期刊文献+
共找到627篇文章
< 1 2 32 >
每页显示 20 50 100
重组人β-防御素-2基因在昆虫细胞的转染表达 被引量:3
1
作者 蔡绍晖 杜军 +1 位作者 黄宁 王伯瑶 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期832-835,共4页
目的 探索杆状病毒表达系统 (BEVS)高效表达人 β-防御素 - 2 (h BD- 2 )的可行性及其技术路线。方法 利用特异性引物经 PCR扩增 ,从重组质粒 rpc DNA3.1/h BD- 2 /myc- His中扩增出完整重组 h BD- 2 /His基因片段。将此片段插入转移... 目的 探索杆状病毒表达系统 (BEVS)高效表达人 β-防御素 - 2 (h BD- 2 )的可行性及其技术路线。方法 利用特异性引物经 PCR扩增 ,从重组质粒 rpc DNA3.1/h BD- 2 /myc- His中扩增出完整重组 h BD- 2 /His基因片段。将此片段插入转移质粒 p Ac GHL T- A的多克隆位点中 ,构建成重组转移载体 rp Ac GHL T- A/h BD- 2 /His。用该重组转移载体和多角体病毒 Ac NPV DNA共转染草地夜蛾细胞 (Sf2 1) ,二者在细胞内经过同源重组形成重组病毒 r Ac NPV/h BD- 2 /His。用终点稀释分析法检测感染上清重组病毒的感染效率。采用 Western印迹法通过特异性抗 - His抗体检测细胞及上清 h BD- 2 /His的表达。结果 目的基因 h BD- 2 /His正确地插入 BEVS系统的转移载体。经 rp Ac GHL T- A/h BD- 2 /His和 Ac NPV DNA共转染的 Sf2 1细胞有较高滴度的重组病毒 r Ac NPVh BD- 2 /his存在。被共转染的 Sf2 1细胞的可溶性蛋白 ,在相对分子质量约 4 7.5× 10 3处有强反应条带显示 ,其大小与根据测序结果所推测的 h BD- 2融合肽相对分子质量接近。培养上清分别在相对分子质量约 4 0× 10 3和 30× 10 3处有强反应条带显示。结论 可利用 BEVS系统作为高效表达重组 h BD- 2的生物反应器。 展开更多
关键词 人类β-防御素-2基因 基因重组 杆状病毒表达系统 草地夜蛾细胞
下载PDF
猪β-防御素-2在黄曲霉毒素B1致小鼠肠道炎症损伤中的作用
2
作者 张曼 王坤丽 +4 位作者 王艳慧 李庆豪 李明 边思琦 皇甫和平 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第7期36-43,共8页
旨在探究猪β-防御素-2(pBD-2)在黄曲霉毒素B1(AFB1)致鼠肠道损伤中的作用。本试验以4周龄KM小鼠为研究对象,将体重相近的30只健康小鼠随机均分为5组,分别为空白对照组(不做任何处理)、DMSO组(1%DMSO灌胃)、AFB1组(0.3 mg/kg AFB1灌胃)... 旨在探究猪β-防御素-2(pBD-2)在黄曲霉毒素B1(AFB1)致鼠肠道损伤中的作用。本试验以4周龄KM小鼠为研究对象,将体重相近的30只健康小鼠随机均分为5组,分别为空白对照组(不做任何处理)、DMSO组(1%DMSO灌胃)、AFB1组(0.3 mg/kg AFB1灌胃)、pBD-2组(0.03 mg/kg pBD-2灌胃)和AFB1+pBD-2组(0.3 mg/kg AFB1灌胃28 d后再用0.03 mg/kg pBD-2灌胃28 d),试验持续56 d,通过观察小鼠肠道结构的变化以及采用qPCR和免疫荧光的方法检测炎症相关因子的表达水平。结果:与对照组相比,AFB1组小鼠的平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)均呈现显著下降趋势(P<0.05),料重比(F/G)降低,但差异不显著(P>0.05),而小鼠饲喂pBD-2以后ADG和ADFI均较AFB1组显著增加(P<0.05);HE染色结果显示,AFB1导致小鼠空肠黏膜显著损伤,并伴有严重的肠壁变薄,肠绒毛萎缩、稀疏,肠绒毛高度与隐窝深度之比、相对肠绒毛数量及肠壁厚度均显著降低(P<0.05),而使用pBD-2处理小鼠损伤模型,肠道结构可见显著恢复(P<0.05);qPCR和免疫荧光染色结果表明,AFB1处理小鼠可显著上调白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05),但对白细胞介素-8(IL-8)的表达水平出现了下调趋势,而用pBD-2处理小鼠损伤模型后可显著下调炎症因子的表达水平,说明pBD-2对AFB1造成的肠黏膜炎症具有缓解作用。本研究结果为AFB1中毒的防控及pBD-2在畜牧生产中的应用提供了科学依据。 展开更多
