人神经元钾离子通道α亚基基因的分子克隆

为克隆新的钾离子通道基因并研究其与疾病的关系，将大鼠的神经元钾离子通道α亚基编码区序列在人的ＥＳＴ数据库进行ＢＬＡＳＴ分析，得到一个与其有８７％的一致性的ＥＳＴ，通过重叠群的构建和５’－ＲＡＣＥ反应，克隆了人神经元钾离子通道α亚基（ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ ｎｅｕｒｏｎａｌ ｐｏｔａｓｓｉｕｍ ｃｈａｎｎｅｌ ａｌｐｈａｓｕｂｕｎｉｔ，ＨＮＫＡ）基因，该基因仅在成人脑和胎脑中有表达．经与大规模测序数据库比较后将该基因定位在８ｑ２３．１～ｑ２３．２位点．选择定位于此区域的痉挛性截瘫为ＨＮＫＡ基因的候选疾病，利用ＰＣＲ产物直接测序的方法，对１４个痉挛性截瘫家系进行了突变检测分析，但未检测到突变．

骨骼肌二氢吡啶敏感的L型钙离子通道α1亚基基因多态性与甲状腺功能亢进性低钾周期性瘫痪的相关性

目的研究骨骼肌二氢吡啶敏感的L型钙离子通道α1亚基(CACNA1S)基因11外显子1551位点T/C和1564位点C/T多态性与中国西南地区汉族男性甲状腺功能亢进(甲亢)性低钾周期性瘫痪(THPP)的相关性。方法选取中国西南地区男性THPP患者90例(THPP组),甲亢不伴周期性瘫痪者98例(GD组),正常对照95名(CN组),采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法,对CACNA1S基因第11外显子区1551T/C多态性位点和1564C/T多态性位点进行基因分型。结果①在CACNA1S基因1551位点,THPP组TT、TC、CC基因型频率分别为56.7%、34.4%、8.9%,GD组分别为71.4%、25.5%、3.1%,CN组分别为74.7%、23.2%、2.1%,THPP组TC+CC基因型和C等位基因频率显著高于GD组和CN组(P值均<0.05),GD组与CN组的差异无统计学意义(P值均>0.05);②在CACNA1S基因1564位点, THPP组CC、CT、TT基因型频率分别为70.0%、26.7%、3.3%,GD组分别为84.7%、14.3%、1.0%,CN组分别为86.3%、12.6%、1.1%,THPP组CT+TT基因型和T等位基因频率显著高于GD组和CN组(P值均<0.05),GD组与CN组的差异无统计学意义(P值均>0.05)。结论CACNA1S基因11外显子1551T/C多态性位点和1564C/T多态性位点可能与中国西南地区汉族男性THPP的发生有关。

Kv7(KCNQ)钾离子通道对中枢单胺能神经传递的调控

KCNQ基因编码5种Kv7钾离子通道亚型(Kv7.1-Kv7.5),其中4种(Kv7.2-Kv7.5)表达于中枢神经系统内。神经元Kv7通道参与突触前后神经递质的调节,激活Kv7通道能够降低神经元兴奋性,减少单胺类神经递质释放,Kv7通道开放剂为单胺类神经元过度兴奋所致疾病(如精神分裂、焦虑、药物滥用等)提供了新的治疗方案,该文将针对Kv7通道在单胺类神经系统内的表达、功能及Kv7通道开放剂在治疗神经元过度兴奋所致疾病中的作用进行总结。

钾通道的分子学多样性、疾病基因（2）

钾离子通道在维持细胞内外钾离子平衡状态、细胞容积和细胞信号转导等方面起到重要作用,通过膜电位调控着神经元和肌肉兴奋性、影响神经递质、心脏功能和激素产生.与其他离子通道比较来说钾通道种类繁多,结构更多样性,每一种钾通道又有许多不同亚型.对其研究大多数集中在可兴奋性细胞的钾通道,对非兴奋性细胞的钾通道研究不够深入,涉及细胞增殖、活化和凋亡的信号转导等.

