去甲斑蝥素促进神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株凋亡的作用机制分析

目的:探讨去甲斑蝥素对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株凋亡的影响,并初步分析其可能的作用机制。方法:将SK-N-SH细胞分为空白对照组及去甲斑蝥素50、100、500μg/L组。观察各组SK-N-SH细胞形态学变化,采用CCK-8法检测各组细胞增殖,流式细胞仪检测各组细胞凋亡,试剂盒检测氧化损伤指标水平,RT-PCR检测凋亡相关基因表达,Western Blot检测凋亡及PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达。结果:与空白对照组比较,干预48 h后,去甲斑蝥素各给药组细胞形态皱缩,细胞贴壁能力较弱,细胞数量较少,细胞内颗粒较多;除去甲斑蝥素低浓度组细胞活力在16 h差异无统计学意义(P>0.05)外,作用16、24、48 h去甲斑蝥素各浓度组SK-N-SH细胞活力显著降低(P<0.05);作用24 h,去甲斑蝥素各浓度组细胞早期凋亡率及ROS、MDA显著升高,Bcl-2 mRNA及蛋白表达显著降低,Bax、Caspase-3、Caspase-9 mRNA及蛋白表达显著升高,p-PI3Kp85、p-Akt、p-mTOR、p-4E-BP1蛋白表达显著降低(P<0.05),去甲斑蝥素的作用呈浓度依赖性。结论:去甲斑蝥素可促进神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株凋亡,且其作用呈浓度依赖性,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

多参数MRI鉴别鼻腔鼻窦嗅神经母细胞瘤与弥漫大B细胞淋巴瘤的价值

目的探讨MRI多参数在鉴别嗅神经母细胞瘤(olfactory neuroblastoma,ONB)和鼻腔鼻窦弥漫大B细胞淋巴瘤(diffusion large B cell lymphoma,DLBCL)中的价值。方法34例鼻腔鼻窦ONB和29例DLBCL患者治疗前行MRI检查。MRI评估指标包括常规征像和半定量参数。连续变量比较采用独立样本t检验或秩和检验,分类变量比较采用χ^(2)检验。二元Logistic回归用于识别最有诊断能力的MRI指标。结果ONB T2WI呈等稍高信号,累及嗅裂,易形成颅内肿块(P=0.004);DLBCL T2WI呈等略低信号(P<0.001),常累及上颌窦、眼眶(P<0.001,P=0.024)。ONB的鼻甲外移、边缘分叶征较DLBCL多见(P=0.001,P=0.004)。ONB的ADC_(ave)值更高(P<0.001),CI_(max)、WR更大(P<0.001、P=0.011),TTP小(P=0.003),TIC曲线流出型更多(P=0.022)。Logistic回归显示部位(累及嗅裂或上颌窦)、T2WI信号、ADC0.82值及以TTP52是鉴别ONB和DLBCL的独立影响因素。结论MRI的多参数联合有助于鉴别鼻腔鼻窦ONB和DLBCL。

GD2抗体达妥昔单抗β治疗神经母细胞瘤护理专家共识

基于国内外临床研究报告以及本研究参与人员临床实践经验,通过文献分析、专家函询及专家研讨对神经节苷脂-2(GD2)抗体达妥昔单抗β治疗神经母细胞瘤的相关内容进行深入研究,最终形成包括准备以及要求、药品配制、药品输注、输注期间护理以及不良反应观察与护理等内容的GD2抗体达妥昔单抗β治疗神经母细胞瘤护理专家共识。