关键词 β-防御-2 黄曲霉毒B1 肠道炎症 小鼠
下载PDF
人β-防御素-2基因表达及其抗菌活性 被引量:7
3
作者 李娟 唐羚珊 +2 位作者 刘娟 李斌 陈新年 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1082-1084,共3页
目的获得人β-防御素-2(humanβ-defensin-2,hBD2)基因并构建其真核表达载体,转染小鼠纤维母细胞(L929),检测其表达,观察hBD2的体外抗菌活性。方法采用逆转录(RT)-PCR方法从人宫颈癌组织获取人β-防御素-2基因,然后进行克隆扩增,重组真... 目的获得人β-防御素-2(humanβ-defensin-2,hBD2)基因并构建其真核表达载体,转染小鼠纤维母细胞(L929),检测其表达,观察hBD2的体外抗菌活性。方法采用逆转录(RT)-PCR方法从人宫颈癌组织获取人β-防御素-2基因,然后进行克隆扩增,重组真核表达载体pCAGG-hBD2,通过磷酸钙共沉淀法将pCAGG-hBD2导入L929细胞,并用RT-PCR法检测hBD2的表达,用Kirby-Bauer纸片扩散法检测其抗菌活性。结果RT-PCR凝胶电泳及测序分析的结果显示,所克隆的hBD2基因序列正确,并成功构建了真核表达载体pCAGG-hBD2。Kirby-Bauer纸片法显示,hBD2对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌有明显的杀灭效应。结论转染pCAGG-hBD2的L929细胞能高效表达hBD2,其对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌有杀灭作用。 展开更多
关键词 β-防御-2 基因转染 小鼠纤维母细胞 抗菌活性
下载PDF
大鼠β-防御素-2基因气道转染增强肺抗感染防御功能的研究 被引量:6
4
作者 周慧 黄宁 +1 位作者 吴琦 王伯瑶 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 2003年第3期451-454,共4页
β-防御素体外试验显示具广谱抗菌活性 ,本研究应用转基因方法评估其体内抗菌作用。构建大鼠 β-防御素 - 2 (r BD2 )重组质粒 p BK- CMV- r BD2和 p CDNA- 3.1- Myc- His(+) - r BD2 ,通过脂质体包裹的方法将重组质粒经气管滴入 ,检测... β-防御素体外试验显示具广谱抗菌活性 ,本研究应用转基因方法评估其体内抗菌作用。构建大鼠 β-防御素 - 2 (r BD2 )重组质粒 p BK- CMV- r BD2和 p CDNA- 3.1- Myc- His(+) - r BD2 ,通过脂质体包裹的方法将重组质粒经气管滴入 ,检测其在气管和肺组织表达情况 ,并应用肺组织匀浆上清菌落计数法检察对绿脓杆菌的肺清除率。结果显示在基因转染大鼠的气管和肺组织内均检测到 r BD2 - His融合蛋白基因 m RNA和蛋白的表达 ,说明脂质体包裹的重组 β-防御素 - 2 p BK- CMV- r BD2质粒可有效转染气道上皮组织。肺细菌清除率实验显示构建重组质粒 p BK-CMV- r BD2气道转染与对照相比可显著提高肺组织对绿脓杆菌的清除率 (n(8,p(0 .0 1)。本研究表明 β-防御素基因气道转染可提高呼吸道天然抗感染防御功能 ,可能在呼吸道感染的防治实践中具有潜在应用价值。 展开更多
关键词 大鼠 β-防御-2 基因气道转染 抗感染 防御功能 气管 肺组织 呼吸道感染
下载PDF
重组人β-防御素-2基因的植物表达载体的建立 被引量:4
5
作者 蔡绍晖 余懋群 +3 位作者 杨晓鹃 杜军 黄宁 王伯瑶 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期385-389,共5页
目的 运用植物转基因技术 ,探索构建表达人类 β-防御素 - 2 ( h BD- 2 )的植物生物反应器的可能性及技术路线。方法 将 C端带 myc和 6x His双标记的重组 h BD- 2基因插入植物真核表达载体 p CAMBIA13 0 4中 ,构建 C端带 m yc和 6x Hi... 目的 运用植物转基因技术 ,探索构建表达人类 β-防御素 - 2 ( h BD- 2 )的植物生物反应器的可能性及技术路线。方法 将 C端带 myc和 6x His双标记的重组 h BD- 2基因插入植物真核表达载体 p CAMBIA13 0 4中 ,构建 C端带 m yc和 6x His双标记的重组 h BD- 2植物真核表达载体 rp CAMBIA13 0 4/ h BD- 2 / His。