越高,胃癌患者生存概率越低,偏差校正曲线接近理想曲线(45°线),显示预测结果良好;PAEP的表达与胃癌中的中性粒细胞、巨噬细胞的浸润水平呈正相关趋势,与B细胞、中央记忆型T细胞、T细胞呈显著的负相关趋势.qRT-PCR和Western blot结果显示,HGC-27、BGC-823、MKN-45、SGC-7901和AGS细胞中PAEP基因转录水平和蛋白表达水平均显著高于GES-1.结果表明了PAEP蛋白可用于胃癌诊断和预后的生物标志物,并进行了实验验证,其机制与免疫有关.

替吉奥联合奥沙利铂对老年胃癌患者胃动力相关激素及基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9的影响

目的探讨替吉奥联合奥沙利铂对老年胃癌患者胃动力相关激素及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响。方法选取128例老年胃癌患者为研究对象,随机分成对照组(n=64)与观察组(n=64)。对照组给予替吉奥治疗,观察组给予替吉奥联合奥沙利铂治疗。观察2组的胃动力相关激素[胃动素(MTL)、血管活性肠肽(VIP)]、MMP-2与MMP-9、肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原19-9(CA19-9)]、临床疗效以及不良反应发生情况。分析胃动力相关激素与MMP-2、MMP-9及肿瘤标记物水平的相关性。结果治疗后,2组MTL低于治疗前,VIP高于治疗前,且观察组MTL低于对照组,VIP高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组MMP-2、MMP-9及CEA、CA125、CA19-9低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组总有效率为70.31%,高于对照组的53.13%,差异有统计学意义(P<0.05)。2组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。MTL与MMP-2、MMP-9、CEA、CA125、CA19-9呈负相关(P<0.05);VIP与MMP-2、MMP-9、CEA、CA125、CA19-9呈正相关(P<0.05)。结论替吉奥联合奥沙利铂治疗老年胃癌患者的效果较好,且安全性较高。MTL、VIP与MMP-2、MMP-9及CEA、CA125、CA19-9在老年胃癌患者的疾病发展中起相互关联作用。

实验性单侧前牙反修复体对大鼠髁突软骨中甲状旁腺激素相关蛋白和PTH/PTHrP受体-1表达的影响

目的探讨实验性单侧前牙反修复体对大鼠髁突软骨中甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)及PTH/PTHrP受体-1(PTH1R)表达的影响。方法在6周龄SD大鼠左侧上、下切牙粘接金属不良修复体,使其呈反关系,2、4、8周后取颞下颌关节(TMJ),苏木精-伊红(HE)染色观察组织形态学变化,免疫组织化学染色及实时定量聚合酶链反应检测PTHrP、PTH1R的表达情况。结果 8周时,实验组髁突软骨出现明显退行性变,PTHrP阳性细胞较对照组显著增多(P<0.01),PTH1R阳性细胞明显减少(P<0.01);实验组髁突软骨PTHrP mRNA的表达显著高于对照组(P<0.01),而PTH1R mRNA表达明显降低(P<0.01)。结论髁突软骨PTHrP的高表达因PTH1R的低表达不能有效发挥作用,可能是髁突软骨骨关节病样变的重要分子机制之一。

牵张力作用下甲状旁腺激素相关蛋白对人成骨样细胞增殖的影响

目的研究牵张力作用下甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)对人成骨样细胞增殖的影响。方法建立体外培养细胞牵张力施力模型。利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PTHrP mRNA的表达及12%牵张应变作用下PTHrP(1nmol/L)对MG-63细胞c-fos mRNA表达的影响。检测不同浓度PTHrP(0、0.01、0.1、1nmol/L)及12%牵张应变联合作用12h后对细胞增殖活性的影响。结果不同牵张力对PTHrP mRNA表达影响的差异具有统计学意义,12%牵张应变组作用的影响最为显著。牵张力联合PTHrP刺激下培养较PTHrP或牵张力的单独效应具有更强的促MG-63增殖作用。牵张力联合PTHrP作用较牵张力的单独效应具有更强的增加MG-63细胞c-fos mRNA表达的作用。结论牵张力可显著影响人成骨样细胞PTHrP mRNA的表达水平。PTHrP在牵张力环境下较牵张力的单独效应具有更强的促MG-63增殖作用。在牵张力环境下PTHrP可能通过c-fos信号传导途径影响成骨细胞增殖。

