超声心动图联合内皮素-1在人类免疫缺陷病毒感染相关性肺动脉高压早期诊断中的价值研究

目的研究超声心动图联合内皮素-1(ET-1)早期诊断人类免疫缺陷病毒(HIV)感染相关性肺动脉高压(PAH)的临床价值,为临床提供参考。方法选取2018年12月至2021年12月攀枝花学院附属医院收治的60例HIV感染患者为研究对象进行回顾性分析,根据是否存在早期PAH分为观察组(24例,存在PAH)和对照组(36例,无PAH)。记录两组患者超声心动图参数和血清ET-1水平,分析各参数在早期诊断HIV相关性PAH中的价值。结果观察组患者左室舒张末期内径(LVEDD)、心肌做功指数(Tei指数)、右室基底部横径(RVd)、LVEDD/RVd、平均肺动脉压(mPAP)及血清ET-1水平均显著高于对照组,右室面积变化率(FAC)及肺毛细血管楔压(PCWP)显著低于对照组。Pearson线性分析显示,肺毛细血管楔压(PCWP)与Tei指数、LVEDD/RVd及ET-1呈显著负相关,与FAC呈显著正相关(P<0.05)。mPAP与Tei指数、LVEDD/RVd及ET-1呈显著正相关,与FAC呈显著负相关(P<0.05)。血清ET-1与LVEDD/RVd联合检测诊断HIV相关性PAH的曲线下面积(AUC)为0.907(SE=0.054,P=0.002,95%CI=0.769~1.000),敏感度为0.944,特异度为0.750。结论超声心动图LVEDD/RVd联合血清ET-1有助于HIV相关性PAH的诊断,具有较高临床应用价值。

人类免疫缺陷病毒-1B和C亚型Nef蛋白特异性CD8^+ T细胞交叉应答反应的研究

目的:探讨中国人群人类免疫缺陷病毒-1B(H IV-1B亚型)Nef蛋白特异性CD8+T细胞应答在B、C亚型间的交叉反应性。方法:选取51例H IV-1B亚型感染者,采取外周血单个核细胞(PBMC),用合成的54个H IV-1B、C亚型Nef全基因序列肽库作为抗原,酶联免疫斑点吸附试验(ELISpot)方法检测H IV-1B亚型Nef蛋白特异性CD8+T细胞对B、C亚型抗原的应答反应。结果:在产生特异性应答效应的个体中,82.9%(29/35)感染个体同时识别B和C亚型肽段。感染个体在对两个亚型肽段的识别数量及应答强度上无显著差异(P=0.529和P=0.754)。H IV-1B亚型特异性CD8+T细胞能针对70.4%无论B还是C亚型的Nef肽段产生应答反应。被特异性CD8+T细胞同时识别的B、C亚型Nef肽段间氨基酸序列的同源性显著高于仅能被识别的B亚型或C亚型肽段的氨基酸序列(P=0.01)。结论:H IV-1B亚型Nef蛋白特异性CD8+T细胞应答在B、C亚型间具有良好的交叉反应性,能产生交叉反应的氨基酸序列具有较高的亚型间同源性。

P物质、神经激肽-1受体对人类免疫缺陷病毒的调节作用

生活紧张状态和抑郁是HIV感染各阶段直至发展为AIDS的重要辅助因素。Kopnisky等报道心理改变在HIV-1疾病进程中所起的作用．发现在免疫一神经传导中脑部趋化因子特别是SP的重要性。抑郁、焦虑和紧张状态与HIV发展相关，行为状态和脑力活动的改变所引起的免疫应答间接或至少有一部分是通过神经内分泌-免疫途径介导的。紧张状态反应导致神经肽的释放改变．

人类免疫缺陷病毒-1 nef诱导凋亡及下调人类白细胞抗原-I类分子

【目的】研究人类免疫缺陷病毒(HIV)-1 nef调节细胞表面的人类白细胞抗原(HLA)-I类分子及诱导细胞凋亡情况。【方法】将293T细胞分为两组,用脂质体法将含HIV-1 nef基因的质粒及空载体分别转染细胞,Western blot检测HIV-1 nef在转染细胞中的表达,荧光抗体染色结合流式细胞术检测细胞表面的HLA-I类分子表达及细胞凋亡情况。【结果】HIV-1 nef在转染细胞中有表达。转染HIV-1 nef的细胞与转染空载体的细胞经抗HLA-A,B,C-FITC染色后,平均荧光强度分别为205±22及269±15,两者相比有显著性差异(P<0.01);经Annexin V-APC/PI染色后,阳性细胞百分率分别为(60.82±8.32)%及(8.12±5.43)%,两者相比亦有显著性差异(P<0.01)。【结论】HIV-1 nef下调细胞表面的HLA-I类分子及诱导细胞凋亡。

