人类β-防御素2在口腔扁平苔藓病损中表达的研究

目的探讨口腔扁平苔藓(OLP)患者病损中的人类β-防御素2(hBD-2)的表达,以分析hBD-2在OLP发病机制与上皮抗感染免疫中的作用。方法采用免疫组织化学技术(IHC)和反转录聚合酶链式技术(RT-PCR),检测25例OLP病损组织、7例对照组织中hBD-2多肽的表达,并进行分析。结果 hBD-2在所有样本中均出现了阳性胞浆染色,健康口腔黏膜组中hBD-2蛋白为弱阳性染色,与呈强阳性染色的OLP组差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR检测结果显示,所有样本均出现了hBD-2的cDNA电泳条带,在健康口腔黏膜组中呈微弱表达,在OLP组织中表达明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论健康口腔黏膜组织也有少量hBD-2表达,提示其作为机体先天性免疫的组成部分,在维持口腔黏膜健康上具有一定作用。在OLP的病理过程中hBD-2可能呈炎性诱导上调表达而参与了OLP的免疫发病过程。

肿瘤坏死因子-α、人类β-防御素-1基因多态性与慢性阻塞性肺病相关性的研究

目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)、人类β-防御素-1(hBD-1)基因多态性与慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pul-monary disease,COPD)之间的关系及两基因之间的交互作用。方法:采用病例对照研究和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测COPD患者TNF-α、hBD-1基因型频率分布。结果:COPD组和健康对照组TNF-α-308突变型基因频率在两组对象中的频率分别为16.41%和8.04%,两组比较有统计学差异(P=0.006);hBD-1exon-2突变型基因频率在两组中的频率分别为15.23%和6.70%,两者差异有统计学意义(P=0.003);有TNF-α-308SNP而无hBD-1exon-2SNP时的相对危险度为1.786,无TNF-α-308SNP而有hBD-1exon-2SNP时的相对危险度值为7.082,TNF-α-308SNP、hBD-1ex-on-2SNP均存在时的相对危险度为7.836。结论:TNF-α、hBD-1基因多态性与COPD发生相关,TNF-α-308SNP、hBD-1ex-on-2SNP在COPD的发病过程中无交互作用。

白芍总苷联合曲安奈德治疗口腔扁平苔藓患者的疗效及对血清IL-17、人类β-防御素-2水平的影响

目的观察白芍总苷胶囊治疗口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)患者的疗效及对血清白介素-17(IL-17)、人类β-防御素-2(human beta-defensin-2,HBD-2)水平的影响。方法将60例符合纳入标准的口腔扁平苔藓患者随机分为治疗组和对照组各30例,对照组局部注射曲安奈德,治疗组在此基础上口服白芍总苷胶囊,同时纳入30例健康对照组。治疗1个月后评价其临床疗效及受检者血清IL-17、HBD-2水平。结果两组临床疗效比较,治疗组总有效率(93%)高于对照组(76%)(P<0.05)。OLP患者组血清IL-17、HBD-2水平较健康对照组升高(P<0.05)。治疗组和对照组患者治疗后血清IL-17、HBD-2水平均低于同组治疗前(P<0.05);治疗后,治疗组患者血清IL-17水平低于对照组(P<0.05),HBP-2水平两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论白芍总苷胶囊联合曲安奈德治疗口腔扁平苔藓有较好的疗效,其作用与下调血清IL-17、HBD-2有关。

人类β-防御素-1基因多态性与慢性阻塞性肺疾病关系的研究

目的探讨人类β-防御素-1(hBD-1)基因多态性与慢性阻塞性肺病(chronic obstuctive pulmonary disease,COPD)之间的关系。方法采用病例对照研究和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测COPD患者hBD-1基因型频率分布。结果 COPD组C、G等位基因频数分别是85.25%和14.75%,对照组C、G等位基因频数分别是73.33%和26.67%,C等位基因在COPD组的频数明显高于健康对照组(χ2=5.237,P<0.05,OR:2.101,95%CI:1.104～3.998)。结论 hBD-1基因668C/G位点基因多态性与中国北方汉族人群COPD易感性有相关性,C等位基因可能是COPD的高危险基因。

