人类白细胞抗原-抗原肽复合物特异性细胞毒性T细胞的诱生及克隆

为建立一种有效诱导及克隆人类白细胞抗原 ( HL A) -抗原肽复合物特异性细胞毒性 T细胞 ( CTL)的方法。用 EB病毒转化的 B淋巴母样细胞系细胞作为刺激细胞 ,采用长期混合淋巴细胞培养法诱导自身外周血 T细胞库中抗原肽 - HL A复合物特异性 CTL 增殖、分化 ,并用有限稀释法对之进行克隆。通过细胞毒实验证实获得的 CD3 +、CD8+ T细胞克隆具有高度抗原特异性并受某些 HL A型别的限制。

热激诱导Jurkat细胞中主要组织相容性复合物Ⅱ类转录激活因子基因和人白细胞抗原的表达

目的检测热激对Jurkat细胞中主要组织相容性复合物Ⅱ类转录激活因子(CⅡTA)的表达,及其对下游人类白细胞抗原(HLA-DR)表达的影响。方法采用实时RT-PCR检测42℃热激和干扰素-γ(IFN-γ)作用前后Jurkat细胞中CⅡTA mRNA的变化。采用Western blot检测热激和IFN-γ作用前后Jurkat细胞中CⅡTA蛋白的表达变化。采用流式细胞仪荧光分析热激前后Jurkat细胞表面HLA-DR的表达。结果在Jurkat细胞中,热激可诱导CⅡTAmRNA和蛋白的表达,而IFN-γ处理后无明显变化。与正常Jurkat细胞相比,热激后HLA-DR在Jurkat细胞表面的抗原浓度明显增加(P<0.01)。结论热诱导Jurkat细胞中CⅡTA和HLA-DR先后表达增高。提示热激可能在免疫基因表达缺陷的细胞中,重建相关基因的功能,为肿瘤热疗提供新的依据。

急性冠脉综合征患者血清E-选择素和白细胞CD11b/CD18表达的研

目的 观察血清E 选择素水平、中性粒细胞及单核细胞CD11b/CD18表达在急性冠脉综合征 (ACS)患者中的变化 ,探讨其与斑块稳定性的关系。方法 3 0例ACS患者 (ACS组 )、2 4例稳定型心绞痛患者 (SA组 ) ,3 0例冠状动脉造影阴性者作为对照组。酶联免疫吸附法检测E 选择素 ,流式细胞仪检测CD11b/CD18的表达。结果 血清E 选择素水平、中性粒细胞和单核细胞膜CD11b/CD18的表达ACS组显著高于SA组 (P <0 .0 1)和对照组 (P <0 .0 1)。结论 ACS患者血清E 选择素水平。

人类白细胞抗原部分基因多态性与丙型肝炎病毒感染相关性研究进展

国内外有关宿主遗传基因与疾病关系的研究成果表明,人类白细胞抗原(HLA)在宿主免疫系统的免疫应答过程中发挥着举足轻重的作用。机体受到病原体感染后,其对病原体的清除以及疾病转归方面表现出的不同,在很大程度上取决于个体间基因组的差异。大量研究证实,HLA多态性是与丙型肝炎病毒(HCV)的易感性和清除相关的一个宿主基因,我们就该研究领域的进展进行简要综述。

重组人白细胞介素-11对雌激素周期性小鼠阴道上皮细胞有丝分裂和PCNA表达的影响

目的研究重组人白细胞介素-11(rh IL-11)对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响。方法采用雌激素周期性小鼠阴道上皮增殖银屑病实验模型及PCNA免疫组化方法,测定白细胞介素-11对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂和PCNA表达的影响。结果白细胞介素-11可显著抑制小鼠阴道上皮细胞有丝分裂(P<0.01),并显著抑制PCNA的表达(P<0.01)。结论白细胞介素-11可明显抑制上皮细胞有丝分裂和PCNA的表达,对银屑病等表皮过度增殖性异常病变有较好的防治作用。

人类白细胞抗原-B27检测的方法学评析与选择

人类白细胞抗原-B27（HLA-B27）是人类主要组织相容性复合物（MHC）Ⅰ类分子B位点的等位基因,位于人的第6号染色体短臂上,是由8个外显子和7个内含子组成[1]。HLA-B27分子含有2条多肽链,一条是α链或重链,另一条是β链或轻链,相对分子质量约56000。