新生儿肾上腺囊性神经母细胞瘤临床及CT表现

目的观察新生儿肾上腺囊性神经母细胞瘤(CNB)的临床及CT表现。方法回顾性分析经手术病理确诊的8例新生儿肾上腺CNB,记录其临床资料,观察术前全腹CT平扫及增强表现。结果8例中,6例(6/8,75.00%)于胎儿期、2例(2/8,25.00%)于新生儿期经超声检出;均见单侧肾上腺单发病灶,位于左、右侧肾上腺各4个(4/8,50.00%),最大径2.3~6.1 cm、中位最大径4.5 cm。CT显示8个(8/8,100%)病灶均表现为局限性厚壁囊性肿块,其中3个(3/8,37.50%)囊内密度均匀、3个(3/8,37.50%)囊内有分隔、1个(1/8,12.50%)囊内见少许漂浮物、1个(1/8,12.50%)囊内同时存在分隔及漂浮物,均未见钙化;病灶均未见跨越中线、均无血管包绕,7个(7/8,87.50%)边界清晰、1个(1/8,12.50%)边界欠清,均轻度推压周围结构;增强后囊壁及分隔轻度强化。2例累及肝脏。结论新生儿肾上腺CNB多于胎儿期检出,CT主要表现为厚壁囊性肿块,边界清晰,内可有分隔及漂浮物,增强后囊壁及分隔轻度强化;可出现肝脏转移。

miR-602调控神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞生长、侵袭的功能研究

目的探讨微小RNA-602(miR-602)对神经母细胞瘤(NB)SH-SY5Y细胞生长、侵袭的影响及其可能的机制。方法实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测人NB细胞系SH-SY5Y和胚肾细胞系HEK-293中miR-602的表达水平。四甲基噻唑蓝(MTT)法检测miR-602对SH-SY5Y细胞生长的影响。Transwell侵袭实验检测miR-602对SH-SY5Y细胞侵袭的影响。筛选miR-602可能的靶基因,并通过荧光素酶报告基因系统结合qPCR技术验证miR-602对靶基因的调控作用。结果将健康者胚肾HEK-293细胞的表达量标化为1,人NB细胞系SH-SY5Y中miR-602的相对表达水平为3.83±0.85,差异有统计学意义(P<0.01);MTT实验结果显示,miR-602 mimics组细胞相对活性(1.20±0.05)高于NC mimics组(1.00±0.01),而miR-602 inhibitor组细胞相对活性为0.76±0.04低于NC inhibitor组(1.00±0.01),差异均有统计学意义(P<0.05);Transwell侵袭实验结果显示,miR-602 mimics组穿膜细胞数[(193.33±8.02)个]高于NC mimics组[(97.33±20.03)个],而miR-602 inhibitor组穿膜细胞数[(62.01±11.79)个]低于NC inhibitor组[(132.33±11.24)个],差异均有统计学意义(P<0.05);qPCR结果显示,在miR-602 mimics组重组人Sprouty相关EVH1域含蛋白1(SPRED1)mRNA表达水平较对照NC mimics组相对变化倍数为0.56±0.08,miR-602 inhibitor组SPRED1 mRNA表达水平较对照NC inhibitor组相对变化倍数为4.16±0.91,差异有统计学意义(P<0.01)。结论miR-602在SH-SY5Y细胞中高表达,可能通过调控SPRED1促进SH-SY5Y细胞生长和侵袭。

21例高危神经母细胞瘤患儿输注那西妥单抗的观察和护理

总结21例高危神经母细胞瘤患儿222次输注那西妥单抗的观察和护理经验。输注前建立多学科团队、做好患儿和照顾者准备、建立静脉通路、备好床边急救物品和药品、精简预防性用药、实施个体化禁食禁饮方案,输注时优化镇痛策略、密切监测评估病情,输液后加强并发症管理和对严重不良事件的快速反应。经严密观察和护理,21例患儿顺利完成222次那西妥单抗输注。

小儿神经母细胞瘤的影像学分类

小儿神经母细胞瘤好发于5岁以下儿童,在小儿常见的颅外实质性恶性肿瘤中居第3位,发病率仅次于白血病与中枢神经系统恶性肿瘤。神经母细胞瘤起源于肾上腺髓质的前身神经嵴和/或自颈至胸、腹与盆部脊柱旁交感神经链与副神经节,如Zuckerkandl体,以发生于肾上腺神经嵴者更常见。

