RT-PCR检测人皮肤组织中趋化因子受体基因

目的 建立检测人体皮肤组织中趋化因子受体基因的RT PCR方法。方法 取 2 0例银屑病患者皮损及皮损边缘未受累部位皮肤 ,并收集 1 0例健康人皮肤 ,用 2 5g/L分散酶 (dispase)消化分离真皮、表皮 ,TRIzol提取RNA ,逆转录合成cDNA ,PCR扩增CXC型趋化因子受体CXCR2片段。结果 银屑病患者皮损部位表皮及真皮中的CXCR2表达水平 (为靶序列与 β 肌动蛋白序列吸光度之比 ,下同 )分别为 1 .2 9± 1 .1 3和 2 .4 2± 1 .2 6 ,明显高于皮损边缘部位及健康对照皮肤 (分别为 0 .5 2± 0 .4 6、0 .92± 0 .6 0和 0 .0 2± 0 .0 2、0 .0 5± 0 .0 4 ) (均P <0 .0 1 ) ,CXCR2基因表达在真皮高于表皮。结论 CXCR2可能参与银屑病的发病机制 ,建立的检测人体皮肤组织中趋化因子受体基因的RT

不同的光透明剂对在体人皮肤组织光学透明的反射光谱研究

研究了经三种不同类型的透明剂处理后的在体人皮组织在波长为400～1 000nm范围内随时间变化反射光谱特性的变化及各组于580nm处分别在0～60min时间段各组反射光谱的改变程度。实验采用USB-4000光纤光谱仪分别获取经丙三醇、葡萄糖及丙二醇处理在体人皮肤组织前后的在0,10,20,30,40,50和60min的平均漫反射光谱。实验结果表明:分别经三种不同类型透明处理后的皮肤组织的平均反射光强度都呈现出明显的减弱,但是随着各自作用于皮肤组织时间的增长,所导致的相对反射率减少量逐渐增大。经40%甘油作用于皮肤组织后在10,20,30,40,50和60min处的相对反射率的减少分别为5%,7%,9%,10%,11%和12%,经40%葡萄糖作用于皮肤组织后在10,20,30,40,50和60min处的相对反射率的减少分别为9%,13%,16%,19%,21%和22%,而40%丙二醇作用于皮肤组织后在10,20,30,40,50和60min处的相对反射率的减少分别为14%,22%,29%,32%,34%和35%。可见,这三种不同类型的透明剂都能够显著增强光在皮肤组织中的穿透能力,在0～60min的时间内各组得光透明时间进程也有所不同,在同体积分数下,光学透明效果差异显著地由高到低依次为40%丙二醇,40%葡萄糖,40%甘油。

驱虫斑鸠菊粗提物促进人皮肤组织黑色素合成的研究

目的建立组织培养人皮肤模型并探讨驱虫斑鸠菊提取物[Vernonia anthelmintica(L.)extract,AVE]在该模型下对人皮肤组织黑色素合成功能的影响及可能的作用机制。方法采用HE染色法观察不同培养条件对组织培养的人皮肤形态的影响,HE染色法和乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测不同浓度AVE对人皮肤组织毒性的影响,NaOH裂解法、L-Dopa氧化法检测AVE对人皮肤组织黑色素含量及酪氨酸酶活力的影响,免疫组化法和Western blot法观察AVE对组织培养的人皮肤S100和黑色素合成关键蛋白表达的影响。结果以William’s E培养基为基础培养的人皮肤组织结构完整,形态良好。在组织培养的人皮肤模型中,AVE剂量依赖性的促进黑色素合成和酪氨酸酶活性。AVE能够上调黑色素合成关键调控因子MITF及相关蛋白(TYR、TRP-1和TRP-2)与S100的表达。结论 AVE通过上调MITF及其调控的黑色素合成相关蛋白表达与黑色素细胞的增殖促进人皮肤组织的黑色素生成。

MC1-R在人病理性瘢痕组织中的表达及临床意义

目的:探究正常人、病理性瘢痕患者皮肤及瘢痕标本内黑色素皮质素受体1(MC1-R)含量变化差异,为病理性瘢痕的临床治疗寻找新靶点。方法:收集2018年9月-2019年10月湛江中心人民医院整形外科手术标本,包括增生性瘢痕15例,瘢痕疙瘩10例,以及来自术中弃用的正常皮肤样本20例。采用免疫组化法对三组样本MC1-R的表达和定位差异进行评估。结果:在正常皮肤中,MC1-R阳性表达多位于表皮基底层和皮肤附属器周围;在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中,MC1-R阳性表达见于表皮基底层和真皮层中成纤维细胞聚集处;正常皮肤组MC1-R阳性表达百分比为(53±10)%,高于增生性瘢痕组的(45±7)%和瘢痕疙瘩组的(32±9)%,且增生性瘢痕组MC1-R阳性表达百分比高于瘢痕疙瘩组,差异均有统计学意义(F=3.007,P<0.001)。结论:皮肤成纤维细胞内MC1-R表达水平与瘢痕形成存在一定关系,MC1-R不足的成纤维细胞可能更有助于病理性瘢痕的形成。