人类免疫缺陷病毒-1母婴传播与免疫关系的研究进展

在感染人类免疫缺陷病毒-1(H IV-1)前后以及在妊娠的不同阶段孕妇及胎儿免疫系统均有巨大变化,而感染H IV-1的孕妇免疫系统的变化及相关免疫因素对H IV-1母婴传播有着很大影响,本文主要对H IV-1母婴传播与免疫的关系加以综述。

抗人类免疫缺陷病毒-1活性小分子生物效应机制的研究

目的 研究小分子化合物大环多胺类MP A、MP B和MP C抗人类免疫缺陷病毒 (HIV) 1的生物活性机制。方法 通过核酸Tm测定及圆二色 (CD)光谱法观察大环多胺类化合物对聚腺尿苷酸PolyA∶PolyU构象的影响 ;核酸断裂实验用琼脂糖凝胶电泳法、流式细胞计数法研究其对细胞凋亡和周期的影响 ;计算机分子模型Docking计算从理论上判断其与TARRNA结合的可能性。 结果 ①MP A、MP B和MP C不仅可引起PolyA∶PolyU构象的变化使其发生断裂 ,而且可抑制Tat RNA相互结合。②MP A、MP B和MP C可影响细胞亚二倍体的含量。③分子模型理论计算结果与实验结果基本一致。结论 大环多胺MP A、MP B和MP C可能通过与病毒基因组RNA的作用抑制HIV 1RNA与Tat蛋白的结合而发挥抗HIV 1的活性。

14758例住院女性人类免疫缺陷病毒感染监测分析

目的探讨玉林市妇幼保健院住院女性人类免疫缺陷病毒(HIV)感染监测状况,为防治干预措施提供资料。方法采静脉血经离心后采用酶联免疫吸附(ELISA)法进行HIV筛查,阳性者送检测中心确诊。结果 14758例住院女性中自愿HIV检测6816例,总的检测率为46.19%,HIV感染7例,感染率1.03‰,HIV感染者年龄为24～33岁,中位年龄27.57岁。结论市区女性不愿意接受HIV检测,加强宣传力度,提高检测率;该地HIV感染率较低,仍要加强感染检测与干扰措施。

固有淋巴细胞3型与人类免疫缺陷病毒-1感染

近年来，科研人员在黏膜部位发现一些新细胞群，这类细胞具有3个主要的共同特征：没有重组激活基因（RAG）依赖的重排抗原受体，缺乏髓系细胞和DC细胞的表型分子，具有淋巴细胞的形态［1］；因此，这群细胞被命名为固有淋巴细胞（innate lymphoid cells，ILCs）。ILCs的前体细胞位于胎鼠的肝脏和成年鼠的骨髓［2］，其发育和维持需要细胞因子共用受体γ链［γc，白细胞介素（IL）-2Rγ］、DNA结合抑制因子2（Id2）和IL-7受体α亚单位［3］。ILCs是固有免疫的重要效应细胞，其功能主要表现在淋巴器官的形成和组织重塑；近来研究表明，ILCs亚群在抗微生物免疫的早期阶段具有重要的效应功能［4，5］，其还能帮助组织修复，共生细菌的控制和上皮完整性的维持。ILCs缺乏特异性抗原受体，但能产生一系列细胞因子来实现其效应功能。值得注意的是，ILCs细胞与辅助T细胞亚群类似，具有差异化的细胞因子分泌模式［6］。如部分ILCs细胞被刺激后能分泌Th17细胞相关的细胞因子IL-17和IL-22，而一些细胞亚群被刺激后分泌Th2细胞相关的细胞因子IL-5和IL-13［6］。