彩色多普勒血流成像对小儿神经母细胞瘤的诊断价值

目的探讨彩色多普勒血流成像(CDFI)对小儿神经母细胞瘤(NB)的诊断价值。方法选取96例NB患儿作为NB组,91例非NB患儿作为对照组,比较两组患儿血流动力学参数(搏动指数、阻力指数、平均血流速度),以病理检查结果作为诊断金标准,分析CDFI对NB疾病和分期的诊断效能。结果CDFI诊断NB的灵敏度为91.67%(88/96),特异度为92.31%(84/91),准确度为91.98%(172/187),其诊断NB的结果与病理检查结果的一致性较好(Kappa=0.840)。NB组患儿搏动指数、阻力指数和平均血流速度均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。CDFI诊断NB分期的准确度为90.91%(80/88),其诊断NB分期的结果与病理结果的一致性较好(Kappa=0.864)。结论CDFI诊断NB的准确度、灵敏度和特异度均较高,可有效诊断NB分期,NB患者搏动指数、阻力指数和平均血流速度均较高,可为临床诊断NB提供参考依据,具有较高的诊断价值。

手术联合化疗对神经母细胞瘤患儿免疫功能的影响

目的目的探讨手术联合化疗对神经母细胞瘤患儿免疫功能的影响。方法方法将98例神经母细胞瘤患儿根据治疗方式的不同分为对照组(n=48)和观察组(n=50)。对照组患儿采取手术治疗,观察组患儿采取化疗联合手术治疗。比较两组患儿血清肿瘤标志物水平、免疫球蛋白水平、细胞免疫指标以及不良反应发生率。结果结果治疗后,两组患儿基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶1(MMP1)、血管内皮生长因子(VEGF)水平均较治疗前降低,且观察组患儿MMP2、MMP1、VEGF水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。治疗后,两组患儿免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)水平均较治疗前降低,但观察组患儿IgA、IgG、IgM水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。治疗后,两组患儿总T淋巴细胞(TTL)水平均较治疗前降低,辅助性T淋巴细胞(THL)、抑制性T淋巴细胞(TSL)、自然杀伤(NK)细胞水平均较治疗前升高,观察组患儿TTL、THL、TSL、NK细胞水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。两组患儿各不良反应发生率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。结论结论手术联合化疗治疗小儿神经母细胞瘤,可改善患儿免疫功能,抑制肿瘤浸润及转移。

一种神经母细胞瘤的PET/CT多模态图像分割方法

目前关于PET/CT图像分割的方法缺少对图像全局上下文信息提取的考虑并且对提取到的特征信息进行融合的方式有待优化.针对上述问题,本文提出了并行提取和特征综合网络(Parallel Extraction and Feature Synthesis Network,PFNet).该网络首先利用卷积神经网络(convolutional neural network,CNN)和Transformer分别设计了两个支路分别从PET/CT图像中提取局部特征和全局上下文信息.其次,为了融合不同的特征信息,本文设计了一个特征综合模块,将两个分支提取的不同信息送入特征综合模块进行融合.在该模块中,设计了多策略融合单元,与此同时该模块利用通道注意力单元和依赖关系学习单元进一步学习通道特征信息和特征图自身依赖关系,以便进一步进行特征融合.此外本文引入了LogCoshDiceLoss作为损失函数,其利用函数Log-Cosh的平滑性可以提高分割性能.最后,在神经母细胞瘤数据集和HECKTOR 2021数据集上的实验结果表明本文提出的网络相比其它方法具有更好的分割性能,获得了较好的分割效果.

