老年脓毒症患者血清甲状腺素和单核细胞人白细胞抗原DR表达的变化及临床意义

目的探讨老年脓毒症患者血清甲状腺素水平与单核细胞人白细胞抗原DR(HLA-DR)表达的变化,并评价其临床意义。方法125例住院的老年脓毒症非甲状腺疾病患者按照2001年国际脓毒症定义讨论公报分为非重症脓毒症组(在后面均简称脓毒症组,n=86)、重症脓毒症组(n=39),另设30例老年健康体检者为对照组;用化学发光法检测患者的血清甲状腺素水平,同时用流式细胞仪检测患者外周血单个核细胞(PBMC)表面HLA-DR分子的表达,比较各组之间的差别。结果与对照组及脓毒症组比较,重症脓毒症组的三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)水平均明显减低(P<0.05),促甲状腺素(TSH)无显著变化(P>0.05),HLA-DR表达显著减低(P<0.05);与对照组比较,脓毒症组T3、T4、FT3、FT4、TSH水平也明显减低(P<0.05),HLA-DR也显著减低(P<0.05);其中重症脓毒症死亡组(放弃治疗或死亡)T3、T4、FT3、FT4水平及HLA-DR的表达明显低于存活组(转入普通病房)(P<0.05)。结论老年脓毒症患者随脓毒症病情的加重,血清甲状腺素水平与HLA-DR表达的变化呈明显下降趋势,联合二者可较好反映脓毒症的严重程度及预后。

人白细胞抗原DR及肿瘤坏死因子α与乙型肝炎病毒慢性感染结局关系探讨

目的探讨人白细胞抗原DR(HLA-DR)及肿瘤坏死因子α(TNFα)与乙型肝炎病毒慢性感染结局的关系。方法对159例HBV慢性感染者HLA-DR基因型及血清TNFα水平的差异及相关性进行分析,其中慢性乙型肝炎(CHB)87例、乙型肝炎肝硬化(LC)38例、HBV相关肝细胞癌(HCC)34例。HLA-DR基因型检测采用PCR-SSP法,TNFα采用ELISA法检测。结果三组间HLA-DR13比较有统计学意义(P<0.05),LC组和HCC组均高于CHB组(P<0.01),LC组和HCC组间比较无统计学意义。其他HLA-DR基因型在三组间比较无统计学意义。三组间血清TNFα水平比较有统计学意义,LC组和HCC组均高于CHB组(P<0.01),LC与HCC间比较无统计学意义。携带HLA-DR13基因者与非携带者间血清TNFα水平比较无统计学意义。结论在HBV慢性感染者中,HLA-DR13基因和血清TNFα高水平可能是肝硬化和肝细胞癌的易发因素。

血必净对重症脓毒症患者外周血单核细胞人白细胞抗原DR表达的影响

目的探讨血必净注射液对重症脓毒症患者外周血单核细胞人白细胞抗原DR(HLA-DR)表达的影响及其临床意义。方法 43例重症脓毒症患者分成对照组(21例)和治疗组(22例)。对照组患者给予常规救治,治疗组患者则在常规救治的基础上早期加用血必净注射液治疗。采用流式细胞分析技术测定患者在治疗前和治疗后第5d两个时间点的外周血单核细胞HLA-DR表达率,并使用急性生理学与慢性健康状况评分系统(APACHE)Ⅱ对患者的病情进行评估。结果在治疗后第5d,两组患者外周血CD14+单核细胞HLA-DR表达率均较治疗前明显升高,差异有统计学意义(P均<0.05)。其中,治疗组患者的外周血CD14+单核细胞HLA-DR表达率在治疗后第5d时升高更为明显,与对照组比较,差异有统计学意义。此外,治疗后第5d,治疗组患者的APACHEⅡ评分较对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于重症脓毒症患者,在常规救治的基础上早期使用血必净注射液能较快促使患者外周血CD14+单核细胞HLA-DR表达率较快地回升,减轻免疫抑制,具有较强的免疫调理作用。

血小板人白细胞抗原和/或人血小板抗原基因配型预防血小板输注无效的Meta分析

血小板输注是治疗因血小板减少或功能障碍疾病所致出血的重要手段，但多次输注血小板后出现血小板输注无效（platelet transfusion refractoriness，PTR）的情况日益突出。研究显示，血液病及肿瘤患者PTR发生率达7％-34％^[1-3]，血小板减少患者多次输血后门R发生率为30％-70％^[4]。阳R不仅延误病情，加重患者负担，也造成了血小板资源的浪费。

