二氢乳清酸脱氢酶抑制剂ASLAN003抗戊型肝炎病毒的研究

研究二氢乳清酸脱氢酶抑制剂ASLAN003对戊型肝炎病毒(HEV)复制的影响,为抗HEV治疗提供新型候选药物。用带有高斯荧光素酶的HEV复制子模型研究ASLAN003是否具有抗HEV作用,实时荧光定量PCR和间接免疫荧光检测ASLAN003对HEV RNA复制以及衣壳蛋白表达的抑制作用,细胞毒性试验和间接免疫荧光计算ASLAN003的半数毒性浓度(CC_(50))和半数抑制浓度(IC_(50))。结果表明,ASLAN003在0.2~50μmol/L浓度范围内能显著抑制HEV复制子在HEK 293T和Huh7细胞内的复制;ASLAN003在1μmol/L浓度能有效抑制HEV RNA复制,使其下降50%;在0.4μmol/L的浓度能够显著抑制衣壳蛋白ORF2的表达。通过对ASLAN003的细胞毒性和抑制HEV效果进行研究发现,其CC_(50)为294μmol/L,而IC_(50)为0.231μmol/L。说明ASLAN003能够有效抑制HEV复制,提示其可作为潜在抗病毒药物。

二氢乳清酸脱氢酶在恶性肿瘤进展中的作用机制研究进展

二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)是一种黄素依赖性的代谢酶,在嘧啶代谢从头合成途径中将二氢乳清酸氧化成乳清酸。同时它位于线粒体上,与细胞氧化磷酸化存在紧密联系。此外,DHODH也是铁死亡途径的一个重要抑制因子。本文主要阐述DHODH影响恶性肿瘤进展的内在作用机制,包括其在嘧啶从头合成、氧化磷酸化及铁死亡等方面的重要作用,为DHODH作为恶性肿瘤临床治疗的潜在靶点提供依据。

二氢乳清酸脱氢酶在肿瘤治疗中的研究进展

肿瘤细胞高能量、高营养需求反映肿瘤代谢微环境具有其特殊性,代谢重编程可使肿瘤细胞快速增殖、侵袭、迁移,可以是肿瘤发展内驱力,并能在营养缺乏的微环境中存活。与健康细胞比较,肿瘤细胞不断分裂扩增过程中需要足够的核苷酸。二氢乳清酸脱氢酶(dihydroorotate dehydrogenase,DHODH)是从头合成嘧啶核苷酸限速酶,其抑制剂特立氟胺(Teriflunomide)、布喹那(Brequinar)和来氟米特(Leflunomide)等可抑制核苷酸生成,致细胞停滞于S期,因此DHODH可作为肿瘤治疗靶点。

二氢嘧啶脱氢酶抑制剂吉美拉西的合成

目的合成吉美拉西并改进其合成工艺。方法以丙二腈为起始原料,经缩合、环合、氯化、水解等5步反应制得吉美拉西。结果所得产物经元素分析、紫外光谱、红外光谱、核磁共振谱及质谱等确证了结构。结论改进后的合成路线可行。

人二氢乳清酸脱氢酶抑制剂在抗炎方面的研究进展

一直以来,炎症都是人类生活的一大杀手,面对炎症问题的愈发严重,研究抗炎方面的药物迫在眉睫。近年来,研究表明人二氢乳清酸脱氢酶(human dihydroorotate dehydrogenase,h DHODH)与多种炎性疾病有着密切的关系,抑制h DHODH可以抑制炎症的发生发展。本文结合前期研究,就h DHODH抑制剂在抗炎方面的研究做一综述。

异柠檬酸脱氢酶基因突变在急性髓细胞白血病发生中的作用

异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)是参与三羧酸循环重要的代谢酶。近年来,在急性髓细胞白血病(acute myeloidleukemia,AML)中IDH成为突变最频繁的肿瘤代谢基因。与其他基因的突变不同,该基因突变后获得的新功能可催化α-酮戊二酸(α-ketoglutarate,α-KG)产生肿瘤代谢物二羟基戊二酸(D-2-hydroxyglutarate,D-2-HG)。而细胞中升高的D-2-HG可直接通过遗传表观调控、细胞信号转导、骨髓微环境变化等方式影响骨髓细胞的分化和增殖,诱发AML。目前,新型的IDH2抑制剂AG-221和IDH1抑制剂已成为靶向治疗AML患者中IDH突变的临床一线药物。该文主要针对IDH突变及其突变特点、突变产生的代谢物对AML的形成机制、肿瘤代谢物的代谢通路以及IDH抑制剂的研究进展进行综述。