利用此载体转化根癌农杆菌 L BA44 0 4,经卡那霉素进行抗性基因筛选和 PCR检测 ,确定根癌农杆菌的阳性克隆。重组 h BD- 2通过转化阳性的根癌农杆菌被导入小麦幼胚愈伤组织细胞 ,经潮霉素进行抗性基因筛选 ,获得抗性愈伤组织。结果 酶切分析、PCR验证和 DNA测序等证据表明 :C端带 m yc和 6x His双标记的重组 h BD- 2已被正确地插入 p CAMBI-A13 0 4载体中 ,并位于 Ca MV 3 5 S与 Nos终止子之间 ,提示重组 h BD- 2 / His基因的植物表达载体 rp CAMBI-A13 0 4/ h BD- 2 / His已被成功构建。卡那霉素抗性基因筛选和 PCR检测显示 :rp CAMBIA13 0 4/ h BD- 2 / His已成功转化根癌农杆菌 L BA44 0 4,阳性克隆菌株已获得。潮霉素抗性筛选结果提示 :h BD- 2基因被导入小麦幼胚愈伤组织细胞。结论 本研究为进一步培育 h BD- 展开更多
关键词 重组人β-防御-2基因 植物表达载体 植物转基因技术 可能性 技术路线
下载PDF
人β-防御素4基因在HEK293细胞中的转染表达 被引量:6
6
作者 曹玉红 成胜权 +3 位作者 张光运 钱新宏 李如英 丁翠玲 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第10期1020-1023,共4页
目的人β-防御素4(humanβ-defensin 4,HBD 4)对多种病原菌有杀伤作用。HBD4的自然表达水平极低,体外获得难度较大且价格昂贵。利用基因工程技术生产重组的HBD4成为研究的焦点。文中旨在构建HBD4真核表达载体,探讨真核细胞表达HBD4的可... 目的人β-防御素4(humanβ-defensin 4,HBD 4)对多种病原菌有杀伤作用。HBD4的自然表达水平极低,体外获得难度较大且价格昂贵。利用基因工程技术生产重组的HBD4成为研究的焦点。文中旨在构建HBD4真核表达载体,探讨真核细胞表达HBD4的可行性。方法用PCR法从已构建的重组克隆载体pMD18-T/HBD4中扩增出HBD4全长编码基因,克隆入真核表达载体pEGFP-N2,构建pEGFP-N2/HBD4重组真核表达载体;通过脂质体转染法将pEGFP-N2/HBD4导入HEK293细胞,采用RT-PCR、荧光显微镜、Western blot检测HBD4的mRNA和蛋白表达情况,并对表达的HBD4进行抗菌活性的初步研究。结果构建的重组真核表达载体pEGFP-N2/HBD4,经酶切鉴定、测序,证实插入的序列与Genebank中的HBD4基因序列完全相同。将pEGFP-N2/HBD4转染HEK293细胞,在转染细胞检测到HBD4mRNA表达。荧光显微镜下可在细胞膜及细胞质中观察到绿色荧光。Western blot分析显示:在pEGFP-N2/HBD4转染的HEK293细胞及细胞培养液中检测到了HBD4蛋白的表达。Kirby—Bauer纸片扩散法证实表达的HBD4蛋白对铜绿假单胞菌具有较强的杀伤作用。结论成功构建了HBD4基因的真核表达载体,并在HEK293细胞中表达出具有抗菌活性的HBD4多肽。 展开更多
关键词 β-防御4 基因克隆 真核表达载体 基因转染
下载PDF
大鼠不同发育阶段β-防御素-2基因在肺组织的表达研究 被引量:4
7
作者 周慧 黄宁 +2 位作者 陈新年 吴琦 王伯瑶 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期226-229,共4页
目的 :探讨大鼠 β -防御素 - 2基因在肺组织表达的发育调控。方法 :根据Genbank大鼠 β -防御素- 2的cDNA序列 ,设计一对特异引物。采用RT -PCR技术在大鼠不同发育阶段的肺组织总RNA中 ,扩增其特异cDNA片段 ,并进行DNA序列测定。借助Ge... 目的 :探讨大鼠 β -防御素 - 2基因在肺组织表达的发育调控。方法 :根据Genbank大鼠 β -防御素- 2的cDNA序列 ,设计一对特异引物。采用RT -PCR技术在大鼠不同发育阶段的肺组织总RNA中 ,扩增其特异cDNA片段 ,并进行DNA序列测定。借助Genbank中BLAST程序 ,将从该cDNA序列推导的氨基酸序列与人的hBD -2和大鼠的rBD - 1做相似性分析。结果 :从足月胎鼠、出生 8h和 4d以及成年大鼠相同重量肺组织所提取的总RNA中 ,均扩增出一条密度相同、长度约为 2 2 0bp的cDNA片段。在所推导氨基酸序列中与hBD - 2氨基酸相同率为48 6 % (17/ 35 ) ,与rBD - 1氨基酸残基的相同率为 31% (11/ 35 )。其成熟分子链长 35个氨基酸残基 ,含 β -防御素共有的且排列次序相同的 6个典型的半胱氨酸和其它保守氨基酸残基。结论 :本实验表明不同发育阶段大鼠肺组织均表达β - 防御素 - 2mRNA 。 展开更多