免疫组化方法检测猪与人皮肤通用抗原标志

目的 :探讨猪与人皮肤组织蛋白抗原性的差异。方法 :人和小猪全厚正常皮肤做冰冻切片 ,用抗人皮肤组织相关抗原 (HLA -ABC ,HLA -DR ,Vimentin ,Desmin ,Actin ,FⅧRA ,Cytokeratin)、细胞因子及其受体和胞外基质 (Hyaluronicacid ,Fibronectin ,Laminin ,TypeⅣcollagen ,Estradiol- 1 7β和Tstosterone)及I、Ⅲ、Ⅶ型胶原等抗原成分的单克隆或多克隆抗体进行免疫组化染色 ,比较猪与人皮肤组织抗原性异同。 结果 :在猪皮肤组织可检测到Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅶ型胶原和Hyaluronicacid ,Fibronectin ,Laminin ,FⅧRA ,Cytokeratin ,IL - 6 ,IL - 8,Estradiol- 1 7β,Tstosterone和ICAM - 1 ;多克隆抗体阳检率明显高于单克隆抗体 ;其中细胞外基质成分和分子量较小的细胞因子 ,以及结构或功能原始的蛋白分子在猪与人皮肤有较好的同源性 ,而进化较大的蛋白分子 (如细胞因子或激素的受体和淋巴细胞CD分子等 )则多为阴性 ,显示抗体 -抗原结合反应的特异性及其种族差异。结论 :猪与人皮肤组织抗原之间存在很大的差异 ,猪血管内皮细胞表达人ICAM - 1 ,提示二者粘附分子可能存在物种间的交叉 ,可能与异种皮肤移植难以存活有关。本研究为异种脱细胞真皮基质的临床应用提供了有用的资料。

扁平苔藓中cyclinD1和p16的表达及意义

扁平苔藓（lichen planus，LP）是一种常见的慢性亚急性炎性疾病。研究表明，细胞凋亡异常在口腔扁平苔藓的发生和发展中具有重要作用。但在皮肤扁平苔藓与凋亡的相关性研究尚少。通过采用免疫组织化学通用型二步法（PV）法对30例扁平苔藓患者皮损组织和10名健康人皮肤组织中cyclinD1和p16的表达进行检测．以探讨凋亡相关蛋白cy—clinD1和p16在扁平苔藓中的表达和意义。

TGF-β亚型在创伤愈合及瘢痕形成中的作用

创伤愈合有两种形式,完全性修复（即再生）和瘢痕性愈合.转化生长因子β （transforming growth factor β,TGF-β）是迄今为止与创伤愈合关系最为密切的生长因子,TGF-β至少有6个亚型,各亚型之间有64％～～82％的同源性[1],在成人皮肤组织中,TGF-β1、β2、β3三种异构体均有阳性表达.TGF-β1、β2、β3参与创伤愈合的诸多步骤：炎症反应、促血管新生、成纤维细胞增殖、胶原合成与分解以及新的ECM重建.以往研究大都聚焦于TGF-β亚型对创伤愈合的促进作用,但TGF-β亚型在创伤愈合和瘢痕形成中的具体作用机制尚未明晰,且近年有关TGF-β亚型对创伤愈合和瘢痕形成有负性作用的报道逐渐增多.本文的目的在于系统梳理TGF-β亚型对创伤愈合和瘢痕形成的正反两方面作用,找出存在的疑点与矛盾,展望实现皮肤创伤再生修复的可能研究途径.

巧用棉签固定指端静脉穿刺

老年病人皮肤组织松弛,大多数患者都有不同程度的血管硬化、管腔狭窄、弹性差、脆性增加,长期静脉穿刺更容易造成浅静脉血管不同程度的损害。本科采用远心端至近心端静脉穿刺法即指端静脉穿刺,而指端静脉穿刺后由于血管细小如果患者未能很好摆放手势,容易造成针头脱出血管外,

Spa-1和Ki-67在乳房外Paget病肿瘤组织中的表达

目的探讨Spa-1在乳房外Paget病发生和转移中可能的作用。方法取17例原位乳房外Paget病和12例侵袭性乳房外Paget病患者皮损及9例正常人皮肤组织，用免疫组化分别检测Spa-1和Ki-67的表达。结果Spa一1在胞质中显色，Ki-67在胞核中显色。Spa-1和Ki-67仅少量表达于正常人皮肤基底层，在乳房外Paget病肿瘤组织中的表达明显高于正常人皮肤（P〈0．01）。Spa-1在侵袭性乳房外Paget病肿瘤组织中表达明显高于原位乳房外Paget病（P〈0．01）。乳房外Paget病肿瘤组织中Spa-1的表达与Ki-67的表达呈正相关。结论Spa-1在乳房外Paget病的发生发展中可能起作用。

皮肤鳞状细胞癌中上皮性钙黏着蛋白表达与微血管密度的相关性

为探讨黏附分子与皮肤鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma）临床病理之间的关系，我们检测了56例皮肤鳞状细胞癌和10例正常人皮肤组织中上皮性钙黏着蛋白（E—cadherin，E—cad）和CD34的表达，现将结果报道如下。

北京市466名办公室工作人员和538名学生维生素D营养状况

维生素D来源于两方面，一是适宜的紫外线照射能将人皮肤组织中的7-脱氢胆固醇转化成为维生素D；二是膳食中供应含有丰富的维生素D、钙、磷和蛋白质等营养物质。维生素D是维持人体骨骼健康的重要营养素，主要的生理功能是维持血钙和磷的正常浓度，以及神经肌肉功能正常和骨骼的健全。

白介素20 mRNA在寻常性银屑病患者皮损中的表达

有研究表明，白介素20（IL-20）是介导银屑病发生的重要细胞因子之一。为探讨IL-20mRNA与寻常性银屑病发病之间的关系，我们采用原位杂交技术检测寻常性银屑病患者皮损和正常人皮肤组织中IL-20mRNA表达情况。