二氢乳清酸脱氢酶抑制剂BAY2402234的新合成工艺及手性质量控制

文章阐述了制备二氢乳清酸脱氢酶抑制剂BAY2402234的新方法。以苄氧基乙酸乙酯为原料,肼解后与异氰酸乙酯发生亲核加成,并在碱性条件下闭环得5-[(苄氧基)甲基]-4-乙基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(3),3经2步亲核取代、三氯化硼脱除苄基、羟基缩醛化得到关键中间体4-[4-乙基-5-氧代-3-[[(四氢-2H-吡喃-2-基)氧基]甲基]-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基]-5-氟-2-[[(S)-1,1,1-三氟丙烷-2-基]氧基]苄腈(7),7经碱性水解后与2-氯-6-氟苯胺发生酰胺缩合,再脱去保护基得到目标产物,高效液相色谱(HPLC)纯度99.71%,总收率17.34%(以苄氧基乙酸乙酯计)。同时建立了BAY2402234与其对映异构体的手性控制方法,新法合成的终产物ee值大于99.9%。

二氢乳清酸脱氢酶抑制剂适应症及其抗肿瘤临床研究进展

二氢乳清酸脱氢酶(dihydroorotate dehydrogenase,DHODH)催化二氢乳清酸转化为乳清酸,是嘧啶核苷酸从头合成途径的限速酶。DHODH与自身免疫疾病、病毒感染、肿瘤等多种疾病的发生发展密切相关,已有DHODH抑制剂被批准用于治疗自身免疫疾病,而肿瘤是继自身免疫疾病后又一具有上市潜力的适应症。本文就DHODH抑制剂的适应症及其抗肿瘤临床研究进展进行综述。

二氢乳清酸脱氢酶抑制剂的设计、合成和构效关系研究

本文将实验室前期发现的1-丁酰基-3-(4-氯苯基)-5-甲硫基-1H-1,2,4-三氮唑作为人类二氢乳清酸脱氢酶(Hs DHODH)抑制剂设计的苗头化合物,为开展结构优化,首先培养并解析了苗头化合物与Hs DHODH的复合物晶体结构;在此基础上,设计合成了一系列基于苗头结构新颖的Hs DHODH抑制剂。活性结果表明,新合成的目标化合物对Hs DHODH具有较好的抑制活性,其中1-呋喃甲酰基-3-(4-三氟甲基苯基)-5-乙硫基-1H-1,2,4-三氮唑的IC50值达到1.50μmol·L^(-1)。结合生物学活性测试及复合物晶体结构对该系列化合物的构效关系进行了分析与总结,为1H-1,2,4-三氮唑衍生物Hs DHODH抑制剂的进一步优化提供了借鉴经验。

恶性疟原虫二氢乳清酸脱氢酶抑制剂体外诱导恶性疟原虫耐药的实验研究

目的分析恶性疟原虫二氢乳清酸脱氢酶(Plasmodium falciparum dihydroorotate dehydrogenase,PfDHODH)抑制剂(二氢噻吩酮类化合物,编号50,以下简称PfDHODH抑制剂50)对体外培养恶性疟原虫的作用特点及其诱导耐药的可能机制。方法恶性疟原虫氯喹敏感株(3D7株)和氯喹抗性株(Dd2株)同步化培养后分为不加药对照组、环状体期加药组和大滋养体期加药组,药物终浓度为80 nmol/L。分别在同步化后0 h(环状体期)、24 h(大滋养体期)、42 h涂薄血膜片镜检;通过逐步加大药物浓度的方法,体外诱导产生耐药虫株,3个月后经有限稀释培养,获得单克隆耐药虫株。采用SYBR GreenⅠ染料法检测各耐药虫株对PfDHODH抑制剂50、氯喹和青蒿素的半数抑制浓度(IC_(50));PCR扩增各耐药虫株Pfdhodh基因并测序,分析其突变情况。结果与不加药对照组相比,环状体期加药组恶性疟原虫从滋养体到裂殖体的发育受到明显抑制,大滋养体期加药组恶性疟原虫呈现明显的空泡化,核质密度大大降低。通过体外诱导并经有限稀释培养,获得44株PfDHODH抑制剂50的单克隆耐药虫株,其中,母本为Dd2、3D7的耐药虫株分别为24和20株,它们对PfDHODH抑制剂50的IC_(50)分别为(2.284±0.096)和(0.678±0.018)μmol/L,较母本虫株的(0.018±0.002)和(0.015±0.002)μmol/L分别提高了近130倍和50倍;对氯喹和青蒿素的IC_(50)分别为(0.011±0.002)、(0.014±0.004)和(0.013±0.003)、(0.012±0.001)μmol/L;与母本Dd2虫株相比,Dd2耐药虫株对氯喹的IC_(50)从(0.072±0.002)μmol/L下降为(0.011±0.002)μmol/L。测序分析结果显示,23株Dd2来源的耐药虫株PfDHODH蛋白氨基酸序列发生了G181D的点突变,另有1株除G181D的点突变外,还产生了K32N的点突变;3D7来源的耐药虫株未发现相应突变。结论体外诱导获得PfDHODH抑制剂50的单克隆耐药虫株,G181D的点突变可能是导致恶性疟原虫高水平耐受PfDHODH抑制剂50的重要分子机制。

