人类内源性逆转录病毒与类风湿关节炎相关

据Medscape．com5月1日报道（原载Ann Rheum Dis 2006：65：612-616），英国科学家指出，与健康对照人群或者骨关节炎患者相比，类风湿关节炎（RA）患者的人类逆转录病毒（HERV）-K10 mRNA表达增加，提示该病毒可能与这种自身免疫疾病的致病性相关。大约8％的人类基因由HERV衍生，并通过种系垂直传播，少数情况下可能会产生HERV—K病毒颗粒。

免疫检查点T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域、人内源性逆转录病毒-H长端重复相关蛋白2在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的分析免疫检查点T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域(VISTA)、人内源性逆转录病毒-H长端重复相关蛋白2(HHLA2)在子宫内膜癌(EC)中的表达及临床意义。方法选取2017年9月至2019年10月唐山市妇幼保健院收治的120例的EC患者作为研究对象,收集其的EC组织和癌旁正常组织。检测EC组织和癌旁正常组织VISTA、HHLA2的表达;采用Spearman分析免疫检查点VISTA、HHLA2的相关性;Kaplan-Meier分析VISTA、HHLA2与预后的关系;Cox回归分析影响EC患者预后的危险因素。结果EC组织中VISTA、HHLA2阳性表达率显著高于正常癌旁组织(P<0.05)。Spearman相关性结果显示EC组织中VISTA与HHLA2表达呈正相关性(r=0.587,P<0.05)。EC组织中VISTA、HHLA2表达与临床病理特征有关(P<0.05)。Kaplan-Meier曲线结果显示VISTA阳性表达患者3年生存率低于阴性表达患者(χ^(2)=11.864,P<0.05),HHLA2阳性表达患者3年生存率低于阴性表达患者(χ^(2)=4.975,P<0.05)。Cox回归分析结果显示VISTA和HHLA2是影响EC患者预后的危险因素(P<0.05)。结论免疫检查点VISTA、HHLA2在EC中高表达,其是影响EC预后的危险因素,二者可能是有价值的预后标志物。

人内源性逆转录病毒-H长末端重复关联蛋白2在人食管胃交界腺癌组织中的表达

目的探索新型免疫检查点人内源性逆转录病毒-H长末端重复关联蛋白2(HHLA2)在人食管胃交界腺癌组织中的表达及其临床意义。方法选取2016年3月至2018年6月安阳市肿瘤医院收治的食管胃交界腺癌患者126例作为研究对象,采用免疫组化染色检测食管胃交界腺癌和癌旁正常组织中HHLA2表达,随访终点为患者死亡。采用COX回归风险模型进行多因素生存分析,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线。结果HHLA2在食管胃交界腺癌组织中阳性表达率为68.9%(78/126),高于癌旁正常组织的21.1%(27/126)(χ^(2)=42.465,P<0.001)。多因素COX分析显示,TNM分期、HHLA2表达是患者总生存期的独立预后因素(HR=4.217,P<0.001;HR=2.467,P=0.003)。高表达HHLA2和低表达HHLA2的食管胃交界腺癌患者5 a生存率分别为24.4%和56.3%(χ^(2)=21.140,P<0.001)。结论HHLA2在食管胃交界腺癌组织中表达升高,且与患者总生存期存在相关性;高表达HHLA2和TNM分期进展是导致患者总生存期缩短的独立危险因素。

异种肝肾联合移植中猪内源性逆转录病毒的检测

目的检测猪内源性逆转录病毒(PERV)基因在异种肝肾联合移植供受体中的表达,以期为PERV的跨物种传播提供参考依据。方法以6基因编辑猪恒河猴肝肾联合移植的组织样本作为研究对象,采用RT-PCR和PCR技术检测移植前后供受体不同组织中PERV编码基因、PERV各亚型以及猪线粒体细胞色素B基因的表达情况。结果供体猪的不同组织中存在PERV编码基因gag和pol、PERV-A和PERV-B亚型以及猪线粒体细胞色素B基因,但不存在PERV-C亚型。移植终点时受体不同组织中均未检出PERV基因序列。结论基因编辑猪恒河猴异种肝肾联合移植受体存活的14 d内没有发生PERV的跨物种传播。