视网膜母细胞瘤完全缓解后继发神经节神经母细胞瘤1例

1 病例资料患儿男性,3岁,2020年12月因“发现右眼呈猫眼样反光”,就诊于我院,查眼底示“右眼视网膜母细胞瘤,IRC分期:E期”。2021年1月行右眼球摘除,术后病理示视网膜母细胞瘤,肿瘤侵犯视盘及筛板,穿透筛板达筛板后视神经内生长(距筛板后界约2.0mm),视神经切除断端未见明显肿瘤组织侵犯。免疫组化:NSE(+),Syn(+),CD56(+),Ki-67 index 70%。

高危神经母细胞瘤免疫治疗的研究进展

神经母细胞瘤(Neuroblastoma, NB)是儿童最常见的颅外实体肿瘤,因其恶性程度高、易发生早期转移及骨髓转移,严重威胁儿童生命健康。除了传统的手术、化疗、放疗、自体干细胞移植以及13-顺式维甲酸的治疗外,双唾液酸神经节苷脂(GD2)单抗治疗也被纳入国内外NB多模式治疗共识中。尽管如此,高危NB患儿5年生存率仍然低于50%。因此,越来越多的针对NB细胞及其免疫微环境的新免疫疗法正在积极研究中,有望给NB患儿的治疗提供新的思路和希望。本文对目前临床采用的抗GD2疗法和研究中的免疫治疗进行综述。

超声微血管成像在引导儿童腹膜后神经母细胞瘤穿刺活检中的应用价值

目的:探讨超微血管成像(superb microvascular imaging,SMI)对提高儿童腹膜后神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)肿瘤微血管显示和超声引导下肿瘤穿刺活检准确度的价值。方法:回顾并分析2015年3月—2021年7月上海交通大学医学院附属新华医院收治的24例难以手术完全切除的腹膜后NB患儿的临床资料、肿瘤超声影像和超声引导穿刺活检的资料。采用Image J软件测得取样区肿瘤内血流面积占比(blood flow area ratio,BFAR),以评估肿瘤微血管的丰富程度;以穿刺病理学诊断为标准统计分析SMI引导穿刺活检的取样成功率;应用儿童神经母细胞瘤诊疗专家共识2015版中的肿瘤疗效评估标准、肿瘤标志物测定以及化疗后肿瘤根治术后病理学检查评价穿刺活检病理学诊断的准确度。结果:SMI模式的肿瘤微血管BFAR显著高于彩色多普勒血流成像和彩色多普勒能量图模式(分别为14.74%、3.17%及5.88%,P<0.001);SMI引导24例肿瘤穿刺活检均获得NB病理学诊断,83.3%的肿瘤获得NB亚型分类,MYCN基因扩增分析成功率100%。20例获得明确肿瘤亚型分型的患者中18例患儿的化疗效果为部分缓解,2例为疾病稳定;而未获得明确病理学分型的4例中2例化疗评估结果为疾病稳定,2例为部分缓解。结论:SMI可明显提高肿瘤微血管的检出率,SMI引导穿刺活检对提高肿瘤病理学诊断尤其是肿瘤病理学亚型分型和分子分型准确度具有重要意义。

基于T_(1)WI增强不同机器学习模型鉴别胶质母细胞瘤与原发性中枢神经系统淋巴瘤

目的:基于T_(1)WI增强图像采用六种不同机器学习分类算法构建预测胶质母细胞瘤(GBM)与原发性中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)的模型,比较不同机器学习模型的诊断效能。方法:回顾性分析中南大学湘雅医院经病理证实的GBM 57例和PCNSL 49例患者的临床及影像资料。应用ITK-SNAP软件在术前T1WI增强图像手动逐层勾画瘤体感兴趣区(ROI)。基于慧医汇影放射组学Radcloud平台进行ROI影像组学特征提取并采用方差阈值法(阈值>0.9)、单变量特征选择法(P<0.01)和最小绝对收缩选择算子(LASSO)进行特征降维,筛选出的特征采用支持向量机、极致梯度提升、逻辑回归(LR)、线性判别分析(LDA)、随机森林、K近邻等6种分类器构建影像组学预测模型。使用5折交叉验证方法进行验证,采用受试者工作特征曲线下面积(AUC)评估6种预测模型的诊断效能,模型之间AUC比较采用DeLong检验。结果:共提取1 688个影像组学特征,经过特征降维及筛选后保留显著特征(5折交叉验证、每组分别25、10、31、17、14个特征)构建预测模型,6种模型中LDA、LR模型诊断效能最佳,在5折交叉验证集中LDA、LR模型平均AUC分别为0.965、0.958,准确度为87.8%、89.6%,敏感度为86.0%、86.0%,特异度为89.4%、93.0%。6种模型AUC差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:基于T_(1)WI增强图像影像组学特征构建机器学习模型可用于预测GBM与PCNSL且准确率较高,其中LDA、LR模型诊断效能最佳。