终末期肾病患者甲状旁腺激素与肌钙蛋白水平的相关性研究

目的探讨终末期肾病(ESRD)患者的肌钙蛋白(c Tn I)与甲状旁腺激素(i PTH)水平的相关性。方法选择我院2014年2月至2015年2月收治的126例终末期肾病患者为ESRD组,其中i PTH>200 ng/L者58例作为治疗组,所有患者均进行心脏彩超检查,治疗组患者接受活性维生素D3冲击治疗;另选同期健康体检者120例为健康组,对三组受检者进行血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、血红蛋白(Hb)、血清P物质(P)、血清钙(Ca)、c Tn I、i PTH等生化指标检验,探讨c Tn I、i PTH与心脏结构的相关性。结果 ESRD患者中i PTH升高96例(76.19%),c Tn I升高70例(55.56%);左室肥厚(LVH)88例(73.33%),治疗组LVH患者51例(87.93%);ESRD组与健康组各项生化指标比较差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗后各指标与治疗前比较明显改善,差异均有统计学意义(P<0.05);肌钙蛋白(c Tn I)与左心室质量(LVMI)呈线性相关性,r=0.223,P<0.05;与肾功能无相关性,r=0.125,P>0.05;i PTH与肾功能损伤程度、LVMI呈线性正相关性,r分别为0.365、0.412,P<0.05;不管治疗与否,i PTH与c Tn I均为持续性正相关性,r分别为0.214,0.369,P<0.05。结论 ESRD患者继发高甲状旁腺激素血症为常见症状,c Tn I上升与LVH也常存在,c Tn I与i PTH呈密切相关性,治疗高甲状旁腺激素血症,可有效改善心肌损伤,利于远期预后。

甲状旁腺激素相关蛋白的临床研究

目的 :探讨慢性肾衰竭 (CRF)患者甲状旁腺激素 (PTH)和甲状旁腺激素相关蛋白 (PTHrP)与中医辨证分型的关系。方法 :采用放免法测定 92例CRF患者和 30例正常人血清PTH和血浆PTHrP含量 ,并按中医辨证分型 ,将CRF患者分为脾肾气虚、脾肾气阴两虚、肝肾阴虚、阴阳两虚四型。结果 :四个不同证型中的血清PTH、血浆PTHrP含量较正常对照组明显升高。结论 :(1)血清PTH可做为慢性肾衰竭中医辨证分型的参考指标 ;(2 )

中医不同治法对绝经后骨质疏松症大鼠骨骼、骨骼肌甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)含量影响的比较研究

目的观察补肾、健脾、活血法对骨质疏松症大鼠骨骼、骨骼肌甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)含量变化的影响。方法将SD雌性大鼠分为正常组、模型组、补肾组、健脾组、活血组。采用酶联免疫法测定小鼠骨骼、骨骼肌PTHrP含量变化。结果(1)与正常组比较,模型组大鼠骨骼的PTHrP含量显著降低(P<0.01);与模型组比较,补肾组、健脾组、活血组骨骼的PTHrP含量明显升高(P<0.01),其中补肾组升高程度比较明显。(2)与正常组比较,模型组大鼠骨骼肌的PTHrP含量显著降低(P<0.01);与模型组比较,补肾组、健脾组、活血组骨骼肌的PTHrP含量明显升高(P<0.01),其中健脾组升高程度比较明显。结论 (1)骨质疏松症的形成,可能与骨骼、骨骼肌协调性下降有关。(2)补肾、健脾方法通过提高骨质疏松症大鼠的骨骼、骨骼肌PTHrP含量,对骨质疏松症具有一定的防治作用。

鼠源性甲状旁腺激素相关蛋白1～84片段的制备及其促进骨形成的作用

目的:构建并表达鼠源甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone related protein,PTHrP)1～84片段的载体,并检测其在促进骨形成中的作用。方法:应用RT-PCR方法体外扩增mPTHrP1～84基因,经测序后重组入原核表达载体pGEX-2TK,将构建正确的pGEX-2TK/mPTHrP1～84原核表达载体转化E.coliBL21,IPTG诱导表达。表达产物经蛋白纯化及活性鉴定,通过细胞学实验确定纯化的重组PTHrP片段在促进骨形成中的作用。结果:构建的重组表达载体pGEX-2TK/mPTHrP1～84诱导表达产物以可溶性的形式存在;纯化的mPTHrP1～84可促进小鼠的间充质干细胞向成骨方向增殖和分化。结论:构建、表达的mPTHrP1～84片段可促进骨形成。