中性粒细胞黏附因子CD11b与CD64表达对新生儿感染的早期诊断价值

目的：探讨外周血中性粒细胞黏附因子CD11b、CD64表达在新生儿细菌感染早期诊断及疗效评价中的价值。方法：记录我院新生儿病房住院疑为细菌感染的63例患儿的临床表现、血培养、脑脊液培养结果,检测5项非特异性指标。分为败血症组33例,非败血症感染组30例,另设对照组15例。各组患儿在入院后24-48h内取外周静脉血1mL,采用流式细胞仪检测中性粒细胞CD11b、CD64表达。败血症组在恢复期（治疗1周后）复查。结果：败血症组中性粒细胞CD11b、CD64表达均高于非败血症感染组和对照组（P〈0.05）。败血症组在恢复期CD11b、CD64表达水平下降（P〈0.05）。以CD11b≥320MFI（MFI为平均荧光强度）、CD64≥20MFI为临界值阳性标准,其诊断败血症的敏感度分别为72.73%和75.00%,特异度分别为94.74%和80.49%。CD11b和CD64在革兰阳性菌和阴性菌感染时表达差异无统计学意义。结论：应用流式细胞术测定中性粒细胞黏附因子CD11b、CD64,可作为早期诊断新生儿败血症的实验室依据之一,动态观察其水平变化,对判断感染程度、治疗效果评价具有临床应用价值。

长期培养的人脐带间充质干细胞PCNA、IL-6、IL-11和galectin-3的表达

目的:探讨长期培养的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)增殖细胞核抗原(PCNA)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-11(IL-11)和半乳糖凝集素-3(galectin-3)mRNA及蛋白表达的变化情况,为hUC-MSCs的实验研究和临床应用提供实验资料和理论依据。方法:取剖宫产新生儿脐带,分离、传代培养hUC-MSCs;收集第3、8、18、28和33代细胞及培养上清,用qRT-PCR、ELISA及Western bloting检测PCNA、IL-6、IL-11和galectin-3 mRNA和蛋白水平。结果:(1)hUC-MSCs PCNA、IL-6、IL-11 mRNA及IL-6、IL-11蛋白的表达随培养传代次数增加而减少,第33代较第3代分别降低了33%、56%、37%和50.3%、58.9%,差异显著(均P<0.01)。(2)各代间galectin-3 mRNA表达无显著差异(P>0.05),且各代间蛋白表达亦无明显差异。结论:(1)体外长期传代培养过程中hUC-MSCs增殖能力和支持造血能力可能逐渐减弱甚至丧失。(2)体外长期传代培养可能对hUC-MSCs的免疫调节功能无显著影响,这有待进一步的实验验证。

中性粒细胞和单核细胞CD11b/CD18在冠心病中的意义

目的 探讨中性粒细胞和单核细胞膜CD11b/CD18的表达在冠心病 (CHD)中的意义。方法 选择 2 4例稳定型心绞痛患者 (SA组 )、2 4例不稳定型心绞痛患者 (UA组 )和 2 2例急性心肌梗死患者 (AMI组 ) ,选 30例冠状动脉造影阴性作对照组。用Gensini积分法评价冠状动脉病变程度 ,将CHD患者分 2组 :A组 (1～ 2 0分 ) ,B组 (>2 0分 )。用流式细胞仪检测CD11b/CD18的表达。结果 外周血中性粒细胞和单核细胞膜CD11b/CD18的表达CHD各组均显著高于对照组 (P <0 .0 1) ;CHD各组间差异具有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;B组上述参数显著高于A组 (P <0 .0 1)。结论 CD11b/CD18可能参与了CHD的发病过程 ,且与冠状动脉粥样硬化程度有关。

结直肠癌患者血清白介素-11、白介素-13和癌胚抗原的表达及相关性

目的:探讨结直肠癌患者在根治性手术后血清中IL-11、IL-13和CEA表达水平的差异,并对其进行相关性分析。方法:选取2012年1月至2015年2月本院收治的70例经手术治疗的结直肠癌患者,在术前、术后第2、4、7天采集血液标本;选取在本院进行体检的健康人群25例采集血液标本。记录性别、年龄以及肿瘤大小、肿瘤分期(TNM)等资料,将收集的各组患者血液标本取血清部分,检测IL-11、IL-13和CEA表达水平并记录分析。结果 :结直肠癌患者以男性居多,平均年龄较大,TNM分期Ⅱ、Ⅲ期居多。结直肠癌患者术前血清IL-11、IL-13和CEA表达均较对照组明显升高(P<0.05),而且三者之间具有显著正相关性(P<0.05);经结直肠癌根治术治疗后,未经放化疗,患者血清IL-11、IL-13和CEA表达明显下降,具有明显正相关性(P<0.05)。结论 :结直肠癌根治性手术可降低患者血清中IL-11、IL-13和CEA的表达,三者相互之间具有显著正相关性,与结直肠癌的发生、发展密切相关。