低剂量静脉注射人免疫球蛋白治疗不明原因反复流产的效果及对可溶性人白细胞抗原G的影响

目的评估低剂量静脉注射人免疫球蛋白(IVIG)治疗不明原因反复流产(URSA)的效果及对外周血可溶性人白细胞抗原G(sHLA-G)的影响。方法将60例URSA患者分为试验组和对照组两组,每组30例。试验组在妊娠前静脉给予IVIG0.2g/kg;确定妊娠后给予同等剂量IVIG,每4周1次,至妊娠20周。对照组给予传统中药或孕激素治疗。观察两组的活产率和有效率(超过以往妊娠4周及以上为有效)。于治疗前和妊娠6～8周随机留取试验组和对照组静脉血各15份,同期健康育龄期未孕及早孕6～8周妇女的静脉血标本各20份。采用酶联免疫吸附法检测血清sHLA-G、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-10(IL-10)水平。结果试验组应用IVIG后的妊娠率为93.3%(28/30)。试验组的活产率和有效率分别为85.7%(24/28)和92.9%(26/28),明显高于对照组的56.7%(17/30)(P=0.021)和63.3%(19/30)(P=0.011)。试验组应用IVIG后有1例(3.3%)患者发生轻微恶心,减慢IVIG输入速度后反应消失。对照组和试验组患者孕前血清sHLA-G水平分别为(61.37±35.57)和(62.70±37.24)U/ml,明显低于健康育龄期妇女的(88.49±25.37)U/ml(P<0.05)。妊娠后试验组患者的血清sHLA-G和IL-10水平分别为(34.19±14.21)U/ml和(11.71±2.75)pg/ml,明显高于对照组的(23.71±12.83)U/ml(P=0.043)和(8.71±3.01)pg/ml(P=0.008)。结论孕前后应用低剂量IVIG治疗URSA安全有效,其可能是通过上调患者体内sHLA-G和IL-10水平来改善胚胎发育。

CD14^+单核细胞人白细胞DR抗原在脓毒症早期检测中的临床意义

目的探讨脓毒症早期免疫抑制状态的监测方法及与预后的关系。方法36例脓毒症患者入住重症监护室(ICU)当日,采用流式细胞仪检测其CD14+单核细胞人白细胞DR抗原(HLA DR)水平,同时进行急性生理学与慢性健康状况评分系统(APACHE)评分,通过相关分析比较两者评价脓毒症预后的临床价值。结果36例脓毒症患者入ICU时CD14+单核细胞HLA DR表达<30%者占16.67%(6/36例),APACHE评分为(24.17±4.45)分,两者之间的相关系数(r)=0.212,P=0.687;所有患者均死亡。CD14+单核细胞HLA DR表达<40%者占27.78%(10/36例),APACHE评分为(23.50±4.30)分,两者之间r=0.251,P=0.484;病死率为80%(8/10例)。结论CD14+单核细胞HLA DR表达<30%是免疫抑制的判断指标,对脓毒症预后的判断可能优于APACHE评分。脓毒症发病早期存在原发性免疫抑制,提示经典代偿性抗炎反应综合征(CARS)假说可能需要进一步补充和完善。

胰岛素强化治疗对严重创伤患者CD14^+单核细胞比率及人白细胞抗原-DR表达的影响

目的通过胰岛素强化治疗对严重创伤患者CD14+单核细胞比率及CD14+单核细胞人白细胞抗原-DR(HLA-DR)表达的影响,探讨强化治疗在严重创伤后的抗炎与免疫调节作用的效果和临床价值。方法采用随机配对分组的研究方法,对外科ICU收治的损伤严重程度评分(ISS)>20分的严重创伤患者分别给予胰岛素强化治疗(血糖目标值6~8mmol/L)和常规治疗(血糖目标值<11.1 mmol/L)。分别在入院后0、2、4、6、8 d留取外周静脉血,采用流式细胞技术检测CD14+单核细胞HLA-DR表达率。结果胰岛素强化治疗组随着强化治疗时间增加,CD14+单核细胞HLA-DR表达下降,具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与常规治疗组相比较,胰岛素强化治疗在不同时间点对CD14+单核细胞比率无明显影响(P>0.05)。结论胰岛素强化治疗在控制创伤后应激性血糖升高的同时,保护了伤后脏器功能,增强天然免疫防御反应的同时,也有诱导创伤后免疫抑制的风险。在严重创伤早期实施有选择性和适度的胰岛素强化治疗对危重患者更为可取。