蛋白多糖在人类免疫缺陷病毒1型侵袭大脑过程中的作用

在人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)感染者中超过25％表现各种形式的中枢神经系统(CNS)异常症状，研究表明-HIV-1可通过多条途径穿越血-脑屏障。本文侧重于研究HIV-1直接穿越脑组织毛细血管上皮细胞(BMEC)这一途径。鉴于以往研究显示，包括硫酸乙酰肝素蛋白多糖链(HSPG)在内的多种细胞表面分子在HIV-1吸附，

SerpinE1通过JAK/STAT通路调节HIV-1在巨噬细胞中的复制

目的:探讨丝氨酸蛋白酶抑制剂E家族成员1(SerpinE1)与人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)感染的关系,及其作为一种蛋白酶抑制剂在巨噬细胞中对HIV感染过程发挥的作用和机制。方法:按年龄、性别特征成组匹配,招募HIV感染未治疗人群[HIV ART(-)组]和健康对照人群(HC组),并检测外周血单个核细胞(PBMCs)中SerpinE1 mRNA表达量。在THP-1细胞中构建SerpinE1敲低细胞(敲低SerpinE1组),感染或不感染HIV BaL。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测HIV-p24和干扰素(IFN)-α蛋白水平,有参转录组测序分析染毒后敲低SerpinE1组与对照组的差异基因和KEGG富集通路,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测HIV-1 Gag、Toll样受体7(TLR7)、Toll样受体8(TLR8)、白细胞介素-1β(IL-1β)、MX动力蛋白样GTPase 1(MX1)、MX动力蛋白样GTPase 2(MX2)mRNA相对表达量,western blotting法检测JAK2、STAT1、STAT2、SATA4、IL-1β和MX1蛋白表达水平。结果:与HC组比较,HIV ART(-)组SerpinE1表达水平降低,并且在THP-1来源的巨噬细胞中能够被HIV诱导下调(P<0.05);敲低SerpinE1表达下调HIV-p24蛋白表达和HIV Gag mRN A表达,促进IFN-α蛋白分泌水平,促进TLR7、TLR8、Janus激酶2(JAK2)、信号转导子和转录激活子(STAT)蛋白家族的STAT1、STAT2、SATA4及IL-1β、MX1、MX2的表达(P<0.05)。结论:SerpinE1可能通过抑制TLR7和TLR8信号通路的激活,减少IFN-α的释放,进而抑制JAK/STAT通路及其诱导的多种IFN刺激基因和IFN相关因子表达,从而促进了HIV-1的感染复制。

血清TGF-β1、Ang-Ⅱ、CXCL12在HIV/AIDS患者中表达意义探讨

目的:探讨血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、血管紧张素-Ⅱ(Ang-Ⅱ)、趋化因子C-X-C基元配体12(CXCL12)在人类免疫缺陷病毒感染者/艾滋病(HIV/AIDS)患者中表达意义。方法:选取2016年3月—2022年1月本院收治的96例HIV/AIDS患者为研究组,同期体检健康志愿者32例为对照组。分析两组(入组时)、不同临床特征患者血清TGF-β1、Ang-Ⅱ、CXCL12水平及其与免疫学相关指标(CD4^(+)CD45RA^(+)、CD4^(+)CD28^(+)、CD4^(+)CD45RO^(+)、CD4^(+)CD25^(+))、临床特征的相关性。经抗病毒治疗6个月后,比较不同预后患者治疗前后血清各指标水平。结果:与对照组比较,研究组血清TGF-β1、Ang-Ⅱ、CXCL12水平升高(P<0.05);TGF-β1、Ang-Ⅱ、CXCL12与免疫学相关指标密切相关,且与淋巴瘤、临床分期呈正相关(P<0.05);治疗后有效组血清TGF-β1、Ang-Ⅱ、CXCL12水平低于无效组(P<0.05)。结论:血清TGF-β1、Ang-Ⅱ、CXCL12在HIV/AIDS患者中呈高表达,可反映病情严重程度,监测其水平可为临床治疗提供指导依据。

人类免疫缺陷病毒融合抑制剂的研究进展

目的综述了包膜糖蛋白gp41介导的人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)和靶细胞膜的融合机制及近年来HIV-1融合抑制剂的研究现状。方法以近几年国内外有代表性的论文为依据,进行分析、整理和归纳。结果与结论Gp41介导的膜融合是一个多步过程,主要包括gp41解离变构,融合肽插入,发卡结构形成和融合孔出现。针对这一过程设计的药物,可有效地阻断HIV-1病毒和靶细胞的融合,阻止HIV-1侵入细胞,从而抑制病毒的感染。