vIL-10对鼻咽癌细胞株MHC-1类分子抗原加工提呈“操纵子”表达的影响

目的研究病毒白介素-10(vIL-10)对鼻咽癌细胞株MHC-1类分子抗原加工提呈"操纵子"表达的影响。方法收集不同时间段vIL-10处理的鼻咽癌细胞(CNE-1和CNE-2),采用RT-PCR、Western blot方法检测vIL-10处理的鼻咽癌细胞中MHC-1类分子抗原加工提呈"操纵子"(TAP-1、2,LMP-2、7及HLA-I)表达的变化。结果1mRNA水平:CNE-1和CNE-2的TAP-1水平在不同时间点均未表现出显著差异;vIL-10作用1、4、6、12h时,CNE-1和CNE-2的TAP-2、LMP-2均未出现变化,24h时,两者均出现显著下降甚至消失;CNE-1在vIL-10作用后4h即出现LMP-7下降,而CNE-2在vIL-10作用后6h出现下降;在vIL-10作用24h时CNE-1和CNE-2的HLA-I出现显著下降。2蛋白水平:vIL-10作用后24h时,两种细胞的TAP-1均出现显著下降,TAP-2则在vIL-10作用后1、6、12、24h出现逐渐下降;CNE-2的LMP-2、LMP-7在vIL-10作用后随时间逐渐下降,而CNE-1的两种蛋白仅在作用后12h出现显著下降;HLA-I在vIL-10作用后出现下降趋势,但在CNE-1中各时间段变化无统计学差异,CNE-2在24h显著下降。结论 vIL-10可明显抑制鼻咽癌MHC-I类分子抗原加工和提呈的"操纵子"的表达,并且呈一定的时间依赖性。

异种抗原治疗肿瘤对荷瘤小鼠调节性T细胞的影响

目的研究异种抗原免疫续贯瘤内注射的方法对荷瘤小鼠肿瘤局部调节性T细胞数量的影响,及其对肿瘤的治疗作用。方法利用异种抗原免疫续贯瘤内注射的方法处理试验小鼠,测量瘤块大小,计算抑瘤率,使用流式细胞术检测肿瘤主要组织相备性合体Ⅰ类(MHC-Ⅰ)类型表达及调节性T细胞的数量,使用ELISA方法检测瘤内白细胞介素2(IL-2)浓度。结果实验组小鼠的MHC-Ⅰantigen、CD3+CD8+T细胞以及CD3+CD4+CD25+T细胞的表达率分别为42.45%、22.58%和2.91%,IL-2的浓度为100.6pg/ml,与免疫对照组和空白对照组之间存在显著性差异(P<0.01)。结论异种抗原免疫续贯瘤内注射的治疗方法可以上调肿瘤MHC-Ⅰ类抗原,减少肿瘤局部调节性T细胞的数量,有良好的抗肿瘤作用。

白细胞介素17与系统性红斑狼疮

系统性红斑狼疮是不良环境因子促发的遗传异质性疾病．患者体内会产生针对大多数自身抗原．主要是细胞内抗原的免疫反应．这种慢性免疫反应可改变免疫系统的功能。并产生沉积于皮肤、关节、肾小球等易受累组织器官血管床的抗原抗体复合物。免疫复合物的沉积导致了局部炎症和组织损伤，并因此造成自身免疫反应的恶性循环。

奶牛主组织相容性复合物及其在奶牛抗乳房炎分子育种中的应用

奶牛乳房炎是一极为复杂的疾病,对乳房炎的控制也是一系统工程。除了传统的防治手段外,对抗乳房炎性状候选基因或遗传标记的研究已成为乳房炎抗性遗传育种的热点。牛主要组织相容性复合物(MHC)是一类与免疫功能密切相关的转膜蛋白。由于其在免疫系统中发挥着极其重要的作用,又与家畜疾病的抗性和易感性之间有着非常密切的关系,使之成为在抗乳房炎性状的分子育种领域倍受关注的基因之一。作者在论述了奶牛抗乳房炎分子育种研究现状的基础上,重点阐述了MHC的结构、功能、作用及其与乳房炎的关系,指出了对MHC与乳房炎关系研究的重要意义和发展前景。

