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人重组TNF-α突变体471蛋白的初步纯化及生物学活性
被引量:
3
1
作者
李瑶琛
孔令洪
+3 位作者
王一理
尚宁宽
耿宜萍
司履生
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第4期409-412,共4页
目的 :在利用原核表达系统表达重组人突变体 4 71TNF α蛋白的基础上 ,对该蛋白进行初步纯化及生物学活性检测。方法 :利用最佳发酵和表达条件 ,诱导基因重组的人突变体4 71TNF α工程菌表达目的蛋白。收集菌体 ,经超声破碎 ,分离人突变...
目的 :在利用原核表达系统表达重组人突变体 4 71TNF α蛋白的基础上 ,对该蛋白进行初步纯化及生物学活性检测。方法 :利用最佳发酵和表达条件 ,诱导基因重组的人突变体4 71TNF α工程菌表达目的蛋白。收集菌体 ,经超声破碎 ,分离人突变体 4 71TNF α的包涵体 ,并观察变性剂及蛋白浓度对蛋白折叠的影响。采用MTT比色法检测并比较人野生型及突变体 4 71TNF α的生物学活性。结果 :在适当的变性与复性条件下 ,已成功地将突变体 4 71TNF α折叠并聚合形成具有生物学活性的三聚体。突变体 4 71TNF α对L92 9的细胞毒活性高于野生型TNF α的 15倍。结论 :原核表达系统中表达的人突变体 4 71TNF α经复性处理后具有显著的生物学活性 。
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关键词
人突变体471
TNF—α
蛋白纯化
MTT比色法
生物学活性
下载PDF
职称材料
题名
人重组TNF-α突变体471蛋白的初步纯化及生物学活性
被引量:
3
1
作者
李瑶琛
孔令洪
王一理
尚宁宽
耿宜萍
司履生
机构
西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第4期409-412,共4页
文摘
目的 :在利用原核表达系统表达重组人突变体 4 71TNF α蛋白的基础上 ,对该蛋白进行初步纯化及生物学活性检测。方法 :利用最佳发酵和表达条件 ,诱导基因重组的人突变体4 71TNF α工程菌表达目的蛋白。收集菌体 ,经超声破碎 ,分离人突变体 4 71TNF α的包涵体 ,并观察变性剂及蛋白浓度对蛋白折叠的影响。采用MTT比色法检测并比较人野生型及突变体 4 71TNF α的生物学活性。结果 :在适当的变性与复性条件下 ,已成功地将突变体 4 71TNF α折叠并聚合形成具有生物学活性的三聚体。突变体 4 71TNF α对L92 9的细胞毒活性高于野生型TNF α的 15倍。结论 :原核表达系统中表达的人突变体 4 71TNF α经复性处理后具有显著的生物学活性 。
关键词
人突变体471
TNF—α
蛋白纯化
MTT比色法
生物学活性
Keywords
human TNF α mutein
471
protein purification
MTT colorimetry
bioactivity
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人重组TNF-α突变体471蛋白的初步纯化及生物学活性
李瑶琛
孔令洪
王一理
尚宁宽
耿宜萍
司履生
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003
3
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