重组甲状旁腺激素相关蛋白1-36及其在促进牙槽骨骨形成中的作用

目的:构建重组甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone related protein,PTHrP)1-36并观察其在促进牙槽骨骨形成中的作用。方法:构建pGEX-2TK/PTHrP1-36原核表达载体,表达重组小鼠PTHrP1-36蛋白。通过处理小鼠原代骨髓间充质细胞和卵巢切除致颌骨疏松的小鼠,体外和体内观察重组PTHrP1-36在促进牙槽骨骨形成中的作用。采用SPSS 10.0软件包对数据进行统计学分析。结果:实验结果显示,pGEX-2TK/PTHrP1-36原核表达载体构建成功,IPTG可诱导新生蛋白表达。体外处理小鼠骨髓细胞,发现重组PTHrP1-36蛋白可以增加总成纤维细胞克隆形成单位(CFU-f)、碱性磷酸酶阳性的CFU-f和钙化结节的数目。在卵巢切除致颌骨疏松的小鼠体内注射重组PTHrP1-36蛋白,发现小鼠牙槽骨骨密度增加。H-E染色以及骨胶原染色显示,牙槽骨骨量明显增加。结论:重组PTHrP1-36可促进骨髓间充质细胞的成骨分化,促进牙槽骨骨密度和骨量的增加,提示PTHrP1-36在促进牙槽骨形成中具有积极作用。

甲状旁腺激素相关蛋白的研究进展

甲状旁腺激素相关蛋白（parathyroid hormone-relatedprotein,PTHrP）又称甲状旁腺激素类似激素（parathyroid hor-mone-like hormone,PTHLH）,于1987年被发现,由BURTIS等从高钙血症相关的恶性肿瘤组织中分离得出,因其基因结构及生物活性均与甲状旁腺激素（parathyroid hormone,PTH）类似,故称为PTHrP。

体外骨对甲状旁腺激素相关蛋白-141的双相反应

目的:通过体外器官培养系统,探讨甲状旁腺激素相关蛋白(Parathyroid hormone-related protein,PTHrP)在新骨生成和骨组织破坏方面的效应。方法:将全长PTHrP(-36～+141)cDNA克隆进真核表达载体pcDNA3.1(+),并用重组质粒pcDNA3.1-PTHrP转染LCC15-MB乳腺癌细胞,在体外器官培养系统里加不同浓度含PTHrP的条件培养上清液培养小鼠颅盖骨。通过组织学方法检测PTHrP141在新骨形成和骨组织破坏方面的效应。结果:转染的乳腺癌细胞产生的PTHrP在低剂量时诱导骨的形成,而高剂量时诱导骨的再吸。结论:PTHrP在新骨的形成和骨组织的破坏方面因其浓度的不同而具有不同效应。

甲状旁腺激素相关蛋白与肺癌及乳腺癌骨转移的相关研究

目的通过放射免疫学(RIA)的方法来研究甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)与实体瘤骨转移的相关性,为临床工作中肿瘤骨转移的诊断与治疗提供新的途径。方法 57例患者中,男28例,女29例;年龄33～76岁,平均年龄61岁。根据CSCO最新发布的2007版《实体瘤(肺癌,乳腺癌)骨转移临床诊疗专家共识》中提出的骨转移的诊断方法对肿瘤患者进行分组。A组为伴发骨转移的肿瘤患者28例;B组为无骨转移的肿瘤患者29例。C组为正常对照31例,为同期健康体检者,年龄35～75岁,平均年龄64岁(均排除肿瘤及甲状旁腺疾病)。通过放射免疫分析法检测血浆中PTHrP水平。结果 A、B、C组PTHrP水平分别为(48±5)pg/100μl,(40±4)pg/100μl,(37±6)pg/100μl。A组的PTHrP值均高于B组与C组,3组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肺癌、乳腺癌骨转移瘤患者体内PTHrP水平明显高于无骨转移及健康者,提示PTHrP与肿瘤骨转移具有一定相关性。