目的 寻求使处于生长停滞期的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)增殖寿命延长的方法。 方法 将体外转录质粒 pc DNA3- h TERT用 Bam HI酶切使之线性化 ,经 T7RNA聚合酶催化以转录合成 h TERT m RNA。用脂质体法将 h TERT m RNA导入处于生长...目的 寻求使处于生长停滞期的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)增殖寿命延长的方法。 方法 将体外转录质粒 pc DNA3- h TERT用 Bam HI酶切使之线性化 ,经 T7RNA聚合酶催化以转录合成 h TERT m RNA。用脂质体法将 h TERT m RNA导入处于生长停滞期的 HUVEC。检测 h TERT m RNA导入后细胞端粒酶活性表达与细胞生长增殖情况。 结果 导入 h TERT m RNA后 ,细胞有端粒酶活性的暂时表达 ,增殖寿命较单纯用脂质体处理的对照细胞延长了 7代。 结论 h TERT m RNA导入细胞能可控地、瞬时地重建细胞端粒酶活性 ,可望广泛应用于人体细胞增殖寿命延长的尝试。展开更多
目的探讨定量检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA在乳腺癌鉴别诊断中的价值,并观察原癌基因c-Myc与hTERT mRNA表达的关系。方法收集癌旁正常乳腺组织、乳腺普通型导管增生、不典型导管增生、导管原位癌、浸润性导管癌病例,采用实时荧光定...目的探讨定量检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA在乳腺癌鉴别诊断中的价值,并观察原癌基因c-Myc与hTERT mRNA表达的关系。方法收集癌旁正常乳腺组织、乳腺普通型导管增生、不典型导管增生、导管原位癌、浸润性导管癌病例,采用实时荧光定量RT-PCR技术(Real-ti me RT-PCR)定量检测hTERT和c-Myc基因的转录水平。结果以NhTERT=10为临界值,所有正常组织和良性病变NhTERT值均小于临界值,而hTERT基因转录升高的导管原位癌及浸润性导管癌其NhTERT值均大于此临界值。显示hTERT和c-Myc基因转录水平呈正相关(γ=0.7395,P<0.01)。结论实时荧光定量PCR技术检测hTERT基因表达具有高敏感性和特异性,能为常规病理学诊断提供客观的参考指标,从而提高乳腺不典型导管增生与导管原位癌鉴别诊断的准确性。原癌基因c-Myc转录水平上调可能与乳腺癌hTERT基因转录激活有关。展开更多
文摘目的 寻求使处于生长停滞期的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)增殖寿命延长的方法。 方法 将体外转录质粒 pc DNA3- h TERT用 Bam HI酶切使之线性化 ,经 T7RNA聚合酶催化以转录合成 h TERT m RNA。用脂质体法将 h TERT m RNA导入处于生长停滞期的 HUVEC。检测 h TERT m RNA导入后细胞端粒酶活性表达与细胞生长增殖情况。 结果 导入 h TERT m RNA后 ,细胞有端粒酶活性的暂时表达 ,增殖寿命较单纯用脂质体处理的对照细胞延长了 7代。 结论 h TERT m RNA导入细胞能可控地、瞬时地重建细胞端粒酶活性 ,可望广泛应用于人体细胞增殖寿命延长的尝试。
文摘目的探讨定量检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA在乳腺癌鉴别诊断中的价值,并观察原癌基因c-Myc与hTERT mRNA表达的关系。方法收集癌旁正常乳腺组织、乳腺普通型导管增生、不典型导管增生、导管原位癌、浸润性导管癌病例,采用实时荧光定量RT-PCR技术(Real-ti me RT-PCR)定量检测hTERT和c-Myc基因的转录水平。结果以NhTERT=10为临界值,所有正常组织和良性病变NhTERT值均小于临界值,而hTERT基因转录升高的导管原位癌及浸润性导管癌其NhTERT值均大于此临界值。显示hTERT和c-Myc基因转录水平呈正相关(γ=0.7395,P<0.01)。结论实时荧光定量PCR技术检测hTERT基因表达具有高敏感性和特异性,能为常规病理学诊断提供客观的参考指标,从而提高乳腺不典型导管增生与导管原位癌鉴别诊断的准确性。原癌基因c-Myc转录水平上调可能与乳腺癌hTERT基因转录激活有关。