关键词 免疫学 大鼠 肺组织 基因表达 内源性抗生 β-防御-2
下载PDF
意大利蜜蜂防御素-2蛋白序列分析及表达特性研究
8
作者 邓晓银 于点点 +3 位作者 王珏 张旭凤 郭媛 郭丽娜 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1454-1462,共9页
【目的】对意大利蜜蜂(Apis mellifera)防御素-2蛋白(Defensin-2,Def-2)进行蛋白序列分析和表达特性研究,以期为意大利蜜蜂防御素基因的免疫防御机制、发育和代谢途径研究提供理论基础。【方法】利用生物信息学在线网站及软件对Def-2蛋... 【目的】对意大利蜜蜂(Apis mellifera)防御素-2蛋白(Defensin-2,Def-2)进行蛋白序列分析和表达特性研究,以期为意大利蜜蜂防御素基因的免疫防御机制、发育和代谢途径研究提供理论基础。【方法】利用生物信息学在线网站及软件对Def-2蛋白进行预测分析,并采用实时荧光定量PCR对意大利蜜蜂不同发育时期(幼虫期、蛹期及1、5、10、15、20、25和30 d成年期工蜂)的基因相对表达量进行检测分析。【结果】意大利蜜蜂防御素-2基因(Def-2)编码104个氨基酸残基,相对分子量为11858.90 Da,理论等电点(pI)为8.54,为两性不稳定蛋白。该蛋白N-末端有一段含21个氨基酸的信号肽,存在1个跨膜结构域,亚细胞主要定位于内质网、液泡和高尔基体,无糖基化位点,存在15个磷酸化位点,其二级结构以无规卷曲(54.81%)为主、延伸链(28.85%)分布较多,α-螺旋(16.35%)分布较少,蛋白序列高度保守,与Def-1、GB44032-PA、Dl-2、Imd等蛋白存在基因互作关系,具有防御蛋白样结构域(DEFL),结构域采用以半胱氨酸稳定的α/β支架为特征的结构,亲缘关系与小蜜蜂极为相近。Def-2基因在意大利蜜蜂不同发育时期的表达水平存在差异且随日龄增大而升高,30 d的相对表达量显著高于其他日龄(P<0.05)。【结论】意大利蜜蜂Def-2蛋白属于两性不稳定蛋白,参与细胞间信号传输并维持细胞正常形态;蛋白序列高度保守,亲缘关系与小蜜蜂最近,且该基因在30 d成年期工蜂中高丰度表达,推测其可能调节免疫基因转运而影响蜜蜂的免疫识别过程。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 防御-2蛋白 表达差异 实时荧光定量PCR
下载PDF
猪防御素基因pBD-2在大肠杆菌中的重组和融合表达 被引量:5
9
作者 徐海涛 马立保 +2 位作者 何启盖 廖冰麟 任芬芬 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第5期101-104,共4页
哺乳动物防御素是动物机体在抵御病原微生物的防御反应中产生的一类重要的抗菌肽物质,具有十分广泛的抗菌谱,在先天免疫上起重要作用。本研究根据已报道的pBD-2基因cDNA序列,合成了3条基因片段(1、2、3)。片段1、2和片段2、3各有15个碱... 哺乳动物防御素是动物机体在抵御病原微生物的防御反应中产生的一类重要的抗菌肽物质,具有十分广泛的抗菌谱,在先天免疫上起重要作用。本研究根据已报道的pBD-2基因cDNA序列,合成了3条基因片段(1、2、3)。片段1、2和片段2、3各有15个碱基互补配对,PCR扩增延伸得到pBD-2基因,将pBD-2基因克隆至原核表达载体pGEX-KG,成功地在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出pBD-2融合蛋白。pBD-2基因的成功表达为进一步研究其抗菌活性打下了基础。 展开更多
关键词 β-防御-2 原核表达 融合蛋白
下载PDF
人类β-防御素2在口腔扁平苔藓病损中表达的研究 被引量:5
10
作者 肖丽婷 邹杰 +2 位作者 陶人川 杨亦萍 曾启新 《广西医学》 CAS 2011年第5期516-519,共4页