人类β-防御素在眼表组织中的表达(英文)

背景:人类β-防御素主要定位于多种组织的表皮或上皮。在眼表中也存在防御素,但其在眼表中的分布及眼表疾病中的作用尚不十分清楚。目的:观察人类β-防御素在眼表组织中的分布,分析其在眼表疾病中的潜在作用。设计、时间及地点:以眼表组织为观察对象体外对照实验,于2006-10/2007-12在上海交通大学医学院附属新华医院中心实验室和中国科学院上海分院细胞生化所完成。材料:18个炎性结膜样本中包括6个胬肉表面球结膜、4个球结膜囊肿、4个酸烧伤结膜组织、2个热烧伤结膜组织和2个结膜肉芽肿组织;15个炎性角膜样本中包括6个病毒性角膜炎、4个霉菌性角膜炎、3个细菌性角膜炎和2个角膜穿孔伤后摘除眼球;9个尸体眼正常球结膜样本,8个尸体眼正常角膜样本。方法:RT-PCR法及免疫组织化学法检测50份样本人类β-防御素表达。主要观察指标:人类β-防御素1～3三种蛋白因子在正常及炎症眼表组织的表达和定位。结果:RT-PCR检测发现,人类β-防御素1,3在所有被检角结膜组织中均显示阳性;人类β-防御素2在大部分炎症眼表组织中显示阳性,在正常眼表组织几乎不表达。免疫组织化学结果显示,大多数炎性眼表组织中均同时表达人类β-防御素1,2,分布于上皮细胞层,以基底层为主,偶见基质细胞的浸润,仅少数无人类β-防御素2表达;正常角膜和球结膜样本中均有人类β-防御素1表达,分布于上皮细胞层,以基底层为主,仅极少数同时存在人类β-防御素2表达。结论:人类β-防御素1,3呈组成式表达于正常及炎性眼表组织上皮细胞表皮与基底上皮细胞表层和基底层,人类β-防御素2则呈诱导式表达于大多数炎性眼表组织上皮细胞表皮与基底上皮细胞表层和基底层,均以基底层居多;3种人类β-防御素在对抗眼表感染和促进眼表损伤修复中可能起重要作用。

人类β-防御素在正常、深龋和炎症牙髓中的表达

目的:研究人类β-防御素(human beta-defensins,HBD)在正常、深龋和炎症牙髓中的表达及其意义。方法:采用免疫组化SP法分别对正常、深龋及炎症牙髓中β-防御素HBD-1、HBD-4的表达进行组织学定位,并通过Image pro-plus 5.1图像分析软件对HBD-1/HBD-4染色进行平均光密度值的测定。所得数据用SPSS 13.0统计软件进行相应的统计学分析。结果:在人牙髓中,β-防御素主要表达在成牙本质细胞的细胞核及细胞突起中。HBD-1在3组内表达无显著差异(P>0.05);HBD-4在深龋和牙髓炎组中的表达与正常组相比均显著增强(P<0.05),且炎症组亦强于深龋组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HBD-1参与牙髓天然免疫系统;HBD-4参与龋病发展过程中牙髓组织的免疫防御反应。

人类β-防御素-1(hBD-1)基因多态性与COPD的相关性研究

目的探讨中国北方汉族人人类β-防御素-1(humanβ-defensin-1,hBD-1)基因多态性与慢性阻塞性肺疾病(COPD)易感性的关系。方法应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)检测hBD-1基因外显子2(exon2 Val38Ile)基因型在84例中国北方汉族人COPD患者和90例健康对照者中的分布特点。结果 hBd-1基因exon2 Ile38等位基因在COPD及健康对照组中突变频率分别为14.28%、5.00%,2组比较差异有统计学意义(P=0.017)。结论 hBD-1 exon2 Val38Ile基因多态性是中国汉族人群COPD发病的危险因素(OR=2.776),hBd-1 exon 2基因Ile38突变与吸烟对COPD的发生存在正协同作用。