富含半胱氨酸和甘氨酸蛋白2在神经母细胞瘤恶性进展中的功能和机制

目的:探究富含半胱氨酸和甘氨酸蛋白2(cysteine and glycine-rich protein 2,CSRP2)在神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)恶性进展中的功能和作用机制。方法:利用R2数据库分析NB临床样本中CSRP2基因的mRNA水平与NB患儿临床预后的相关性;在NB细胞系SK-N-BE(2)和SH-SY5Y中利用靶向小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰CSRP2的表达或利用质粒转染过表达CSRP2;通过结晶紫染色和实时无标记动态细胞分析技术观察NB细胞的增殖情况;采用克隆形成方法观察NB细胞长时间的克隆形成能力;利用免疫荧光实验检测细胞增殖标记物Ki-67的水平;利用碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色流式细胞术分析细胞周期比例,Annexin V/7AAD染色分析细胞凋亡比例;采用划痕实验观察细胞的迁移能力;利用Western blot或实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测NB原发肿瘤组织和细胞系中蛋白和基因的表达水平。结果:NB临床数据库中,国际神经母细胞瘤分期(international neuroblastoma staging system,INSS)为高危险度3/4期的NB组织中CSRP2的mRNA水平显著高于低危险度的1/2期,且高表达水平组NB患儿的生存期显著低于低表达组;Western blot结果显示,CSRP2在3/4期NB组织中的蛋白水平显著高于1/2期。NB细胞中敲低CSRP2,细胞的活力减弱、增殖能力降低;NB细胞中过表达CSRP2促进细胞增殖;敲低CSRP2后,sub-G1、G0/G1和S期细胞的比例增加,Annexin V阳性细胞的比例增多;敲低CSRP2的NB细胞的划痕愈合率显著小于对照组。机制研究发现,敲低CSRP2后细胞增殖标记分子Ki-67和细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinases 1/2,ERK1/2)磷酸化水平显著低于对照组。结论:CSRP2在高危险度3/4期NB组织中高表达,表达水平与NB患儿生存期呈负相关;CSRP2通过促进ERK1/2活化,促进NB细胞的增殖和迁移,抑制细胞凋亡,表明CSRP2通过激活ERK1/2促进NB进展,为高危NB的靶向治疗提供了潜在的靶点。

基于生物信息学筛选神经母细胞瘤骨髓转移关键基因

目的利用生物信息学方法分析神经母细胞瘤骨髓转移差异表达的基因,探讨免疫细胞浸润情况,筛选参与神经母细胞瘤骨髓转移的关键基因。方法在GEO数据库下载神经母细胞瘤骨髓转移相关数据集GSE112447,筛选差异表达基因(DEGs),进行GO/KEGG富集分析、蛋白互作网络构建、免疫浸润分析,利用Cytoscape软件筛选关键基因。结果筛选得到397个DEGs,其中261个上调基因,136个下调基因。功能富集分析显示DEGs参与信号转导、炎症反应、细胞增殖等多种生物学过程。KEGG结果表明:DEGs与PI3K-Akt信号通路、破骨细胞分化、趋化因子信号通路等有关。22种免疫细胞中,相对于骨髓转移组,无骨髓转移组有更多的浆细胞、活化的CD4+T细胞、滤泡辅助T细胞、活化的NK细胞、M0及M2巨噬细胞浸润。PPI网络构建筛选得到9个关键基因(TNF、IL-1β、ITGAM、TLR2、FCGR3A、S100A12、FGR、LILRB2、HCK)。ROC曲线提示S100A12及IL-1β高表达发生骨髓转移风险相对更高。结论本研究筛选得到的关键基因及免疫细胞浸润水平的变化可能在神经母细胞瘤骨髓转移中起到重要作用。