目的探讨口腔扁平苔藓(OLP)患者病损中的人类β-防御素2(hBD-2)的表达,以分析hBD-2在OLP发病机制与上皮抗感染免疫中的作用。方法采用免疫组织化学技术(IHC)和反转录聚合酶链式技术(RT-PCR),检测25例OLP病损组织、7例对照组织中hBD-2多... 目的探讨口腔扁平苔藓(OLP)患者病损中的人类β-防御素2(hBD-2)的表达,以分析hBD-2在OLP发病机制与上皮抗感染免疫中的作用。方法采用免疫组织化学技术(IHC)和反转录聚合酶链式技术(RT-PCR),检测25例OLP病损组织、7例对照组织中hBD-2多肽的表达,并进行分析。结果 hBD-2在所有样本中均出现了阳性胞浆染色,健康口腔黏膜组中hBD-2蛋白为弱阳性染色,与呈强阳性染色的OLP组差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR检测结果显示,所有样本均出现了hBD-2的cDNA电泳条带,在健康口腔黏膜组中呈微弱表达,在OLP组织中表达明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论健康口腔黏膜组织也有少量hBD-2表达,提示其作为机体先天性免疫的组成部分,在维持口腔黏膜健康上具有一定作用。在OLP的病理过程中hBD-2可能呈炎性诱导上调表达而参与了OLP的免疫发病过程。 展开更多
关键词 口腔扁平苔藓 人类β-防御2 唾液 上皮
下载PDF
肿瘤坏死因子-α、人类β-防御素-1基因多态性与慢性阻塞性肺病相关性的研究 被引量:10
11
作者 都勇 孙书明 李玉 《中国临床医学》 北大核心 2008年第3期329-331,共3页
目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)、人类β-防御素-1(hBD-1)基因多态性与慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pul-monary disease,COPD)之间的关系及两基因之间的交互作用。方法:采用病例对照研究和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(... 目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)、人类β-防御素-1(hBD-1)基因多态性与慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pul-monary disease,COPD)之间的关系及两基因之间的交互作用。方法:采用病例对照研究和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测COPD患者TNF-α、hBD-1基因型频率分布。结果:COPD组和健康对照组TNF-α-308突变型基因频率在两组对象中的频率分别为16.41%和8.04%,两组比较有统计学差异(P=0.006);hBD-1exon-2突变型基因频率在两组中的频率分别为15.23%和6.70%,两者差异有统计学意义(P=0.003);有TNF-α-308SNP而无hBD-1exon-2SNP时的相对危险度为1.786,无TNF-α-308SNP而有hBD-1exon-2SNP时的相对危险度值为7.082,TNF-α-308SNP、hBD-1ex-on-2SNP均存在时的相对危险度为7.836。结论:TNF-α、hBD-1基因多态性与COPD发生相关,TNF-α-308SNP、hBD-1ex-on-2SNP在COPD的发病过程中无交互作用。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺病 肿瘤坏死因子-Α 人类β-防御 基因多态性
下载PDF
β-防御素2基因腺病毒表达载体的构建与真核表达 被引量:3
12
作者 石卓 舒强 +3 位作者 赵正言 陈智 姚航平 方向明 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2006年第6期590-595,共6页
目的:探讨重组腺病毒载体在真核细胞中稳定表达阳离子抗菌肽——β-防御素2的可行性。方法:采用RT-PCR方法扩增得到大鼠β-防御素2(rBD 2)基因片段,定向插入到腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,重组质粒pShuttle-CMV-rBD 2转化E.coli B J51... 目的:探讨重组腺病毒载体在真核细胞中稳定表达阳离子抗菌肽——β-防御素2的可行性。方法:采用RT-PCR方法扩增得到大鼠β-防御素2(rBD 2)基因片段,定向插入到腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,重组质粒pShuttle-CMV-rBD 2转化E.coli B J5183-AD-1后,与腺病毒基因组质粒pA dE asy-1发生同源重组,重组质粒pA dE asy-rBD 2转染293细胞进行腺病毒表达载体的包装。将包装成功的腺病毒感染cos-7细胞,并建立SD大鼠腺病毒感染模型,进行β-防御素2多肽的体外和体内表达,采用W estern b lot与免疫组化方法检测其表达。结果:重组腺病毒表达载体构建成功,包含大鼠β-防御素2基因,滴度达到109PFU/m l,W estern b lot与免疫组化方法分别检测到β-防御素2在SD大鼠体外、体内的表达。结论:重组腺病毒载体能在真核细胞中稳定表达阳离子抗菌肽——β-防御素2。 展开更多