异种移植中猪内源性逆转录病毒的传播

器官移植是治疗各类终末期疾病最有效的手段,为了解决器官移植中供体短缺的问题,人们开始探究异种移植的可能。猪是异种器官移植常见的供体来源之一,猪器官作为连接两个物种间的桥梁,其携带的病毒有可能在物种间传播并存在引起人畜共患病的风险。猪内源性逆转录病毒(PERV)整合在基因组中,是一种跨物种传播的逆转录病毒。本文介绍了PERV传播特性的影响因素、PERV及其重组病毒的传播风险以及异种移植试验中PERV的检测与传播风险评估,以期为缓解器官移植供体严重短缺的现状,推动异种移植技术的发展提供参考。

小鼠内源性逆转录病毒Gag抗原在胰岛的表达及单克隆抗体的制备

目的探究一种新发现的与1型糖尿病(T1D)相关的T细胞抗原[内源性逆转录病毒(ERV)的组特异性抗原(Gag)]与T1D发病的关系。方法首先对一个从非肥胖糖尿病(NOD)模型小鼠胰岛获得的Gag抗原(Gag 194)的氨基酸序列进行分析[多肽位置:193-210(VSRLRGRRDPPAVDSTTS)],确定Gag 194多肽作为靶点,制备单抗;然后,再利用ELISA和Western blot检测单抗的特异性;最后,在免疫组织化学实验中检测不同年龄的T1D敏感的NOD小鼠与抗性的C57BL/6小鼠胰腺Gag抗原表达的差异性。结果成功制备了5株(1F4C8、2D4C6、3C3B9、4D6B3、5F9E4)IgG2b亚型的小鼠ERV Gag单抗;5株单抗的敏感性及特异性具有差异;其中,生物素化后的3株单抗(1F4C8、2D4C6、5F9E4)能特异识别NOD小鼠胰腺中表达的ERV Gag抗原且该抗原的表达可在3周龄的NOD小鼠检测到,Gag抗原多表达在NOD小鼠胰岛β细胞区域内,而非淋巴细胞浸润的区域。此外,C57BL/6小鼠的胰腺Gag抗原的表达为阴性。结论在NOD小鼠幼年时期ERV Gag抗原就已经开始表达,该抗原的表达可能受其特异的基因调控。

南通市HIV合并HBV感染者抗逆转录病毒疗效及影响因素分析

目的:了解人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染者合并乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的感染现况和特征,分析HIV/HBV合并感染者抗逆转录病毒治疗(anti-retroviral therapy,ART)效果及影响因素。方法:选取南通市2016年1月—2021年12月新确诊的HIV感染者为调查对象,根据乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)检测结果分为HIV单独感染组1 830例和HIV/HBV合并感染组135例,比较两组患者ART前HIV感染特征,分析ART后HIV病毒学抑制和CD4+T淋巴细胞变化情况,以评估免疫功能改善情况及影响因素。结果:HIV/HBV合并感染者ART前免疫受损重于HIV单独感染者。接受ART后,HIV单独感染组和HIV/HBV合并感染组的CD4+T计数总体上均随治疗时间延长呈上升趋势,ART 2年后,两组患者的HIV病毒学抑制率均为90%以上。单因素和多因素Logistic回归分析均显示开始ART的年龄增加、初始CD4+T <200个/μL、初始HIV RNA≥4.5[lg(copies/mL)]是影响免疫重建的危险因素。随治疗时间的延长,免疫重建良好率有增加趋势。在ART前合并HBV感染加重HIV感染者的免疫损伤,因而可能影响免疫重建。结论:HBV感染可加重HIV感染者的免疫损伤,现行HIV/HBV合并感染的ART策略可有效抑制双重感染,有利于HIV/HBV合并感染者的免疫重建。在感染者的干预管理中,ART及疗效监测均存在不足,临床诊疗活动需进一步规范。