中国株HIV-1 gag基因核酸疫苗免疫小鼠的实验研究

目的 研究开发针对我国人类免疫缺陷病毒 1(HIV 1)流行株的艾滋病治疗性疫苗 ,构建含中国流行株HIV 1核心蛋白(gag)基因的核酸疫苗 ,并评价其诱导的体液和细胞免疫反应效果。方法 将HIV 1gag基因插入到真核表达载体 pCI neo中 ,构建了真核表达质粒pCI neoGAG ,并经XbaⅠ/SalⅠ双酶切及测序鉴定。将pCI neoGAG和空载体pCI neo免疫BALB/c小鼠 ,通过ELISA检测免疫小鼠的特异性抗体和IFN γ,通过MTT实验检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖实验 ,通过乳酸脱氢酶 (LDH)实验检测小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)反应。结果 酶切及测序结果表明成功地构建了HIV 1gag基因核酸疫苗 ;与空载体pCI neo组比较 ,pCI neoGAG免疫组小鼠血清的抗HIV 1p2 4抗体滴度和IFN γ均升高 (P<0 0 1)。pCI neoGAG免疫组小鼠的脾淋巴细胞增殖实验刺激指数 (SI)以及特异性CTL活性均高于空载体pCI neo组 (P<0 0 1)。结论 构建的针对我国HIV 1流行株的gag基因核酸疫苗免疫小鼠可以诱导特异性体液和细胞性免疫应答 。

无症状期HIV感染者外周血T细胞亚群含量、PD-1/PD-L1表达量与病毒载量的关系

目的:研究无症状期HIV感染者外周血中不同T细胞亚群含量、PD-1/PD-L1表达量与病毒载量的关系。方法:选择在我院就诊的无症状期HIV感染患者作为研究的HIV组,同期体检的健康者作为对照组,采集外周血检测CD3^+CD4^+CD8-、CD3^+CD4-CD8^+、CD4^+CD25^+Foxp3+、CD4^+CD25^+CD127low/-细胞含量以及PD-1/PD-L1表达量。结果:HIV组外周血中CD3^+CD4^+CD8-细胞数目、百分比以及CD4^+CD25^+Foxp3+、CD4^+CD25^+CD127low/-细胞数目显著低于对照组,CD3^+CD4-CD8^+细胞数目及百分比、CD4^+CD25^+Foxp3+和CD4^+CD25^+CD127low/-细胞百分比、CD4^+T细胞表面PD-L1和PD-1的表达量显著高于对照组,CD8^+T细胞表面PD-L1、PD-1的表达量与对照组比较无显著差异;HIV组病毒载量越大,外周血中CD3^+CD4^+CD8-细胞百分比越低,CD3^+CD4-CD8^+、CD4^+CD25^+Foxp3+、CD4^+CD25^+CD127low/-细胞百分比以及CD4^+T细胞表面PD-1/PD-L1阳性百分比越高。结论:无症状期HIV感染患者的免疫特征是CD4^+T细胞数目减少、CD8^+T细胞数目增多且CD4^+CD25^+Treg细胞的绝对含量减少、相对含量增多,PD-1/PD-L1途径是HIV作用于CD4^+T细胞的分子机制。

SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测HIV-1前病毒方法的建立及应用

目的建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR技术测定HIV-1前病毒载量方法,并以其观察相关病毒进入抑制剂对HIV-1前病毒的作用。方法选择HIV-1的gag和env保守区域设计引物,建立SYBR Green I荧光定量PCR测定HIV-1前病毒载量的体系,并以其观察6μg/ml^6 ng/ml的重组病毒巨噬细胞炎症蛋白(rvMIP)、逆转录酶抑制剂(AZT)、膜融合抑制剂(T-20)、rvMIP+AZT、rvMIP+T-20对HIV-1前病毒载量的影响。结果所建立的荧光定量PCR体系的检测下限为101Copies,其标准曲线的相关系数为0.998 9,斜率为-4.925,截距为35.70;除6ng/ml的rvMIP、AZT、T-20外,三种药物处理后HIV-1前病毒载量均显著减小(P<0.05),并呈质量浓度依赖性;联合用药者前病毒载量显著低于单用rvMIP者(P<0.05),HIV-1前病毒载量rvMIP+T-20(rvMIP+AZT(rvMIP(T-20(AZT。结论本研究建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法具有灵敏、快速、准确及成本低廉等优点;与T-20或AZT联用可增强rvMIP对HIV-1前病毒的抑制作用。