关键词 防御类/遗传学 腺病毒 人/遗传学 免疫组织化学 基因表达 β-防御 抗菌肽 腺病毒表达载体 基因重组 基因治疗
下载PDF
大肠杆菌感染对大鼠肺组织β-防御素-2基因表达的负相调节作用 被引量:2
13
作者 陈新年 黄宁 +1 位作者 吴琦 王伯瑶 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期83-85,I005,共4页
目的 :探讨细菌对大鼠 β -防御素 - 2 (rBD - 2 )基因的表达调控。 方法 :将大肠杆菌E .coliML -35p和绿脓杆菌ATCC 2 785 3大鼠气管内接种 ,于 2 4h后提取肺组织RNA ,用逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)法和Northernblot检测大鼠 β -... 目的 :探讨细菌对大鼠 β -防御素 - 2 (rBD - 2 )基因的表达调控。 方法 :将大肠杆菌E .coliML -35p和绿脓杆菌ATCC 2 785 3大鼠气管内接种 ,于 2 4h后提取肺组织RNA ,用逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)法和Northernblot检测大鼠 β -防御素 - 2基因的表达变化。 结果 :气管内接种大肠杆菌 2 4h后使大鼠肺组织 β -防御素- 2mRNA的表达受到显著抑制 ,绿脓杆菌对其基因的表达却没有抑制作用。结论 :大肠杆菌感染可负相调节大鼠肺组织rBD - 2mRNA的表达。 展开更多
关键词 肺感染 基因表达 肠杆菌科 β-防御-2基因 炎症反应
下载PDF
小鼠β-防御素2与甲型流感病毒HA1融合基因真核载体的构建与表达 被引量:2
14
作者 朱元军 张卫东 +4 位作者 李虹 王丰平 钟利 蒋忠华 李明远 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期8-10,15,共4页
目的:构建小鼠β-防御素2(mBD2)与甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)血凝素(HA1)基因融合表达的真核载体,并检测其在HEK293细胞中的表达。方法:用PCR技术分别从质粒pcDNA3.1(+)/mBD2和pcDNA3.1(+)/HA1中扩增mBD2与HA1基因片段,再用重叠延伸PC... 目的:构建小鼠β-防御素2(mBD2)与甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)血凝素(HA1)基因融合表达的真核载体,并检测其在HEK293细胞中的表达。方法:用PCR技术分别从质粒pcDNA3.1(+)/mBD2和pcDNA3.1(+)/HA1中扩增mBD2与HA1基因片段,再用重叠延伸PCR法(overlap-PCR)将HA1与mBD2通过一段多肽接头Gly4Ser融合为mBD2-HA1。将mBD2-HA1融合基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切、PCR和测序鉴定正确后,用脂质体转入HEK293细胞,通过免疫荧光检测其瞬时表达。结果:融合基因mBD2-HA1的真核表达载体pcDNA3.1(+)/mBD2-HA1构建成功,并在HEK293细胞中成功表达融和蛋白。结论:融合基因mBD2-HA1真核表达载体的成功构建,为研究防御素在流感病毒核酸疫苗中的佐剂作用奠定了基础。 展开更多
关键词 β-防御 流感病毒 融合基因 重叠延伸PCR 免疫荧光
下载PDF
白芍总苷联合曲安奈德治疗口腔扁平苔藓患者的疗效及对血清IL-17、人类β-防御素-2水平的影响 被引量:9
15
作者 王婷婷 李贞 +2 位作者 丁莉 李阳 漆明 《宁夏医科大学学报》 2018年第11期1269-1273,共5页
