人类全长功能基因克隆获重大进展

我国科学家参与的人类全长功能基因克隆研究获得重大进展：从4万多个基因中整合出2万多个功能基因，向进一步弄请其确切的功能和结构迈出了一大步，将加快某些疾病的诊断和治疗方法的研究，并对重组蛋白药物的研制有着重要失去作用。

一条人类砷相关新cDNA基因的克隆及功能预测

目的探讨砷化物与基因的相互作用,克隆砷相关基因,利用生物信息学分析克隆基因。方法利用SMART方法构建cDNA文库,杂交筛选并克隆基因,生物信息学对克隆基因进行结构和功能的分析。6μmol/LNaAsO2处理人正常肝L鄄02细胞2h,抽提RNA做基因芯片杂交。结果成功克隆一条新cDNA基因,生物信息学分析发现7到456有一个完整的ORF,在编码起始区有典型的Kozak序列,编码149个氨基酸的蛋白质。核酸同源性比对发现与人类1p36.2鄄36.3染色体DNA序列同源性达98%,编码蛋白质同Alu亚家族SB序列同源性达85%。染砷细胞基因芯片杂交发现克隆基因表达增高。结论克隆了人类砷相关基因,该基因编码蛋白质与Alu亚家族SB序列同源性高。

克隆人类全长功能基因获突破

据悉,我国科学家参与的人类全长功能基因克隆研究获得重大进展:从4万多个基因中整合出的2万多个功能基因,这将加快某些疾病的诊断和治疗方法的研究,并对重组蛋白药物的研制有着重要推动作用.

人类新基因电子克隆的自动化软件系统建立和实验验证与功能研究

2002年4月14日至17日在上海国际会议中心举行的第七届国际人类基因组大会(HUGO SEVENTHINTERNATION HUMAN GENOME MEETING,HGM2002)上,有5篇Poster论文获奖,包括英国、美国、俄国、中国台湾和中国大陆各一篇,中国大陆获奖的论文是北京大学人类疾病基因研究中心博士后张德礼、博士生丁培国、国家人类基因组北方研究中心研究生孙晓静、中国科学院生物物理研究所凌伦奖副研究员与陈润生研究员及本中心主任马大龙教授合作完成的研究论文《In Silico Cloning of Novel HumanGenes and Their Experimental Verification》(人类新基因的电子克隆和实验确认)(第71号Poster)。 国际人类基因组大会由国际人类基因组组织(Human Genome Organization,HUGO)主办,前六届均在发达国家召开。第七届国际人类基因组大会是HUGO首次在发展中国家举行,来自世界各地的2000多名正式代表参加了会议。 会议口头发言分大会报告、专题报告和小组报告三种形式,我国只有陈竺和于军教授分别作了题为《Acute promyelocytic leukemia-a model of functional genomics study of leukemia》和《Moreto do,and more to learn》的大会报告,我国没有人作专题和小组报告,可见资金投入和研究水平亟待提高。

人类新基因MATH2的克隆及其功能初步分析

通过测序和采用生物信息学分析方法 ,从人胎脑 c DNA文库内得到了一条长 2 .175 kb的 c DNA序列 ,其开放读框编码含 337个氨基酸的蛋白 .推论该蛋白与鼠 MATH2蛋白有 98%的同源性 ,故将新基因定名为人 MATH 2基因 .推论该基因定位于人染色体 7p14- 15 .Northern杂交结果显示该基因只在人脑内特异表达 ,在1.7kb和 2 .4kb处出现特异性条带 .人 MATH2蛋白可能与鼠 MATH2蛋白具有相似的功能 .

基因组研究中全长cDNA克隆的策略

全长cDNA的克隆是目前人类基因组研究中的一个重要方面 ,与大规模基因组测序相比较 ,cDNA测序克隆用相对较少费用获得更多的功能基因信息 ,故也是符合我国国情的基因组研究的主要方向。如何更加高效地获得新的全长cDNA ,本文结合作者自己工作中的经验 ,对从全长文库的建立到全长cDNA的测序及克隆方法作了较为详细的介绍。

人类抗凋亡基因survivin的克隆及其原核表达

目的:克隆人类抗凋亡基因survivin(SVV),实现SVV基因在大肠杆菌中的高效表达. 方法:提取胃癌细胞系SGC-7901总RNA,RT-PCR扩增人SVV全长cDNA,克隆载体pGEM-T,酶切、测序鉴定.将人类SVV基因全长cDNA克隆入原核表达载体pRSET,实现该基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效表达. 结果:得到人SVV基因全长cDNA,经测序与SVV基因的已知序列相同,原核表达所获融合蛋白经SDS-PAGE电泳与已知SVV基因的蛋白质表达产物大小相近. 结论:克隆出人SVV基因的全长cDNA,并克隆入原核表达载体pRSET,并在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达.