一类来氟米特类似物二氢乳清酸脱氢酶抑制剂作用模式的理论研究

目的:来氟米特是当今临床上类风湿关节炎疾病治疗中最具有显著病情缓解作用的抗风湿药物之一。本文分析二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)与其抑制剂的相互作用模式,以指导新型抗风湿药物的开发。方法:从1D3H晶体结构出发,采用基于配体-受体复合物相互作用的药效团研究方法,建立来氟米特活性代谢物A771726的药效团模型;以晶体中来氟米特活性代谢物A771726为模版,构建42个来氟米特类似物DHODH抑制剂的结构,经结构叠合,采用自组织分子力场分析方法(SOMFA),建立来氟米特活性代谢类似物DHODH抑制剂三维定量构效关系模型;并探讨DHODH与其抑制剂的相互作用模式。结果与结论:建立了合理的来氟米特活性代谢物药效团模型和DHODH抑制剂三维定量构效关系,并且2种方法所得的模型吻合。确定的DHODH与抑制剂的作用模式,可以指导抑制剂的设计,用于开发新型抗风湿药物。

微生物来源的二氢乳清酸脱氢酶抑制剂F01WB-1315A,B

【目的】从微生物次生代谢产物中筛选免疫相关疾病治疗药物重要靶点——二氢乳清酸脱氢酶的抑制剂。【方法】利用自建的快速、高效的二氢乳清酸脱氢酶抑制剂的高通量筛选方法,从4560株真菌菌株中筛选阳性菌株。阳性菌株的发酵产物进行分离纯化获得活性化合物,再通过对活性化合物的紫外、质谱、核磁等理化数据的分析进行结构鉴定。【结果】筛选分离得到2个活性化合物F01WB-1315A和F01WB-1315B。F01WB-1315A对二氢乳清酸脱氢酶有强的抑制活性,IC50=0.07μg/mL,于20μg/mL浓度下对体外经ConA刺激活化的脾淋巴细胞增殖只有31.62%的抑制作用。F01WB-1315B对二氢乳清酸脱氢酶也有较强的抑制活性,IC50=0.51μg/mL,并且在20μg/mL浓度下对体外经ConA刺激活化的脾淋巴细胞增殖有98.12%的抑制作用。经过结构解析确定F01WB-1315A与壳二孢呋喃酮(Ascofuranone)结构相同,F01WB-1315B与壳二孢氯素(Ascochlorin)结构相同。【结论】F01WB-1315A和B在分子水平和细胞水平均表现出很好的免疫抑制活性,它们对二氢乳清酸脱氢酶的抑制活性国内外未见报道。

噻唑类衍生物二氢乳清酸脱氢酶抑制剂的三维定量构效关系研究

目的应用三维定量构效关系(3D-QSAR)研究噻唑类衍生物结构的二氢乳清酸脱氢酶抑制活性,为该类药物的设计和筛选提供可靠的理论依据。方法针对38个以噻唑为基本骨架的二氢乳清酸脱氢酶抑制剂,分别应用分子力场分析(Co MFA)和比较分子相似性指数分析(Co MSIA)2种经典的方法进行了三维定量构效关系(3D-QSAR)研究,建立相关模型,验证模型的预测能力,三维等势图分析噻唑类衍生物结构与活性的关系。结果 Co MFA模型的交叉验证系数q2为0.796,相关系数r2为0.978;Co MSIA模型的q2以及r2分别为0.721和0.976;2种模型对化合物的活性预测与实际值接近;三维等势图可以全面直观的分析化合物结构对其活性的影响。结论该3D-QSAR模型三维等势图揭示了结构特征与抑制活性的关系,模型具有较好的预测能力和较强的稳定性,为进一步开发研究打下了较好的基础。

二氢乳清酸脱氢酶抑制剂前药的合成和稳定性及活性评价

本文以课题组前期发现的高活性DHODH抑制剂A为基础,依据前药合成策略,对其羧基进行酯化修饰得到12个前药分子,旨在优化化合物A的稳定性。分子水平抑制活性显示12个前药分子中只有A1~A5有微弱活性,与其作用机制和前药设计相符;随后评价了A1~A12在有机溶剂甲醇和pH为2.0、9.0的缓冲液中的稳定性,结果显示A12在甲醇中能较好的抑制先导分子内成环,A1~A8在酸性条件下易于水解,A9~A12在碱性条件易于水解;最后评价了A1~A12的细胞增殖抑制活性,其中A12表现出很好活性,其IC_(50)值为0.63μmol·L^(-1),与布奎那相当。这些结果为开展进一步体内活性研究奠定了基础。