流式细胞仪检测人白细胞抗原-B_(27)的影响因素

目的获得外周血淋巴细胞人白细胞抗原(HLA)-B27检测准确可靠的结果。方法用双抗体双色免疫荧光标记,流式细胞仪分析,对标本放置不同时间、溶血后洗涤前后的结果进行比较。结果标本放置不同时间可影响检测结果,洗涤可显著增加HLA-B27阳性细胞百分比和细胞表面平均荧光强度。结论制备好的标本应在6 h内检测,溶血后标本宜洗涤后测定,以提高检测的准确性。

Ⅱ类人白细胞抗原等位基因与晚期肝脾型日本血吸虫病的相关性研究

目的 探讨Ⅱ类人白细胞抗原 (HLA Ⅱ )基因多态性与晚期肝脾型日本血吸虫病的相关性。 方法 用聚合酶链反应 序列特异性引物 (PCR SSP)技术对 46例晚期肝脾型日本血吸虫病患者 (实验组 )和 43例慢性日本血吸虫病患者 (对照组 )HLA DRB1、DPA1、DQA1和DQB14个基因位点的等位基因进行分型。对两组间等位基因频率的差异进行 χ2 检验。 结果 实验组HLA DRB1 0 4、DPA1 0 10 3、DQA1 0 60 1和DQB1 0 2 0 1等位基因频率明显高于对照组 ,而HLA DQA1 0 5 0 1和DQB1 0 60 1等位基因频率明显低于对照组。 结论 HLA DRB1 0 4、DPA1 0 10 3、DQA1 0 60 1和DQB1 0 2 0 1等位基因 ,因其与晚期肝脾型日本血吸虫病呈显著的正相关 (P <0 0 5 )而可能是该病的遗传易感基因 ,而HLA DQA1 0 5 0 1和DQB1 0 60 1等位基因与对该病存在抵抗性有关。

自身免疫多腺体综合征、1型糖尿病、自身免疫甲状腺病与白细胞抗原-Ⅱ类基因研究进展

自身免疫多腺体综合征(APS)是指由自身免疫引起的以多内分泌腺功能受损为主要表现的综合征,共分3型,1型糖尿病(T1DM)并自身免疫甲状腺病(AITD)为APSⅢ型最常见的类型。白细胞抗原(HLA)是T1DM和AITD的主要遗传因素之一,现将近几年国内外关于APS、T1DM和AITD基因型相关的研究进展作一综述。

可溶性人类白细胞抗原-G1 cDNA的克隆及序列分析

目的建立表达可溶性 HL A- G1蛋白的真核表达载体 pc DNA3- s HL A- G1。方法从绒癌细胞系 Jeg- 3细胞中提取总 RNA,借助 RT- PCR技术扩增可溶性 HL A - G1的 c DNA并把其插入真核表达载体 pc DNA 3,然后经酶切和测序法鉴定。结果经酶切鉴定及测序分析 ,证实已成功构建 pc DNA3- s HL A- G1。结论本研究成功构建可溶性 HL A -

青海高原地区胎儿生长受限患者胎盘组织人类白细胞相关抗原G表达的研究

目的：探讨青海高原地区胎儿生长受限（FGR）患者人类白细胞相关抗原G（HLA-G）mRNA及蛋白的表达及临床意义。方法：收集2015年1~12月在青海大学附属医院产科分娩的20例FGR患者（FGR组）和20例正常妊娠妇女（正常妊娠组）的胎盘组织,采用实时荧光定量PCR及Western blot分析检测HLA-G mRNA及蛋白在两组胎盘组织中的表达差异。结果：FGR组胎盘组织中HLA-G mRNA表达水平（0.449±0.116）,明显低于正常妊娠组（0.963±0.226）,差异有统计学意义（P=0.000）。FGR组胎盘组织HLA-G蛋白表达灰度值（0.375±0.101）,亦明显低于正常妊娠组（0.797±0.177）,差异有统计学意义（P=0.002）。结论：青海高原地区FGR患者胎盘组织HLA-G mRNA及蛋白表达水平均明显降低,HLA-G的表达量降低在FGR的发生发展过程中可能起着重要的作用。