液相芯片法验证蛋白质免疫印迹试验检测HIV-1结果的敏感性和特异性

目的初步分析采用液相芯片法研制人类免疫缺陷病毒(HIV)-1检测试剂的可行性。方法采用液相芯片技术用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测HIV-1阳性和阴性的标本;用HIV-1的gp120、gp41、p24抗原分别包被不同编号的免疫磁珠,与生物素化二抗、亲和素化荧光染料PE组成液相芯片检测系统,对标本进行检测分析。结果 55份标本经Western Blot法确认阳性样本检测符合率为100%;76份经酶联免疫吸附试验(ELISA)初检和复检阴性的标本检测HIV-1gp120、HIV-1gp41、HIV-1p24抗原均为阴性;86份经ELISA法检测初检和复检为阳性而Western Blot法确认为阴性的样本,其HIV-1gp120、HIV-1gp41、HIV-1p24单片段检测均为阴性。液相芯片法检测HIV-1抗体的敏感度和特异度均为100%。结论采用液相芯片技术组成的HIV-1抗体检测系统,其敏感度和特异度均优于ELISA法检测。

发酵支原体抗HIV-1免疫致病机理的研究

目的 :探讨人类免疫缺陷病毒 (humanimmunodeficiencyvirus ,HIV)感染过程中伴随的白细胞介素 10 (IL 10 )水平升高是否与合并发酵支原体 (mycoplasmafermentans,M .fermentans)感染有关以及IL 10对人外周血单个核细胞 (peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)中HIV 1复制的作用。方法 :采用不同浓度的M .fermentansPG18株 ,用ELISA法检测其对正常人PBMC及HIV 1感染人PBMC产生IL 10的诱导活性 ;同时 ,以HIV 1p2 4抗原为指标 ,用ELISA半定量法检测人重组IL 10 (rHuIL 10 )在体外对人PBMC中HIV 1复制的作用。结果 :M .fermentans能显著诱导正常人PBMC及HIV 1感染人PBMC产生IL 10 ,与正常人PBMC相比 ,M .fermentans对HIV 1感染人PBMC产生IL 10的诱导活性更强 ;用rHuIL 10处理的人PBMC在感染后第 6天对HIV 1的复制产生了抑制作用 ,抑制作用随rHuIL 10剂量增加而加强 ,感染前 2d较感染后 1d加入rHuIL 10产生的抑制作用显著。结论 :M .fermentans与HIV感染过程中IL 10水平升高有关 ;IL 10可抑制人PBMC中HIV 1的复制 ;M .fermentans可能通过产生IL 10参与并维持 (acquiredimmunodeficiencydiseade ,AIDS)

NEAT-1、PD-1、ADAM17在中老年HIV感染患者中表达及其与T淋巴细胞亚群的相关性

目的分析转录本(NEAT)-1、程序性死亡受体(PD)-1、解聚素-金属蛋白酶(ADAM)17在中老年人类免疫缺陷病毒(HIV)感染中的表达及与T淋巴细胞亚群的相关性。方法选取2019年1月至2020年1月在西南医科大学附属医院就诊的67例中老年HIV感染患者作为HIV组,并选取在医院进行健康体检的53例作为对照组进行对比。采用荧光定量PCR检测NEAT-1、PD-1、ADAM17水平;采用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群在中老年HIV感染中的表达及相关性。结果与对照组相比,HIV组NEAT-1、ADAM17水平、CD4^(+)细胞、CD4^(+)/CD8^(+)细胞比值均显著降低,PD-1水平和CD8^(+)细胞显著升高(P<0.05);NEAT-1、PD-1、ADAM17、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)为影响HIV感染发生显著因素(P<0.05);NEAT-1、ADAM17与CD4^(+)/CD8^(+)比值呈正相关(r=0.022、0.362,P=0.004、0.001);PD-1与CD4^(+)/CD8^(+)比值呈负相关(r=-0.441,P=0.001)。结论NEAT-1、ADAM17在中老年HIV感染中表达降低,PD-1表达水平升高,且与患者T淋巴细胞亚群相关,可用于判断病情。