目的观察白芍总苷胶囊治疗口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)患者的疗效及对血清白介素-17(IL-17)、人类β-防御素-2(human beta-defensin-2,HBD-2)水平的影响。方法将60例符合纳入标准的口腔扁平苔藓患者随机分为治疗组和对照组各3... 目的观察白芍总苷胶囊治疗口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)患者的疗效及对血清白介素-17(IL-17)、人类β-防御素-2(human beta-defensin-2,HBD-2)水平的影响。方法将60例符合纳入标准的口腔扁平苔藓患者随机分为治疗组和对照组各30例,对照组局部注射曲安奈德,治疗组在此基础上口服白芍总苷胶囊,同时纳入30例健康对照组。治疗1个月后评价其临床疗效及受检者血清IL-17、HBD-2水平。结果两组临床疗效比较,治疗组总有效率(93%)高于对照组(76%)(P<0.05)。OLP患者组血清IL-17、HBD-2水平较健康对照组升高(P<0.05)。治疗组和对照组患者治疗后血清IL-17、HBD-2水平均低于同组治疗前(P<0.05);治疗后,治疗组患者血清IL-17水平低于对照组(P<0.05),HBP-2水平两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论白芍总苷胶囊联合曲安奈德治疗口腔扁平苔藓有较好的疗效,其作用与下调血清IL-17、HBD-2有关。 展开更多
关键词 白芍总苷胶囊 人类β-防御-2 IL-17 口腔扁平苔藓
下载PDF
人β防御素-2基因的合成及其真核表达载体的构建 被引量:2
16
作者 雷撼 钱桂生 +1 位作者 黄桂君 吴国明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期921-922,共2页
目的 合成人 β防御素 2 (Humanβ defensin 2 ,hBD 2 )基因并构建其真核表达载体 ,为hBD 2基因的转染和表达奠定基础。方法 根据GenBank中的hBD 2结构基因序列 ,设计合成了 3条长度为 82bp的长寡聚核苷酸引物 (H1、H2、H3 ) ,用PCR... 目的 合成人 β防御素 2 (Humanβ defensin 2 ,hBD 2 )基因并构建其真核表达载体 ,为hBD 2基因的转染和表达奠定基础。方法 根据GenBank中的hBD 2结构基因序列 ,设计合成了 3条长度为 82bp的长寡聚核苷酸引物 (H1、H2、H3 ) ,用PCR延伸扩增的方法进行全长为 2 11bp的基因合成 ;PCR产物经双酶切后 ,克隆入真核表达载体pLXSN并导入细菌扩增。结果 PCR产物和重组载体经凝胶电泳及测序分析 ,证实合成的基因与原序列一致 ,并成功克隆到真核表达载体pLXSN上。结论 用PCR延伸扩增法合成基因 ,能方便快捷地获得目的基因片段 ,提高了基因合成的准确性 。 展开更多
关键词 人Β防御-2 基因合成 PCR延伸扩增方法 真核表达载体
下载PDF
血清β-防御素-2、维生素E联合超敏C反应蛋白对急性下呼吸道感染患儿的诊断价值 被引量:1
17
作者 饶鸣皋 《中国临床医生杂志》 2024年第1期107-110,共4页
目的 探讨血清β-防御素-2(hBD-2)、维生素E联合超敏C反应蛋白(hs-CRP)对急性下呼吸道感染的诊断价值。方法 以2021年1月至2022年4月在安徽省合肥市第八人民医院确诊治疗的86例急性下呼吸道感染患儿作为病例组,根据检测结果将86例急性... 目的 探讨血清β-防御素-2(hBD-2)、维生素E联合超敏C反应蛋白(hs-CRP)对急性下呼吸道感染的诊断价值。方法 以2021年1月至2022年4月在安徽省合肥市第八人民医院确诊治疗的86例急性下呼吸道感染患儿作为病例组,根据检测结果将86例急性下呼吸道感染患儿分为病毒性感染组(55例)和细菌性感染组(31例),另选择同期34例健康体检者为对照组。检测三组患儿血清hBD-2、维生素E及hs-CRP表达,应用Pearson相关性分析血清hBD-2、维生素E及hs-CRP表达与急性下呼吸道感染的相关性,最后通过受试者工作特征(ROC)曲线下面积评价血清hBD-2、维生素E及hs-CRP表达对细菌性感染的诊断价值。结果 病例组患儿血清hBD-2和hs-CRP水平明显高于对照组,而维生素E水平明显低于对照组(P<0.05);细菌性感染组患儿血清hBD-2和hs-CRP水平明显高于病毒性感染组,而维生素E水平显著低于病毒性感染组(P<0.05)。相关性结果显示,观察组患儿血清hBD-2和hs-CRP与细菌性感染的发生呈正相关(P<0.001),而维生素E则与细菌性感染的发生呈负相关(P<0.001)。ROC结果显示,血清hBD-2、维生素E及hs-CRP并联联合预测细菌性感染发生的灵敏度=90.32%,特异度=94.55%,表明诊断结果具有较高的真实性;而Kappa=0.853,表明诊断结果与实际结果高度一致,具有临床应用价值。结论 血清hBD-2、维生素E、hs-CRP均可对小儿急性下呼吸道感染疾病的临床鉴别诊断提供较好的辅助诊断价值,三者并联联合试验,诊断结果与实际结果高度一致,具有临床应用价值。 展开更多