白色假丝酵母菌感染对口腔上皮细胞人类β-防御素2的表达

目的探讨白色假丝酵母菌对人类β-防御素2(HBD-2)在口腔上皮细胞中表达的影响,为口腔白色假丝酵母菌感染的治疗提供参考依据。方法试验分成3组,分别为孢子、菌丝及灭活的白色假丝酵母菌组;将KB细胞与孢子相、菌丝相及灭活的白色假丝酵母菌培养3、6、12、24h后,采用ELISA试验检测各组KB细胞培养液中HBD-2的表达,重复检测3次,采用SPSS18.0软件进行分析。结果随着时间的延长,黏附KB细胞的白色假丝酵母菌的总数由(1.83±0.64)CFU/cm2下降至(0.18±0.09)CFU/cm2,但活力未发生改变,菌丝转换率由(28.16±5.14)%增高至(80.18±10.14)%;感染24h后孢子相、菌丝相及灭活的白色假丝酵母菌组HBD-2分别为(60.08±6.47)pg/ml、(81.52±8.20)pg/ml、(64.81±7.35)pg/ml,均高于对照组(P<0.05)。结论白色假丝酵母菌在特定时间内可使口腔上皮细胞上调HBD-2表达,菌丝进一步侵袭后,HBD-2的表达降低。

牙周基础治疗前后慢性牙周炎患者龈沟液中β-防御素2及白细胞介素-1β表达水平的变化研究

目的:探讨慢性牙周炎患者牙周基础治疗前、后龈沟液(GCF)中β-防御素2(HBD-2)及其与白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平的关系。方法:选择慢性牙周炎患者10例为慢性牙周炎组,按纳入标准选取20位点分别在牙周基础治疗前及治疗后1个月分别收集GCF并记录临床指标。以牙周健康者12例的24位点GCF为健康对照组。GCF采集后记录采集点出血指数(BI)和探诊深度(PD)。采用酶联免疫吸附法测定GCF中HBD-2及IL-1β含量。结果:健康对照组GCF中HBD-2表达水平高于慢性牙周炎组(P<0.05);慢性牙周炎组牙周基础治疗前、后HBD-2表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。牙周基础治疗前,慢性牙周炎组IL-1β的表达水平高于健康对照组(P<0.001),慢性牙周炎组牙周基础治疗后IL-1β表达水平低于治疗前。牙周基础治疗后,BI、PD均较治疗前小(P<0.001)。与HBD-2、IL-1β表达水平无关(P>0.05)。结论:慢性牙周炎患者牙周基础治疗后GCF中IL-1β的表达水平较治疗前低,GCF中HBD-2在牙周基础治疗前、后表达水平无差异;与GCF中的HBD-2、IL-1β表达水平无关。

重组人β-防御素-2基因在昆虫细胞的转染表达

目的 探索杆状病毒表达系统 (BEVS)高效表达人 β-防御素 - 2 (h BD- 2 )的可行性及其技术路线。方法 利用特异性引物经 PCR扩增 ,从重组质粒 rpc DNA3.1/h BD- 2 /myc- His中扩增出完整重组 h BD- 2 /His基因片段。将此片段插入转移质粒 p Ac GHL T- A的多克隆位点中 ,构建成重组转移载体 rp Ac GHL T- A/h BD- 2 /His。用该重组转移载体和多角体病毒 Ac NPV DNA共转染草地夜蛾细胞 (Sf2 1) ,二者在细胞内经过同源重组形成重组病毒 r Ac NPV/h BD- 2 /His。用终点稀释分析法检测感染上清重组病毒的感染效率。采用 Western印迹法通过特异性抗 - His抗体检测细胞及上清 h BD- 2 /His的表达。结果 目的基因 h BD- 2 /His正确地插入 BEVS系统的转移载体。经 rp Ac GHL T- A/h BD- 2 /His和 Ac NPV DNA共转染的 Sf2 1细胞有较高滴度的重组病毒 r Ac NPVh BD- 2 /his存在。被共转染的 Sf2 1细胞的可溶性蛋白 ,在相对分子质量约 4 7.5× 10 3处有强反应条带显示 ,其大小与根据测序结果所推测的 h BD- 2融合肽相对分子质量接近。培养上清分别在相对分子质量约 4 0× 10 3和 30× 10 3处有强反应条带显示。结论 可利用 BEVS系统作为高效表达重组 h BD- 2的生物反应器。