三氯生对人早孕滋养细胞11β-HSD2和HLA-G表达的影响

目的探讨三氯生对人早孕滋养细胞11β-羟类固醇脱氢酶2(11β-HSD2)和人类白细胞分化抗原G(HLA-G)表达的影响。方法采用改良的Kliman法分离提纯早孕滋养细胞,分离得到的滋养细胞包括绒毛细胞滋养细胞和绒毛外细胞滋养细胞,绒毛细胞滋养细胞体外培养的过程中合体化形成合体滋养细胞,培养3 d后,以不同浓度的三氯生(0、0.0001、0.001、0.01、0.1、1μmol/L)染毒处理早孕滋养细胞24 h,Western blotting检测合体滋养细胞11β-HSD2的表达及绒毛外细胞滋养细胞HLA-G的表达,明胶酶谱实验检测绒毛外细胞滋养细胞基质金属蛋白酶2/9(MMP2/9)的酶活性。结果经三氯生染毒处理后,合体滋养细胞中11β-HSD2的表达及绒毛外细胞滋养细胞中HLA-G的表达均显著减少,绒毛外细胞滋养细胞MMP2/9的酶活性降低。结论一定浓度的三氯生可以抑制人早孕滋养细胞11β-HSD2和HLA-G的表达及MMP2/9的酶活性。提示过量暴露三氯生可能对女性生殖健康产生不利影响。

HCG11靶向miR-1297对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制

目的探究人类白细胞抗原复合体(HCG)11对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响和机制。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测46例肺癌组织样本和与其配对的癌旁组织样本中HCG11和miR-1297的表达。以肺癌细胞A549为研究对象,建立过表达HCG11的细胞株,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力,Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力,Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、P21、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)和基质金属蛋白酶(MMP)-2蛋白表达情况。双荧光素酶报告实验和Western印迹验证HCG11和miR-1297的靶向关系。结果与癌旁组织比较,肺癌组织中HCG11的表达显著下调,miR-1297的表达显著上调(均P<0.05)。过表达HCG11可显著抑制CyclinD1和MMP-2蛋白表达,促进P21和E-cadherin表达,抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭(均P<0.05)。miR-1297是HCG11的靶基因,HCG11可负性调控miR-1297的表达。过表达miR-1297可逆转HCG11对A549细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论HCG11通过靶向下调miR-1297表达可抑制肺癌细胞增殖、迁移和侵袭。

入院时CD11b平均荧光强度、血清锌、D-乳酸水平与轮状病毒肠炎患儿病情严重程度的相关性及其联合检测对患儿发生脓毒血症的预测价值

目的探讨中性粒细胞表面白细胞分化抗原11b(CD11b)平均荧光强度、血清锌、D-乳酸(D-LAC)水平与轮状病毒肠炎(RVE)患儿病情严重程度的相关性及其联合检测对患儿发生脓毒血症的预测价值。方法回顾性选取2022年1月至2023年12月驻马店市中心医院收治的168例RVE患儿纳入研究,根据是否并发脓毒血症分为发生组33例和未发生组135例。比较两组患儿的基线资料及CD11b平均荧光强度、血清锌、D-LAC水平,采用Spearman相关性分析各指标与RVE病情严重程度的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标对RVE患儿发生脓毒血症的预测价值。结果脓毒血症发生组患儿的轻、中、重病情程度占比分别为3.03%、9.09%、87.88%,未发生组轻、中、重病情程度占比分别为28.15%、60.00%、11.85%,发生组病情严重程度较未发生组严重,差异有统计学意义(P<0.05);发生组患儿入院时CD11b平均荧光强度、血清D-LAC水平分别为(91.25±5.36)AU、(8.35±2.74)mg/L,明显高于未发生组的(84.30±7.28)AU、(5.80±0.67)mg/L,血清锌水平为(51.95±6.77)μmol/L,明显低于未发生组的(70.59±8.34)μmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,入院时CD11b平均荧光强度、血清D-LAC水平与RVE患儿严重程度呈正相关(r=0.685、0.709,P<0.05),血清锌水平与RVE患儿严重程度呈负相关(r=-0.664,P<0.05);ROC曲线分析结果显示,入院时CD11b平均荧光强度、血清锌、D-LAC水平联合预测RVE患儿发生脓毒血症的AUC为0.897,明显大于上述指标单独检测的0.758、0.712、0.742。结论入院时CD11b平均荧光强度、血清锌、D-LAC水平与RVE患儿病情严重程度具有一定相关性,联合检测对RVE患儿脓毒血症的发生具有较高的预测价值,可为RVE患儿病情评估及制定预防脓毒血症的方案提供参考依据。