RRS1在神经母细胞瘤组织和细胞中的表达及意义

目的探究核糖体合成调控因子1(RRS1)在神经母细胞瘤组织和细胞中的表达及意义。方法使用TARGET数据库分析RRS1在神经母细胞瘤组织中的表达情况,并分析RRS1高表达与神经母细胞瘤病理指标及预后之间的关联,随后使用GEO数据库分析RRS1在神经母细胞瘤细胞系中的表达情况。然后运用慢病毒转染技术过表达或敲低SK-N-AS细胞株中RRS1的表达,采用CCK-8法、平板克隆实验、流式细胞术和Transwell法检测RRS1对肿瘤细胞增殖、凋亡、周期分布和迁移的影响。结果TARGET和GEO数据库分析结果显示,RRS1基因在59例NB组织中高表达(59/150),且其在NB高风险组中的表达明显高于中、低风险组(P<0.01);此外,RRS1 mRNA在NB细胞系中的表达水平明显高于其在对照细胞中的表达(P<0.01)。临床病理相关性分析结果显示,RRS1mRNA的表达水平与NB患者的年龄、MYCN扩增、INSS分期、COG分期及NB患者的死亡(临床回访)(P<0.05)有关;Kaplan-Meier生存分析显示,RRS1高表达组NB患者的总生存时间(OS)较低表达患者的短(P<0.001)。细胞功能实验结果表明,RRS1过表达可促进SK-N-AS细胞株的增殖、周期进程和迁移并抑制细胞凋亡;而RRS1敲低时,实验显示相反的趋势。结论RRS1高表达可能与神经母细胞瘤患者的不良预后相关,其可参与调节神经母细胞瘤细胞的增殖、凋亡、周期进程和迁移。

那西妥单抗致神经母细胞瘤患儿过敏性休克1例并文献复习

免疫治疗是高危神经母细胞瘤(HR-NB)治疗方案中的重要组成部分,那西妥单抗是一种靶向双唾液酸神经节苷脂(GD2)的人源化单克隆抗体,通过与肿瘤细胞表面的GD2抗原结合,引发抗体介导的细胞毒性反应并激活免疫系统中的补体系统,从而达到杀死肿瘤细胞的目的。然而那西妥单抗输注过程中不良事件发生率较高。本文报道了1例HR-NB患儿输注那西妥单抗时突发过敏性休克的病例,同时对那西妥单抗不良反应种类及过敏发生机制进行了深入分析,以期为HR-NB患儿那西妥单抗的输注方案和全程管理提供可参考的意见。

神经母细胞瘤化疗耐药机制的研究进展

神经母细胞瘤(Neuroblastoma,NB)是儿童最常见的颅外恶性实体瘤,其临床症状各异且易复发和转移。目前NB的治疗方法主要以手术联合化疗为主,由于化疗后期易出现耐药性,高危型NB患者的预后往往不理想。因此,深入了解NB化疗耐药机制对于提高患者的预后具有至关重要的意义,本文从多个方面探讨NB化疗耐药的机制。

基于生物信息学分析HOXC9在神经母细胞瘤中的表达及临床应用

目的研究HOXC9在神经母细胞瘤(Nuroblastoma,NB)中的表达与临床应用。方法筛选来自TARGET数据库的NB基因表达数据集,分析差异表达基因(DEG);再利用DAVID数据库进行富集分析,筛选出NB关键基因并进行预后分析。另收集36例NB患儿术中肿瘤组织,荧光定量PCR法检测HOXC9表达水平,分析HOXC9的表达与NB临床资料的关系。结果筛选出681个DEG,生存分析发现HOXC9低表达水平与不良预后有关。Q-PCR结果发现HOXC9的表达与患儿年龄、肿瘤分期、病理分型、转移情况有关。结论HOXC9与NB的发生和预后相关。