人端粒保护蛋白POT1和TRF2在喉癌中的表达

目的探讨人端粒保护蛋白1(human protection of telomeres1,POT1)和端粒重复序列结合因子2(telomeric repeat binding factor-2,TRF2)在喉鳞状细胞癌(简称喉癌)及声带息肉中的表达及意义。方法采用间接免疫荧光法检测20例喉癌、19例声带息肉中POT1和TRF2的表达水平。结果POT1和TRF2在喉癌中的阳性表达率为65.00%和70.00%,在声带息肉中未见POT1和TRF2的表达。POT1在低分化喉癌中的表达高于POT1在高及中分化喉癌中的表达(P<0.05),POT1的表达水平在喉癌的不同发生部位、T分级、临床分期及淋巴结转移率中的差异无统计学意义(P<0.05)。TRF2的表达程度与肿瘤的发生部位、组织病理、T分级、淋巴结转移率和临床分期均无关(P<0.05)。相关分析显示喉癌中POT1的表达与TRF2的表达无相关性(P<0.05)。结论POT1和TRF2在喉癌中高表达,两者在喉癌的发生中可能起重要作用。POT1在喉癌中的表达与肿瘤的分化程度有关。

人端粒保护蛋白1基因单核苷酸多态性与胃癌的关系

目的探讨人端粒保护蛋白1基因（hPOT1）IVS13—98G／T位点单核苷酸多态性与胃癌的关系。方法收集2005年12月至2006年7月甘肃省武威肿瘤医院、武威市人民医院、武威市凉州区医院168例胃癌患者（胃癌组）和156例健康受试者（对照组）的血液标本，采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性技术行基因型分析，比较各基因型分布频率与胃癌发病风险的关系。采用矿检验比较胃癌组和对照组hPOT1IVS13—98G／T位点的基因型分布和等位基因频率，用Hardy—weinberg平衡检验基因型和等位基因频率分布是否具有群体代表性。相对危险度和95％CI以非条件Logistic回归模型计算。结果胃癌组hPOT1IVS13—98G／T位点GG、GT、TT型的频率分别为21．4％、41．7％、36．9％，G、T等位基因的频率分别为42．3％、57．7％；对照组GG、GT、TT型的频率分别为24．4％、51．9％、23．7％，G、T等位基因频率分别为49．7％和50．3％。两组G、T等位基因型频率比较差异无统计学意义（χ2=3．58，P〉0．05）。以TT型作为参照基因型，GT和GG两种基因型相对危险度分别为0．439（95％CI：0．251—0．767，P〈0．05）、0．514（95％凹：0．264—0．999，P=0．05）。hPOT1IVS13—98G／T位点各基因型与性别、吸烟及肿瘤家族史对胃癌发病没有影响。结论hPOT1IVS13—98G／T位点的GT和GG型可能与胃癌的易感性降低有关，hPOT1IVS13—98G／T位点单核苷酸多态性可能为胃癌的保护因素。

胃癌中人端粒保护蛋白1的表达及其与幽门螺杆菌感染的相关性研究

目的 探讨胃癌中人端粒保护蛋白1（hPOT1）基因的表达及其与幽门螺杆菌（HP）感染的关系.方法 应用SP免疫组织化学、原位杂交法检测hPOT1蛋白、hPOT1 mRNA在53例胃癌标本（观察组）中的表达,同时以20例正常胃黏膜组织作为对照.应用Warthin-Starry银染法检测53例胃癌组织中HP感染情况.结果 观察组中hPOT1蛋白的阳性表达率为84.91％（45/53）,高于对照组的30.00％（6/20） （P＜0.01）;观察组中hPOT1 mRNA的阳性表达率为58.49％（31/53）,高于对照组的10.00％（2/20）（P＜ 0.05）.胃癌组织中hPOT1蛋白与hPOT1 mRNA共同阳性表达率为56.60％（30/53）,两者在胃癌中的表达呈正相关（r=0.394,P＜0.01）.53例胃癌组织中HP感染阳性28例（52.83％）.HP感染阳性组hPOT1蛋白阳性表达率为96.43％（27/28）,高于HP感染阴性组的72.00％（18/25）（P＜0.05）.HP感染阳性组hPOT1 mRNA阳性表达率为85.75％（24/28）,高于HP感染阴性组的28.00％（7/25）（P＜0.01）.结论 hPOT1可能参与了胃癌的发生,同时检测hPOT1蛋白与hPOT1 mRNA的表达水平有助于胃癌的诊断.胃癌组织中HP感染引起hPOT1异常表达可能是导致胃癌发生的机制之一.