新功能基因的识别与验证-PDCD5猪同源基因的电子克隆与Ontology分析

随着生命科学的发展,＂人类基因组计划＂大规模测序工作的完成,新基因的搜寻和蛋白功能分析成为研究的热点。在本实验中,我们以人的PDCD5序列（NM-004708）为线索,经过Blast,EST支持情况,拼接得到猪的同源序列,nr查新,多物种EST数据库支持分析.

“功能基因组和生物芯片”重大科技专项人类病症相关基因研究取得进展

科技部“功能基因组和生物芯片？重大科技专项目前共克隆鉴定了676个人类新基因，在人类重大疾病诊治等方面功能明确的基因278个、包括126个有重要生理功能基因，57个与肝癌有关的基因，49个与高血压、冠心病、糖尿病等相关基因，27个与心血管疾病及血糖调节相关新基因，19个与心血管及血糖调节相关功能基因；

美成功用转基因鸡蛋生产人类单克隆抗体

据医学空间网9月2日报道，科学家们联合运用干细胞技术和转基因技术，首次用鸡蛋生产出全功能的人类单克隆抗体。

汉族人群中22个HLA-Cw等位基因全长序列单核苷酸多态性分析

为探讨HLA-Cw(Human leukocyte antigen-Cw)基因全长序列分子遗传多态性,文章对28个HLA-Cw基因型已知的汉族个体样本,采用长距离PCR技术和高保真性的Pfu酶,扩增HLA-Cw基因全长序列4.5kb,进行分子克隆和单倍体测序。采用群体遗传学研究方法分析了HLA-Cw等位基因全长序列中各亚区的单核苷酸多态性。结果表明:在28个样本中共检测出22种等位基因,序列均已提交GenBank和国际IMGT/HLA数据库并获得了认可;其中Cw*0706、Cw*030301、Cw*140201的全长序列为首次报道,尤其是Cw*0706内含子序列的获得,能够重新设计对该等位基因测序分型的引物,避免测序分型中可能对这一等位基因的漏检。将28个样本的56条单倍体序列用Clustal软件进行序列排比,输入到DnaSP4.0进行多态性分析,共发现244个SNPs,10处插入/缺失多态性。对HLA-Cw等位基因各亚区多态性的分析,发现第4内含子及以前并没有受到关注的第5外显子受到平衡选择的作用,在进化中受到了选择压力,预示着它们在免疫系统的进化过程中可能扮演着重要的角色。

基因芯片在内耳基因功能与突变检测中的应用

基因芯片又称DNA芯片，寡核苷酸微阵列等，是在人类基因组计划实施过程中出现并发展起来的。它融合了多领域的各项技术，具有高通量、高集成、微型化和自动化的特点，能够高效平行地处理和应用日益庞大的基因组信息，被称为继单克隆抗体技术和PCR技术之后生命科学中的又一重大技术创新，在序列分析、新基因的发现、基因表达谱分析、

2813条全长人类新基因编码蛋白质的功能预测

用生物信息学序列分析方法对联合基因科技 (集团 )公司 2 813条全长人类新基因编码的蛋白质进行了功能预测 .由WU BLASTP核酸序列相似性分析结果表明P值小于le 2 0的基因合计有 46 6条 ,占总分析基因的 16 .5 7% ,P值在le 10以下的基因合计有 5 6 5条 ,占总分析基因的 2 0 .0 9% ;由蛋白质结构域分析结果表明 ,含PROSITEpattern的基因有 5 2 0条 ,代表了 10 7种 pattern ;含PROSITEprofile的基因有 333条 ,代表了 2 0 0种profile ;含PFAM结构域的基因有 45 7条 ,代表了 2 41个family ;含PRINTS的家族指纹 1型 (class1)的基因有 12 8条 ,指纹 2型 (class2 )的有 18条 ,总数为 146条 ,代表了 45种家族指纹 ;由特殊结构分析表明 ,跨膜蛋白 470条 ,分泌蛋白 6 77条 ,Coiled coil蛋白 2 2 8条 ,Helix turn helix蛋白 73条 .