人白细胞DR抗原基因与动脉粥样硬化性脑梗死关系的研究

目的探讨人白细胞DR抗原(HLA DR)基因与动脉粥样硬化性脑梗死(ABI)免疫遗传的相关性。方法采用聚合酶链反应和顺序特异性引物(PCR SSP)基因分析方法,对31例ABI患者及30名无血缘关系健康人的HLA DR部分等位基因及亚基因进行检测分析。结果ABI组HLA DR B1*0301等位基因相对危险度(RR)=5.6842,明显高于其他位点,差异有显著性(P<0.05);其他HLA DR B1*各等位基因未见异常。结论HLA DR B1*0301等位基因可能为北方汉族ABI患者的致病易感基因或与其他基因相连锁而共同致病。

支气管哮喘患儿人白细胞组织相容性DR、DQ抗原表达及其与血清总免疫球蛋白E的关系

目的探讨哮喘患儿外周血单个核细胞人白细胞组织相容性DR、DQ抗原(HLA-DR、HLA-DQ)表达及其与血清总IgE(TIgE)表达的关系。方法急性发作的支气管哮喘患儿27例和正常儿童12例,采用间接免疫荧光法测定其外周血单个核细胞HLA-DR、HLA-DQ表达。Phadiatop全自动过敏原检测系统测定血清TIgE。结果哮喘患儿外周血单个核细胞HLA-DR、HLA-DQ阳性细胞表达率分别为(27.77±3.89)%和(9.49±3.71)%,正常儿童为(18.23±1.50)%和(3.79±2.04)%,二组比较均有显著性差异(Pa<0.001)。HLA-DR、HLA-DQ表达与血清TIgE水平之间密切相关[r(HLA-DR)=0.774 4,r(HLA-DQ)=0.749 4 Pa<0.001]。结论哮喘急性发作患儿外周血单个核细胞HLA-DR、HLA-DQ表达增加,并与血清TIgE表达呈正相关。提示HLA-DR、HLA-DQ基因的高表达是哮喘形成的重要因素。

人白细胞抗原B~*1502基因型和年龄对抽搐或癫痫患儿血同型半胱氨酸浓度的影响

目的探讨具有人白细胞抗原B*1502(HLA-B*15:02)不同基因型和年龄对抽搐或癫痫患儿血浆同型半胱氨酸(Hcy)浓度的影响,研究患儿血浆Hcy浓度的影响因素,以减少血浆Hcy增高所致的潜在致病风险。方法选取2015年10月至2016年6月间检测HLA-B*15:02基因型的抽搐或癫痫患儿15例,比较不同基因型患儿的血浆Hcy浓度;并将后者对应患儿年龄作线性回归分析。结果血浆Hcy平均浓度在未携带HLA-B*15:02基因患儿中为(8.38±4.23)μmol/L,在携带HLA-B*15:02基因患儿中为(13.03±0.97)μmol/L,携带者明显高于未携带者。随着患儿年龄增加,血浆Hcy浓度有增高趋势(r2=0.29,P<0.05)。结论 HLA-B*15:02基因携带者和较大年龄抽搐或癫痫患儿有发生血Hcy增高的倾向,增加患儿潜在致病风险。HLA-B*15:02基因型和年龄可预测抽搐患儿血浆Hcy浓度变化倾向。