β-防御素3调节人牙龈成纤维细胞分泌MMP-1及PGE_2的信号通路研究

目的:研究β-防御素3(HBD3)调节人牙龈成纤维细胞(HGFs)分泌MMP-1和PGE2的信号通路。方法:取P5代HGFs接种于96孔板,并随机分为1个对照组(HBD3)和7个实验组(HBD3+antiTLR2、HBD3+anti-TLR4、HBD3+SB203580、HBD3+PD98059、HBD3+SP600125、HBD3+LY294002、HBD3+SC3060)。各实验组分别以相应的信号通路抑制剂anti-TLR2、anti-TLR4预处理30 min,SB203580、PD98059、SP600125、LY294002、SC3060预处理60min,然后各组再加入100μL浓度为1μg/mL的HBD3进行培养,12h后收集各组培养上清液,ELISA法检测MMP-1及PGE2浓度。结果:信号通路抑制剂SB203580、PD98059、SC3060、anti-TLR2各组MMP-1的浓度(ng/mL)分别为3.660±0.286、3.410±0.554、4.435±0.235、3.995±0.612,低于对照组(5.128±0.256)ng/mL(P<0.05);信号通路抑制剂SP600125、SC3060两组PGE2浓度(pg/mL)分别为146.518±15.800和180.349±5.490,低于对照组(209.213±7.284)pg/mL(P<0.05)。结论:HBD3调节HGFs分泌MMP-1涉及TLR2、P38、ERK、NF-κB信号途径;调节PGE2分泌涉及JNK和NF-κB信号途径。

血清HBD2和HBD3在肺炎支原体肺炎感染患儿中的表达水平及与免疫功能的关系

目的分析肺炎支原体肺炎(MMP)感染患儿血清人类β-防御素2(HBD2)、HBD3的表达水平,并探讨其临床意义。方法选择陵水县人民医院2020年1月-2022年6月接诊的100例MMP患儿作为观察组,其中重症28例,轻症72例;并纳入同期健康体检儿童100人作为对照组。比较观察组、对照组和观察组不同病情程度患儿血清HBD2、HBD3、IgA、IgG、T淋巴细胞亚群CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)的表达,并分析血清HBD2、HBD3和免疫功能的相关性。结果观察组血清HBD2、HBD3分别为(114.59±14.06)pg/mL、(62.60±10.71)pg/mL,均高于对照组(78.69±11.83)pg/mL、(31.16±4.47)pg/mL,IgA、IgG和CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)分别为(1.16±0.18)g/L、(10.24±1.53)g/L、(53.28±5.86)%、(32.48±3.04)%、(1.37±0.15),均低于对照组(1.71±0.23)g/L、(12.96±2.71)g/L、(71.62±7.32)%、(40.06±3.83)%、(1.62±0.24),差异均有统计学意义(t=19.538、27.091、18.832、8.740、19.559、15.502、8.333,P均<0.05);观察组重症患儿血清HBD2、HBD3分别为(137.13±15.69)pg/mL、(76.92±12.48)pg/mL,均高于轻症患儿(105.83±11.28)pg/mL、(57.03±8.29)pg/mL,IgA、IgG和CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)分别为(0.92±0.15)g/L、(8.24±1.05)g/L、(46.24±4.75)g/L、(28.13±3.02)g/L、(1.17±0.16),均明显低于轻症患儿(1.26±0.18)g/L、(11.02±1.36)g/L、(56.02±7.69)g/L、(34.17±3.83)g/L、(1.45±0.14),差异均有统计学意义(t=11.110、9.276、8.862、9.736、6.269、7.481、8.624,P均<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清HBD2、HBD3与IgA、IgG、CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)均成负相关(r_(HBD2)=-0.475、-0.489、-0.433、-0.462、-0.501,P均<0.05;r_(HBD3)=-0.562、-0.506、-0.474、-0.520、-0.487,P均<0.05)。结论MMP患儿血清HBD2、HBD3水平明显上调,免疫功能明显降低,且血清HBD2、HBD3与免疫功能均有明显相关性,在临床诊疗中应予以关注。