人类内源性逆转录病毒在多发性硬化症发病机制中作用的研究进展

多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)是一种复杂的中枢神经系统(central nervous system,CNS)自身免疫性脱髓鞘疾病,主要病理特征为免疫细胞的浸润及随之出现的神经炎症反应、脱髓鞘反应及神经元损伤,其发病机制目前尚未明确。人类内源性逆转录病毒(human endogenous retroviruses,HERV)是一大类RNA病毒,其特征是编码逆转录酶,并能将病毒基因组整合至宿主基因组中。HERV及其表达产物与MS的发病机制密切相关。因此,本文就HERV与MS的相关性、HERV在MS发病机制中的作用及MS的治疗作一综述。

接受不同抗逆转录病毒治疗方案的HIV感染者血浆中可溶性炎症标志物水平差异研究

目的探究接受不同抗逆转录病毒治疗(ART)方案的人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者血浆中可溶性炎症标志物表达水平的差异。方法选取2019年6月至2021年6月于海南省中医院就诊的初诊HIV感染者100例,随机将患者分为非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI)组和整合酶链转移抑制剂(INSTI)组,各50例。所有患者基础用药为恩曲他滨替诺福韦片,NNRTI组患者联用依非韦伦片,INSTI组患者联用拉替拉韦钾片。分别于治疗前及治疗6个月后随访,比较两组患者血生化指标、T细胞计数、病毒学指标、炎性细胞因子表达。结果治疗6个月后两组患者血生化指标、T细胞计数、病毒学指标及血浆炎性细胞因子表达水平较治疗前均有显著差异(P<0.05),且INSTI组患者各项指标改变更显著(P<0.05)。结论相比NNRTI,应用INSTI更有助于降低HIV感染者全身炎症水平,且药物抑制病毒效果显著。

PBMCs中miR-21、miR-223表达与HIV/AIDS患者抗逆转录病毒治疗效果的相关性

目的探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)/获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者抗逆转录病毒治疗效果与外周血单个核细胞(PBMCs)中微小RNA(miR)-21、miR-223表达水平的关系。方法选取2020年3月至2022年3月期间南通市第三人民医院门诊就诊行抗逆转录病毒治疗的142例HIV/AIDS患者为观察组,根据其治疗效果分为有效组(n=110)和无效组(n=32);选取同期体检健康者139例为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测PBMCs中miR-21、miR-223表达水平;采用多因素Logistic回归分析HIV/AIDS患者抗逆转录病毒治疗无效的影响因素。结果观察组PBMCs中miR-21、miR-223表达水平高于对照组(P<0.05)。无效组治疗后3个月、治疗后6个月、治疗后12个月的PBMCs中miR-21、miR-223表达水平均高于有效组(P<0.05)。有效组随治疗时间延长,PBMCs中miR-21、miR-223表达水平逐渐降低(P<0.05)。无效组治疗前世界卫生组织(WHO)分期3期患者比例高于有效组(P<0.05)。miR-21、miR-223、治疗前WHO分期3期是影响HIV/AIDS患者抗逆转录病毒治疗无效的独立危险因素(P<0.05)。结论miR-21、miR-223在一定程度上可反映HIV/AIDS患者抗逆转录病毒治疗效果,治疗无效患者PBMCs中miR-21、miR-223表达水平相对较高。

人类内源性逆转录病毒在自身免疫病发生发展中作用的研究进展

人类内源性逆转录病毒(human endogenous retroviruses,HERV)是过去的逆转录病毒感染在人类基因组中的残留物,并已涉及人类生物学的不同方面.相关基因元件形成504个不同的家族,占人类基因组的8%.HERV编码活性逆转录病毒蛋白,其可能在体内发挥重要的生理功能,也可能参与肿瘤、自身免疫病、神经和感染性疾病的发生发展.自身免疫病是一组与自体反应性B细胞和T细胞应答有关的异常免疫反应.已确定的自身免疫病有80多种,这些疾病中最常见的疾病包括系统性红斑狼疮、多发性硬化症、Ⅰ型糖尿病、类风湿性关节炎等,现就HERVs与自身免疫病发病的相关性研究进行综述.