中国人类功能基因克隆与鉴定研究的文献与专利分析

人类基因组计划于20世纪80年代末启动.与此同时,各国的人类功能基因鉴定和克隆工作也相继开展.中国相关领域的研究人员敏锐地意识到对这一新兴领域的探索必将给生命科学和人类健康带来深远的影响,并于20世纪90年代开始相关的研究.为加快中国在该领域的发展步伐,20世纪90年代中期,中国高技术研究发展计划("863"计划)生物领域专家委员会提出了"两个百分之一"的目标,即测序工作量占人基因组测序总量的百分之一,克隆和鉴定的人类功能基因占人类基因总数的百分之一.近20年来,中国在基因组测序和功能基因组研究领域已取得了长足进步.为人们所熟知的成果就是中国承担的人类基因组计划"百分之一"测序任务的完成.然而,关于中国克隆和鉴定人类功能基因"百分之一"的工作则未见有完整报道.本文利用美国国立生物技术信息中心(NCBI)GenBank数据库、PubMed文献搜索工具和中华人民共和国国家知识产权局专利检索数据库,以中国首先发表文章报道人类新基因的克隆与鉴定及人类基因序列是否获得授权专利为筛选标准进行检索分析,截止2011年6月底,确定的由中国报道的人类功能新基因共589个,并且授权的基因序列专利共159条(http://gene.fudan.sh.cn/introduction/database/chinagene/chinagene.html).本文系统地总结了中国在人类功能基因组学研究上的成果,回答了中国在人类功能基因克隆和鉴定方面"百分之一"的工作是否完成的问题.

广州复能基因有限公司

广州复能基因有限公司（以下简称“复能基因”）是由美国Gene Copoeia公司和中国投资者合资组建的一家高新技术企业。美国Gene Copoeia公司是全世界最大的基因克隆供应商之一,其专注于基因组学和蛋白组学领域并拥有多项国际专利。复能基因成立于2000年,是一家主要集中研究基因功能的生物技术企业。成立以来,复能基因一直致力于为生物学和生物医学研究领域的研究创新和产品开发提供新技术、

HLA-Cw基因全长序列分子克隆及测序方法的建立

目的建立可靠的HLA-Cw基因全长序列的分子克隆和测序技术。方法设计合成HLA-Cw基因全长序列PCR引物和探索PCR反应体系，采用长距离PCR技术，扩增HLA-Cw基因非翻译区（untranslatedregion，5′-UTR）区、8个外显子、7个内含子和3′-UTR区，全长约4．5kb。PCR产物纯化后进行分子克隆，筛选阳性克隆，提取质粒DNA，采用自行设计的测序引物进行全长双向测序。12份已经AlleleSEQRHI。A-Cw测序分型试剂盒进行PCR产物直接测序、基因型已知的样本，分别用TaKaRaLATaq酶和StratagenePfuTaqDNA聚合酶进行HI，A-Cw基因全长扩增，以及PCR产物分子克隆和序列测定，克隆测序结果分别与PCR产物直接测序结果进行对比分析。结果PCR扩增获得了特异性目的片段，测序获得了HLA-Cw基因-962～3576位碱基全长序列。克隆测序结果的对比表明，Pfu酶保真性高于LATaq酶。比较本文测定的Cw＊010201与Cw＊07020101等位基因序列，在5′上游-962～-284位碱基区域存在11个单核苷酸多态（single nucleotide polymorphisms，SNPs）和2个插入（或）缺失多态性位点；3′-UTR下游3067～3576位碱基区域存在11个SNPs和1个插入（或）缺失。结论建立了HLA—Cw基因全长序列分子克隆及测序方法，在HLA—Cw基因全长序列分子多态性及表达调控等研究领域，具有广泛应用前景。