结直肠癌根治术对患者血清IL-11、VEGF和CEA表达的影响

目的探讨结直肠癌患者在根治性手术后血清白细胞介素(IL)-11、血管内皮生长因子(VEGF)和癌胚抗原(CEA)水平的变化。方法选取70例经手术治疗的结直肠癌患者,在术前、术后第2天、第4天和第7天采集血液标本;同时选取健康人群25例采集血液标本。记录性别、年龄及肿瘤大小、肿瘤分期(TNM)等资料,检测血清IL-11、VEGF和CEA水平。结果结直肠癌患者以男性居多,平均年龄较大,TNM分期Ⅱ、Ⅲ期居多。结直肠癌患者术前血清IL-11、VEGF和CEA水平均较对照组明显升高(P<0.05),而且3者之间明显正相关(P<0.05)。结直肠癌根治术治疗后,未经放化疗,术后7 d患者血清IL-11、VEGF和CEA水平明显下降,且仍明显正相关(P<0.05)。结论结直肠癌根治性手术可降低患者血清IL-11、VEGF和CEA水平,3者之间明显正相关,与结直肠癌的发生、发展密切相关。

脊髓胶质细胞在rhEPO预防神经病理性疼痛中的作用机制的研究

目的:探讨预防性给予重组人红细胞生成素对雄性大鼠L5脊神经切断大鼠机械、热痛觉过敏的影响及可能的机制。方法:选用Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠30只,选用L5脊神经切断神经病理性模型;随机分成3组(n=10):假手术+生理盐水组、损伤+生理盐水组、损伤+重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)(5000 U/kg)组;术前1天给药,连续给药7天。采用von Frey纤维和Hargreaves法测定各组机械缩足反射阈值(mechanicalwithdrawal threshold,MWT)和热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL);采用实时定量多聚酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)的方法检测脊髓胶质细胞标志物白细胞分化抗原11b(cluster of differentiation antigen 11b,CD11b)和胶质细胞酸性蛋白(glial fibrillaryacidic protein,GFAP)的mRNA表达水平。结果:与生理盐水预给药手术组相比,预防性腹腔注射rhEPO 5000 U/kg,能显著缓解大鼠的机械、热痛高敏行为(P<0.05,P<0.01),降低脊髓胶质细胞白细胞分化抗原和胶质细胞酸性蛋白的mRNA表达水平(P<0.05)。结论:发现预防性给予rhEPO能预防神经病理性疼痛的发生。其效应与其抑制胶质细胞活性相关。

变应性鼻炎中lncRNA-miRNA-mRNA网络构建与相关程序性细胞死亡基因的分析

目的 本研究旨在探讨lncRNA介导的ceRNA网络在变应性鼻炎(AR)病理生理过程中的作用及其在程序性细胞死亡(PCD)中的潜在调控功能。方法 纳入AR患者与正常人,取全血进行RNA测序分析,筛选差异表达的lncRNA、miRNA和mRNA用于构建基于ceRNA理论的lncRNA-miRNA-mRNA调控网络。采用基因本体(GO)和KEGG富集分析来预测ceRNA网络中mRNA的潜在生物学功能。随后,将差异表达的mRNA与PCD相关基因相互取交集,并依据交集mRNA构建新的ceRNA网络,同时对ceRNA网络中mRNA进行靶器官定位网络分析。结果 基于生物信息学分析,共提取5个lncRNA、4个miRNA和46个mRNA,构建AR中lncRNA介导的上调及下调的ceRNA网络。功能富集分析显示其在“钙信号通路”、“PI3K/AKT信号通路”及“ERK1和ERK2级联”等中显著富集。并对AC008394.1及人类组织相容性白细胞抗原复合物P5(HCP5)2个lncRNA构建PCD相关ceRNA调控网络。在对ceRNA网络中mRNA进行靶器官定位分析中发现,它们多在神经免疫相关器官中表达。结论 本研究构建了AR中新的ceRNA网络,初步探索了HCP5介导的ceRNA网络可能通过影响细胞凋亡对AR发挥作用。为AR发病机制的研究提供了新的见解和潜在的研究方案。