目的探讨健康人皮肤间充质干细胞(S-MSCs)对Ha Ca T细胞增殖的作用,为研究S-MSCs在病理状态下的作用提供理论依据。方法健康人皮肤20份,均取自我院整形和泌尿外科手术切除的多余新鲜皮肤组织。在体外无菌条件下进行真表皮分离、培养真皮...目的探讨健康人皮肤间充质干细胞(S-MSCs)对Ha Ca T细胞增殖的作用,为研究S-MSCs在病理状态下的作用提供理论依据。方法健康人皮肤20份,均取自我院整形和泌尿外科手术切除的多余新鲜皮肤组织。在体外无菌条件下进行真表皮分离、培养真皮MSCs,流式细胞术进行细胞鉴定,多向诱导分化及分化细胞的鉴定,将培养至第5代的S-MSCs与Ha Ca T细胞共培养,并与自然增殖组进行对照,采用实时动态细胞分析技术法进行Ha Ca T细胞增殖检测,培养72 h后用细胞计数法检测Ha Ca T细胞的数量。结果倒置相差显微镜下,健康人S-MSCs的细胞形态呈细长梭形,细胞表面抗原CD29、CD44、CD73、CD90、CD105呈高表达,而CD34、CD45及人类白细胞抗原(HLA)-DR表达阴性,并且可诱导分化为脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞。Ha Ca T细胞自然增殖组细胞数为(2.74±0.36)×105,与健康人S-MSCs共培养组细胞数为(2.24±0.28)×105,差异有统计学意义(P<0.001)。结论健康人皮肤来源的MSCs可在体外抑制Ha Ca T细胞的增殖。展开更多
目的观察土茯苓提取物落新妇苷对永生化人角质形成细胞Ha Ca T增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法收集对数生长期Ha Ca T细胞,观察组分别加入不同浓度落新妇苷、空白对照组加DMEM培养液,培养24 h后,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,流式...目的观察土茯苓提取物落新妇苷对永生化人角质形成细胞Ha Ca T增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法收集对数生长期Ha Ca T细胞,观察组分别加入不同浓度落新妇苷、空白对照组加DMEM培养液,培养24 h后,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞早期凋亡率;收集对数生长期Ha Ca T细胞,观察组分别加入不同浓度落新妇苷+20 ng/m L INF-γ、模型对照组加20 ng/m L INF-γ、空白对照组加DMEM培养液培养24 h,采用实时荧光定量PCR法检测细胞中的核转录因子κB(NF-κB)p65、骨桥蛋白(OPN)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA。结果落新妇苷在25、50、100、200、400μg/m L时,Ha Ca T细胞增殖抑制率分别为3.06%、26.53%、40.82%、60.20%及61.22%。落新妇苷在50、100、200μg/m L时,观察组Ha Ca T细胞早期凋亡率分别为3.26%、8.24%和15.38%;与空白对照组早期凋亡率(1.33%)比较,P均<0.05。与空白对照组比较,模型对照组NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达增加(P均<0.01);与模型对照组比较,观察组随落新妇苷浓度增加,NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达逐渐降低(P均<0.05)。结论土茯苓提取物落新妇苷能抑制Ha Ca T细胞增殖、诱导细胞凋亡,其机制可能与制抑细胞NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达有关。展开更多
文摘目的探讨健康人皮肤间充质干细胞(S-MSCs)对Ha Ca T细胞增殖的作用,为研究S-MSCs在病理状态下的作用提供理论依据。方法健康人皮肤20份,均取自我院整形和泌尿外科手术切除的多余新鲜皮肤组织。在体外无菌条件下进行真表皮分离、培养真皮MSCs,流式细胞术进行细胞鉴定,多向诱导分化及分化细胞的鉴定,将培养至第5代的S-MSCs与Ha Ca T细胞共培养,并与自然增殖组进行对照,采用实时动态细胞分析技术法进行Ha Ca T细胞增殖检测,培养72 h后用细胞计数法检测Ha Ca T细胞的数量。结果倒置相差显微镜下,健康人S-MSCs的细胞形态呈细长梭形,细胞表面抗原CD29、CD44、CD73、CD90、CD105呈高表达,而CD34、CD45及人类白细胞抗原(HLA)-DR表达阴性,并且可诱导分化为脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞。Ha Ca T细胞自然增殖组细胞数为(2.74±0.36)×105,与健康人S-MSCs共培养组细胞数为(2.24±0.28)×105,差异有统计学意义(P<0.001)。结论健康人皮肤来源的MSCs可在体外抑制Ha Ca T细胞的增殖。
文摘目的观察土茯苓提取物落新妇苷对永生化人角质形成细胞Ha Ca T增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法收集对数生长期Ha Ca T细胞,观察组分别加入不同浓度落新妇苷、空白对照组加DMEM培养液,培养24 h后,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞早期凋亡率;收集对数生长期Ha Ca T细胞,观察组分别加入不同浓度落新妇苷+20 ng/m L INF-γ、模型对照组加20 ng/m L INF-γ、空白对照组加DMEM培养液培养24 h,采用实时荧光定量PCR法检测细胞中的核转录因子κB(NF-κB)p65、骨桥蛋白(OPN)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA。结果落新妇苷在25、50、100、200、400μg/m L时,Ha Ca T细胞增殖抑制率分别为3.06%、26.53%、40.82%、60.20%及61.22%。落新妇苷在50、100、200μg/m L时,观察组Ha Ca T细胞早期凋亡率分别为3.26%、8.24%和15.38%;与空白对照组早期凋亡率(1.33%)比较,P均<0.05。与空白对照组比较,模型对照组NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达增加(P均<0.01);与模型对照组比较,观察组随落新妇苷浓度增加,NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达逐渐降低(P均<0.05)。结论土茯苓提取物落新妇苷能抑制Ha Ca T细胞增殖、诱导细胞凋亡,其机制可能与制抑细胞NF-κB p65、OPN、VEGF mRNA表达有关。