滋肾育胎丸对抗心磷脂抗体阳性复发性流产患者可溶性人白细胞抗原G、抗子宫内膜抗体水平的影响

目的:探讨滋肾育胎丸对抗心磷脂抗体(ACA)阳性复发性流产患者可溶性人白细胞抗原G(sHLA-G)、抗子宫内膜抗体(Em Ab)水平的影响。方法:选取2017年8月至2020年10月河北省人民医院收治的ACA阳性复发性流产患者102例,按照分层抽样法分为对照组和滋肾育胎丸组,每组51例。对照组患者采用常规治疗,滋肾育胎丸组患者采用滋肾育胎丸治疗。采用酶联免疫吸附试验法检测两组患者肿瘤坏死因子相关蛋白12(CTRP12)、sHLA-G、抗缪勒管激素(AMH)、前列腺素E2(PGE2)、环氧化酶2(COX-2)、β人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)水平和抗精子抗体(As Ab)、EmAb及ACA表达水平,采用全自动生化分析仪测定孕酮(P)、黄体生成激素(LH)及睾酮(T)水平,观察两组患者的临床疗效。结果:与对照组相比,滋肾育胎丸组患者治疗后的CTRP12、sHLA-G水平明显升高,AMH水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,滋肾育胎丸组患者治疗后的P水平明显升高,T、LH水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,滋肾育胎丸组患者治疗后的PGE2、COX-2及β-HCG水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,滋肾育胎丸组患者治疗后的EmAb、ACA及As Ab阳性率明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。滋肾育胎丸组患者的治疗总有效率为94.12%(48/51),与对照组的78.43%(40/51)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:滋肾育胎丸治疗ACA阳性复发性流产患者,可有效提高患者s HLAG水平,降低EmAb阳性率,改善患者性激素水平,效果显著。

猪、牛成纤维细胞α-1，3-半乳糖基转移酶基因的敲除以及人白细胞抗原-G1基因的敲入

构建了敲除猪α-1,3-GT并敲入人白细胞抗原HLA-G1基因的打靶载体pZJ,其中以新霉素抗性基因（Neo）为正筛选基因,绿色荧光蛋白基因（GFP）为负筛选基因。采用优化的脂质体转染法将打靶载体pZJ转染于一个长势良好的胎猪成纤维细胞系中,经7天G418（600μg/ml）药物筛选,共获得30个Neo抗性细胞克隆,其中12个为非绿色荧光细胞克隆,7个扩大培养良好,提取阳性克隆细胞的基因组DNA并进行PCR检测。经PCR结果检测,打靶载体转入到胎猪成纤维细胞中,其中3个非荧光阳性单克隆细胞在细胞基因组中进行了定点整合。以同样的脂质体转染条件将pZJ转染牛胎儿成纤维细胞,经筛选并对其进行PCR检测,其中2个均为定点整合阳性。该研究为今后克隆出表达HLA-G1而不表达α-1,3-GT基因的个体猪,从而提供可以真正用于临床的异种器官打下了基础,也为猪牛之间的跨物种敲除提供了一个佐证。

人白细胞抗原-G对呼吸道合胞病毒感染的支气管上皮细胞炎症损伤的影响

目的探讨人白细胞抗原-G(HLA-G)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的人支气管上皮细胞16HBE炎症损伤的影响。方法体外培养16HBE细胞,采用RSV感染16HBE细胞。实验分为4组:对照组、感染组、转染组、感染+转染组,用qRT-PCR和Western blot检测各组16HBE细胞中HLA-G的表达水平,噻唑蓝(MTT)试验检测细胞活力,流式细胞术分析16HBE细胞凋亡情况,Western blot分析凋亡相关蛋白活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cleaved caspase)-3和cleaved caspase-9,ELISA分析白细胞介素(IL)-4、IL-10和γ干扰素(IFN-γ)等细胞因子的含量。结果与对照组相比,感染组和转染组16HBE细胞中HLA-G、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的表达、凋亡率及IL-4、IL-10和IFN-γ的含量均明显升高(P<0.05),细胞活力明显降低(P<0.05);与感染组和转染组相比,感染+转染组16HBE细胞中HLA-G、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的表达、凋亡率及IL-4、IL-10和IFN-γ的含量均明显降低(P<0.05),细胞活力明显升高(P<0.05)。结论抑制HLA-G能够减轻RSV感染的16HBE细胞炎症损伤。

人白细胞抗原-B27在诊断强直性脊柱炎中的意义

目的探讨人白细胞抗原-B27(HLA-B27)检测诊断强直性脊柱炎(AS)的意义。方法应用ELISA法,对107例AS患者、70例类风湿性关节炎(RA)患者及100例健康体检者进行HLA-B27对比检测。结果AS组HLA-B27阳性率为92.5%,RA组阳性率为7.1%,体检组阳性率为3.0%,AS组明显高于RA组和体检对照组,差异有统计学意义(χ2=214,P<0.01)。男性HLA-B27阳性率(49.7%)明显高于女性(14.8%),差异有统计学意义(χ2=30.9,P<0.01)。不同年龄组HLA-B27阳性率有明显差异,30岁以下年龄组明显高于其他年龄组。结论HLA-B27与AS具有很强的相关性,检测HLA-B27对于AS的早期诊断和鉴别具有重要意义。