抗逆转录病毒疗法对艾滋病病人肠道菌群影响的研究进展

艾滋病是一种人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)引起的免疫缺陷疾病,目前普遍通过高效的抗逆转录病毒疗法(antiretroviral treatment,ART)来降低病人病毒载量,延缓艾滋病进程。但由胃肠道菌群引起的消化道疾病、肿瘤等艾滋相关并发症仍然威胁着HIV感染者的生活和健康,同时ART的使用也会导致肠上皮黏膜屏障损伤及肠道免疫异常并肠道菌群平衡的破坏。该研究通过总结分析ART治疗后的艾滋病病人肠道菌群和免疫变化相关的研究,深入了解ART对肠道菌群的影响,为减轻抗逆转录药物对消化道的影响提供新的思路。

抗逆转录病毒药物不良反应分析及药学监护

探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者/获得性免疫缺陷综合征(AIDS)病人(HIV/AIDS患者)在进行抗逆转录病毒药物治疗(ART)中发生的药品不良反应(ADR)及其药学监护。方法 收集在我院新接受抗逆转录病毒药物治疗中的HIV/AIDS患者96例病历资料,按加入治疗队列顺序编号奇偶数分为干预组和对照组,对照组(47例)进行常规诊疗服务,干预组(47例)则由临床药师进行药学监护,随访时间均为1年。分析2组ADR发生时间、累及系统或器官和临床症状,探究其实施药学监护方法。结果 干预组有20例(40.82%)HIV/AIDS患者发生不同程度的ADR,对照组报告41例(87.23%) ADR,干预组ADR发生率明显低于对照组(P<0.05)。ADR所累及系统或器官主要在中枢神经系统、消化系统及皮肤。结论 接受ART的HIV/AIDS患者容易发生ADR ,临床应重视抗逆转录病毒药物的ADR及药物相互作用,临床药师对HIV/AIDS患者实施药学监护可减少ADR发生率,加强药学监护,以确保用药的有效性和安全性。

湖南沙子岭猪内源性逆转录病毒的研究

为评价从猪到人异种移植的生物安全性提供依据,从湖南沙子岭猪的保种群内随机采集31头个体的耳样组织,应用PCR和RT-PCR技术分别检测这些组织中内源性逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)的前病毒DNA和mRNA,并对PCR扩增的灵敏性进行评估。多组织RT-PCR检测3头沙子岭猪肾、心、肝、肺、脾等组织中PERV的表达情况,了解其在各组织中的分布情况;最后,扩增、测序该猪种的env基因,结果用NCBI中的BLAST软件进行分析。PCR和RT-PCR结果表明,所检测的31头沙子岭猪均带有PERV前病毒DNA,耳样组织中均有PERV mRNA表达,其中有2头个体携带env-A、env-B、env-C3种囊膜蛋白基因,而其余的29头个体只带有env-Ae、nv-B两种囊膜蛋白基因,未检测到env-C基因。多组织RT-PCR扩增结果表明,3头沙子岭猪的肾、心、肝、肺、脾等组织中,pol、gage、nv-A、env-B基因均有表达,未检测到env-C基因表达。测序沙子岭猪的env基因,结果发现,沙子岭猪env-B和env-C基因与其他猪种序列比较分别存在2和10个碱基的差异,而env-A基因序列没有差异,说明不同的猪种之间env基因存在多态性。以上结果表明,沙子岭猪种群携带PERV,其亚型主要以PERV-A,B为主;PERV在该猪种肾、心、肝、肺、脾等多种组织中的分布没有明显组织特异性,且93.5%(29/31)个体表现为env-C基因缺失,提示沙子岭猪作为候选猪种可能在异种移植中具有较好的应用前景。

中国两种地方猪种内源性逆转录病毒的亚型分析

目的 对两种中国地方猪种 (五指山猪和版纳微型猪近交系 )的 86头个体进行猪内源性逆转录病毒(PERV)亚型分析。方法 取引物 Env A、Env B和 Env C分别用于鉴定 PERV的 A、B和 C亚型 ,并对 86头个体进行PCR法分析。结果 在所有被检测个体中 ,77.9%的个体的基因组中同时有 PERV的 A、B两种亚型 ,另外 2 2 .1%的个体的基因组中则只有 PERV的 A或 B亚型 ;所有个体的外周血白细胞中均未检测到 PERV的 C亚型。结论 PERV在中国五指山猪和版纳微型猪近交系的外周血白细胞中只有 A、B两种亚型 ,并且以