关键词 急性下呼吸道感染 细菌性感染 血清β-防御-2 维生E 超敏C反应蛋白
下载PDF
人类β-防御素-1基因多态性与慢性阻塞性肺疾病关系的研究 被引量:3
18
作者 孙丽蓉 张敏 +4 位作者 李冬梅 刘柱 李水霞 高扬 张建玲 《医学研究杂志》 2010年第10期81-84,共4页
目的探讨人类β-防御素-1(hBD-1)基因多态性与慢性阻塞性肺病(chronic obstuctive pulmonary disease,COPD)之间的关系。方法采用病例对照研究和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测COPD患者hBD-1基因型频率分布。结... 目的探讨人类β-防御素-1(hBD-1)基因多态性与慢性阻塞性肺病(chronic obstuctive pulmonary disease,COPD)之间的关系。方法采用病例对照研究和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测COPD患者hBD-1基因型频率分布。结果 COPD组C、G等位基因频数分别是85.25%和14.75%,对照组C、G等位基因频数分别是73.33%和26.67%,C等位基因在COPD组的频数明显高于健康对照组(χ2=5.237,P<0.05,OR:2.101,95%CI:1.104~3.998)。结论 hBD-1基因668C/G位点基因多态性与中国北方汉族人群COPD易感性有相关性,C等位基因可能是COPD的高危险基因。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺病 人类β-防御 基因多态性
下载PDF
肺结核患者血清甲壳质酶蛋白40、β-防御素-2水平及其对肺结核的诊断价值
19
作者 李春晓 李怀臣 《传染病信息》 2024年第2期142-146,共5页
目的探索肺结核患者血清甲壳质酶蛋白40(chitinase protein 40,YKL-40)、β-防御素-2(human beta defensin 2,HBD-2)水平及其对肺结核的诊断价值。方法选取2021年6月—2023年6月山东省立医院收治的86例肺结核患者为肺结核组,根据痰涂片... 目的探索肺结核患者血清甲壳质酶蛋白40(chitinase protein 40,YKL-40)、β-防御素-2(human beta defensin 2,HBD-2)水平及其对肺结核的诊断价值。方法选取2021年6月—2023年6月山东省立医院收治的86例肺结核患者为肺结核组,根据痰涂片结果分为活动性肺结核组(n=50)和非活动性肺结核组(n=36),另选取86例来自我院体检中心的健康受试者作为对照组。检测所有受试者血清中YKL-40、HBD-2水平并分析肺结核患者血清中YKL-40与HBD-2的相关性;采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清中YKL-40、HBD-2水平对肺结核及活动性肺结核的诊断价值。结果肺结核组血清YKL-40、HBD-2水平高于对照组(P均<0.05);活动性肺结核组血清YKL-40、HBD-2水平高于非活动性肺结核组(P均<0.05)。肺结核患者血清中YKL-40与HBD-2的水平呈正相关(r=0.601)。YKL-40、HBD-2及2者联合诊断肺结核的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.895、0.922、0.962,2者联合诊断优于单独诊断;YKL-40、HBD-2及2者联合诊断活动性肺结核的AUC分别为0.891、0.881、0.959,2者联合诊断优于单独诊断。结论肺结核患者血清YKL-40、HBD-2水平显著升高,且随病情加重而升高,2者对肺结核及活动性肺结核的具有一定的诊断价值。 展开更多
关键词 肺结核 甲壳质酶蛋白40 β-防御-2 诊断
下载PDF
人β-防御素-2基因5′-端转录调控区DNA片段的克隆及序列初步分析 被引量:1
20
作者 汪宇辉 黄宁 +1 位作者 吴琦 王伯瑶 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1565-1566,共2页
关键词 β-防御-2基因 5′-端转录调控区 DNA片段 克隆 序列分析 基因转录
下载PDF
上一页 1 2 32 下一页 到第
使用帮助 返回顶部