CACNA1S基因与低钾周期性麻痹

CACNA1S基因是L-型钙离子通道α1亚单位的编码基因,CACNA1S的基因突变会引起人低钾周期性麻痹及猪高温综合症,有关研究推测该基因是影响猪肉质性状的候选基因。笔者对CACNA1S基因的生物学特性、结构组成和CACNA1S基因突变引发的遗传病及CACNA1S基因的研究进展作了综合性阐述。

膜通道的分子学多样性、疾病基因（4）

膜通道有离子通道和水通道,前者又包括钙通道(电压依赖性、对钙离子选择性通过的细胞膜糖蛋白)、钠通道、钾通道、氯通道等.其中钙通道又分为L、T、N、P、Q和R型前两者存在于心血管系统和中枢神经系统,后四者存在于神经元组织中.美国的两位科学家因为在离子通道和水通道结构方面的杰出成就获得了2003年诺贝尔化学奖,关于膜通道的研究和发现对于我们在分子水平理解离子和水的转动机制至关重要,进而对于理解基本生物过程和相关疾病的分子基础、以及将来可能的治疗方法的结构基础都有重要意义.

家族性低血钾型周期性麻痹一家系报告及相关文献复习

原发性低钾型周期性麻痹（hypokalaemic periodic paralysis，hypoKPP）是常染色体显性遗传性肌肉病，分为家族性和散发性，临床特征为发作性肌无力伴随血钾浓度降低，肌无力常涉及四肢，严重患者可死于呼吸肌麻痹或血钾浓度降低所致的心律失常。本文报道一低钾型周期性麻痹家系，并复习相关文献，将其病因、发病机制、临床特点及治疗总结如下。

lncRNA KCNQ1OT1调控miR-384/CACNA1C轴对心肌细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨长链非编码RNA钾电压门控通道亚家族Q成员1反向转录物1(lncRNA KCNQ1OT1)调控miR-384/L型钙离子通道α1C亚基基因(CACNA1C)轴对心肌细胞增殖、凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot分别检测正常培养的大鼠心肌H9c2、CP-R073细胞及缺氧/复氧(H/R)诱导的H9c2、CP-R073细胞中的KCNQ1OT1、miR-384、CACNA1C蛋白表达。将H9c2细胞分为Ct组、Model组、si-NC组、si-KCNQ1OT1组、mimic NC组、miR-384 mimic组、si-KCNQ1OT1+inhibitor NC组、si-KCNQ1OT1+miR-384 inhibitor组。除Ct组外,其他组H9c2细胞均需转染对应物质后构建H/R损伤模型。qRT-PCR检测细胞中KCNQ1OT1、miR-384表达;CCK-8法、EdU染色检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测细胞中肌红蛋白(Mb)、肌钙蛋白-Ⅰ(cTnⅠ)水平;Western blot检测CACNA1C、增殖细胞核抗原(PCNA)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证KCNQ1OT1与miR-384、miR-384与CACNA1C的关系。结果H/R诱导的H9c2、CP-R073细胞中KCNQ1OT1、CACNA1C蛋白表达升高,miR-384表达降低,且H/R诱导的H9c2细胞中KCNQ1OT1、CACNA1C蛋白表达最高,miR-384表达最低,因此,后续选择H9c2细胞为研究对象。与Ct组比较,Model组细胞中KCNQ1OT1、细胞凋亡率、Mb、cTnⅠ水平、CACNA1C、Caspase-3、Bax蛋白表达升高,miR-384表达、D 450值、EdU阳性率、PCNA蛋白表达降低(P<0.05);沉默KCNQ1OT1或过表达miR-384可促进H/R诱导的H9c2细胞增殖,抑制细胞凋亡;miR-384 inhibitor减弱了沉默KCNQ1OT1对H/R诱导的H9c2细胞增殖的促进作用,以及对细胞凋亡的抑制作用;KCNQ1OT1靶向调控miR-384/CACNA1C轴。结论沉默KCNQ1OT1可能通过上调miR-384来抑制CACNA1C表达,进而促进H/R诱导的H9c2细胞增殖,抑制细胞凋亡。

KCNJ11基因V59A和V59M突变导致的新生儿糖尿病临床特点

选取经基因检测分别为KCNJ11V59A和V59M突变的2例新生儿糖尿病患儿，回顾分析其临床资料。结果显示，V59A突变的患儿于3月龄时以痉挛发作、高血糖起病．初次转换格列本脲治疗不成功，遂长期予胰岛素治疗。随访中患儿出现肌无力、生长发育迟缓的症状，2岁时再次尝试格列本脲治疗，所需药物剂量大，血糖控制一般。V59M突变的患儿于2月龄时以腹泻、高血糖、酮症起病，转换为口服药物格列本脲治疗，血糖控制稳定，所需药物剂量小。提示KCNJ11基因V59M突变在临床表型上轻于V59A突变．格列本脲的治疗效果也优于V59A突变。