人端粒保护蛋白1的结构与功能

人类端粒DNA由富含G的短片段重复序列（TTAGGG）串联组成，包括双链和3’端突出的单链两部分，不能编码蛋白质[1-2]。通常认为端粒酶是调控端粒DNA长度最重要的因素，端粒酶活性的降低将导致端粒长度的下降，细胞分裂停滞。端粒酶活性通常由其催化亚单位（端粒酶逆转录酶）所决定[3-4]，但奇怪的是，端粒双链DNA结合蛋白TRFl与TRF2，也能调控端粒酶活性，但它们并无直接联系。最近的研究显示人端粒保护蛋白1（hPOTl）能将TRFl一TRF2复合物携带的端粒长度信息传递到端粒DNA的末端与端粒酶，从而维持端粒DNA长度的稳定[5]。本文就端粒结构、hPOTl的基因结构、hPOTl的理化性质以及hPOTl的功能做一综述。

人端粒保护蛋白1与冠状动脉病变的关系

目的探讨人端粒保护蛋白1（hPOTl）的表达水平与冠状动脉粥样硬化病变发生的关系。方法选取山东大学第二医院心脏内科住院患者79例，通过冠状动脉造影术，分为冠心病组（n=49）和对照组（n=30），分离外周血白细胞，应用实时荧光定量PCR（qRT—PCR）法检测hPOTlmRNA表达水平，研究对象均测定身高、体质量、血压等指标，检测空腹血糖、血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）等指标。结果冠心病组llPOTlmRNA表达量与对照组相比明显减低（P〈0．05）；hPOTImRNA表达水平与冠心病的易患因素高血糖（r=-0．264，P〈0．05）、高胆固醇（r=-0．213，P〈0．05）及高血压（r=-0．331，P〈0．01）分别呈负相关；多因素Logistic回归分析显示，hPOTl为冠心病发生的保护性因素（OR=0．87l，95％C1=0．852—0．900，P〈0．05）。结论hPOTl表达水平减低与冠状动脉粥样硬化病变的发生及其易患因素密切相关。

胃癌hPOT1基因单核苷酸多态性与幽门螺杆菌感染的关系

目的探讨胃癌中人端粒保护蛋白1基因(hPOT1)IVS13-98G/T位点单核苷酸多态性与幽门螺杆菌(H.pylori)感染的关系。方法采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)对150例外科手术切除的胃癌患者和156例正常对照者行基因型分析,采用PCR和Warthin-Starry银染色法检测幽门螺杆菌。结果胃癌组hPOT1IVS13-98 T/G位点GG、GT、TT基因型的频率分别22.00%、41.67%、36.67%,G、T等位基因频率分别为42.67%、57.33%;对照组GG、GT、TT基因型的频率分别为24.36%、51.92%、23.72%,G、T等位基因频率分别为49.68%和50.32%。两组G、T等位基因型频率比较无统计学意义(2χ=3.0257,P=0.0820)。以T/T基因型作为参照基因型,G/T和G/G两种基因型OR值分别为0.432(95%CI:0.242-0.772,P=0.005)、0.540(95%CI:0.274-1.064,P=0.075)。胃癌中3种基因型H.pylori的检出率无统计学意义(P>0.05)。结论hPOT1 IVS13-98G/T单核苷酸多态性可能与甘肃胃癌高发区的胃癌患者有关,可能为胃癌的保护因素。胃癌hPOT1 IVS13-98G/T单核苷酸多态性与H.pylori感染无关。

喉癌及癌前病变中hPOT1的表达及其与HP感染的相关研究

目的探讨喉癌及癌前病变中人端粒保护蛋白1(hPOT1)的表达及其与幽门螺杆菌(HP)感染的关系。方法针对喉癌前病变、喉癌各50例患者,使用免疫学组织化学SP检验法,统计被检测对象的HP值以及其受感染状况与人端粒保护蛋白表达状况。结果喉癌前病变、喉癌中hPOT1表达阳性率分别为38%、86%,P <0.05;HP感染阳性率分别为66%、24%,P <0.05;HP阳性组hPOT1表达均高于HP阴性组,其中,喉癌前病变中hPOT1的表达HP阳性组高于HP阴性组,P <0.05。结论 hPOT1可能参与了喉癌的发生;在喉癌前病变阶段检测hPOT1的表达和HP的感染情况可为临床早期干预性治疗提供依据。

应用创造酶切位点PCR-RFLP检测POT1基因rs1034794位点多态性

目的建立人端粒保护蛋白1(protection of telomeres 1,POT1)rs1034794位点多态性的检测方法。方法应用创造酶切位点法(created restriction site PCR,CRS-PCR)根据单碱基突变位点的碱基替代情况设计PCR引物。其中1条引物根据突变位点邻近序列设计,引入错配碱基,使得引物3’端和单碱基突变的一种突变型在PCR扩增后形成1个酶切位点,PCR产物用PCR-限制性片段长度多态性(PCR restriction fragment length polymorphism,PCRRFLP)法进行分析。结果设计1对特异引物,其中正向引物3’末端与多态相邻,倒数第三位碱基为错配碱基A可在PCR扩增后与多态T等位基因及相邻片段形成AGCT结构,使用限制性内切酶Alu I酶切效果较好。结论应用CRS-PCR方法创造的酶切位点可以有效而简捷地检测POT1(rs1034794)基因多态性。