新型口服二氢乳清酸脱氢酶抑制剂——IMU-838

IMU-838是由德国Immunic AG公司研发的一种新型口服二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)抑制剂。IMU-838具有抗炎和广谱抗病毒作用,目前有多项Ⅱ期临床试验正在进行,以评估IMU-838对复发-缓解型多发性硬化症、原发性硬化性胆管炎、溃疡性结肠炎、类风湿关节炎和新型冠状病毒肺炎的治疗效果。在2020年8月结束的针对复发-缓解型多发性硬化症的Ⅱ期临床试验中,IMU-838达到了所有的主要和关键次要终点。此外,IMU-838的安全性和耐受性均表现良好。本文将对IMU-838的基本信息、作用机制、代谢性质、安全性和临床前研究及临床试验作一概述,以期为临床治疗和药物研究开发提供参考。

二氢乳清酸脱氢酶抑制剂在抗癌领域的研究进展

二氢乳清酸脱氢酶(Dihydroorotate dehydrogenase , DHODH)是一种从头嘧啶合成途径的酶,为增殖所必需的RNA/DNA合成提供核苷酸。在哺乳动物细胞中,DHODH定位于线粒体,通过辅酶Q与呼吸链相连。在这里,我们讨论了DHODH抑制剂在癌症的发生和发展中的作用。我们总结了DHODH生物学的最新发现,在开发用于癌症治疗的新型特异性DHODH抑制剂方面取得的进展,以及对DHODH抑制后果的机理见解,希望能为临床癌症的治疗提供理论依据。

二氢乳清酸脱氢酶作为抗肿瘤靶点的研究进展

二氢乳清酸脱氢酶(dihydroorotate dehydrogenase,DHODH)是存在于线粒体内膜的一种含铁的黄素依赖酶,这种酶催化嘧啶核苷酸从头合成途径的第4步反应。而嘧啶核苷酸可用于DNA、RNA、糖蛋白和磷脂生物合成,对于细胞代谢和细胞增殖至关重要。近年来的研究表明,DHODH与多种肿瘤的发生、发展密切相关,抑制或下调DHODH可以降低肿瘤细胞增殖,诱导其凋亡或者增加其他靶点药物的抗肿瘤效果。该文结合所在实验室目前的研究成果及进展,就DHODH作为治疗恶性肿瘤靶点的相关机制及当前DHODH抑制剂的研究进展作一综述。

3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸合成概述

琥珀酸脱氢酶抑制剂(SDHI)类杀菌剂因其持效性和稳抗性显著,3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸作为该类杀菌剂的中间体在未来几十年具有相当广阔的市场前景。综合国内外文献研究,探讨了3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸各合成工艺方法,并对比了各种方法的优缺点,对3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸合成方法的发展进行了展望。

新型小分子免疫抑制剂研究进展

目前临床上应用的免疫抑制剂大多来源于微生物的次生代谢产物,如环孢素、他克莫司等,它们在器官移植和自身免疫系统疾病方面疗效显著,但其不良反应限制了其广泛应用。近年来研究发现了许多高活性、低不良反应的新型小分子免疫抑制剂。本文以新型小分子免疫抑制剂的作用靶点为分类依据,分别综述了鞘氨醇-1-磷酸(S1P)受体激动剂、二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)抑制剂、蛋白激酶C(PKC)抑制剂和Janus激酶3(JAK3)抑制剂等4类免疫抑制剂的作用机制、研究现状及不良反应等。

近几年开发的类风湿性关节炎治疗药物

类风湿性关节炎是一种多发性常见病 ,由于其病因仍然不明确 ,治疗相当困难。最近几年随着发病机理及某些致炎因子和介质的发现出现了一系列新药。最新一类的特异性COX 2抑制剂 ,包括尼美舒利、美洛昔康、Celecoxib、Rofecoxib、Valdecoxib、Etoricoxib和Parecoxib等 ,它们对COX 2有选择性的抑制作用 ,具有与现有非甾体类抗炎药 (NSAID)相似的镇痛抗炎效果 ,但其胃肠道不良反应发生率明显降低 ;来氟米特被认为是 10余年来开发的第一种专用于类风湿性关节炎能缓解病情的药物 ;TNFα阻断剂包括Etanercept和TNFα单克隆抗体 ,该类药物主要通过阻断TNFα来治疗类风湿性关节炎 ;白介素 1阻断剂包括IL 1Ra、阿那白滞素和重组人白介素 11等 ,该类药物主要是通过调节IL 1α和IL 1β来治疗类风湿性关节炎 ;完全人抗体的Hu Max CD4通过靶向T 细胞上的CD4受体起作用 。