湖南大围子猪内源性逆转录病毒的研究

目的:研究湖南大围子猪携带的内源性逆转录病毒(porcineendogenousretrovirus,PERV),为评价从猪到人异种移植的生物安全性提供依据。方法:从湖南大围子猪的保种群内随机采集42头个体的耳样组织,应用PCR和RT-PCR技术分别检测这些组织中PERV前病毒DNA和mRNA,并对PCR扩增的灵敏性进行评估。扩增、测序大围子猪的PERVenv基因,结果用美国生物信息中心(NationalCenterforBiotechnologyInformation)的BLAST软件进行分析。结果:所检测的42头大围子猪均带有PERV前病毒DNA,耳样组织中均有PERVmRNA表达,所有个体携带env-A,env-B和env-C3种囊膜蛋白基因。测序结果表明,大围子猪env-A和env-C与GenBank登录其他猪种序列(AY288779,AY534304)相比分别存在1和8个碱基的差异,而env-B基因没有碱基差异。结论:大围子猪种群携带PERV,而且均具有转录活性,亚型主要为PERV-ABC;大围子猪的PERVenv-A,env-C存在基因多态性,从生物安全性方面考虑,该猪种不宜作为异种移植供体。

山羊地方性鼻内腺瘤病毒和内源性逆转录病毒gag变异区的克隆与分析

根据病毒gag变异区的两端设计引物,PCR扩增ENTV及ERVs的gag变异区,TA克隆并测序,经比对分析发现,在ERVs的783位~803位的＂CCT＂重复序列,编码多聚脯氨酸＂PPPPPPP＂,对应在ENTV gag中存在缺失突变和点突变,编码氨基酸为＂PSL＂,生物信息学预测该区域的变异位于一个重要的抗原决定簇中,对gag在ENTV和ERVs中的功能有较大影响,为进一步研究gag的抗原性及相关免疫学检测方法的建立奠定基础。

湖南沙子岭猪内源性逆转录病毒的检测及亚型分析

为探明湖南沙子岭猪内源性逆转录病毒携带情况及病毒亚型分布,应用gag,pol特异性引物,对31头湖南沙子岭猪耳部组织的DNA,RNA样品进行了PCR,RT-PCR检测,依据env基因表型env-A,env-B,env-C,鉴定了每头猪携带PERV亚型.结果表明,在所检31头个体中,93.5%的个体基因组中同时有PERV的A,B 2种亚型(记为env-AB),另外6.5%的个体基因组中则同时有PERV的A,B,C 3种亚型(记为env-ABC),所有个体的耳样组织中均未检测到单独存在的PERV的A,B或C亚型.说明湖南沙子岭猪中存在PERV序列,且能以mRNA的形式表达,病毒亚型以env-AB为主.

内源性逆转录病毒在五指山小型猪体内存在状况的分子微生物学调查

根据猪内源性逆转录病毒(PERV)的核心蛋白(gag)基因、多聚酶(pol)基因、囊膜(env)基因和β-肌动素(β-actin)基因核酸序列设计并筛选特异性引物6对,利用PCR方法对五指山小型猪PERVgag、pol和env基因存在情况进行系统检测;利用半定量RT-PCR方法对五指山小型猪PERVgag、pol和env基因在心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉7个组织中的表达情况进行系统检测与分析。结果显示,在202个被检样品中,gag、pol基因和envB基因亚型均存在,envA基因亚型仅3个样品未发现,envC基因亚型共检出34个,检出率为16.8%。所测试的7个组织均表达gag、pol和env基因序列,但envC仅在1头个体的组织中表达。各组织gag mRNA丰度以肾脏为最高,其次为肺、心、肝、脾,脑和肌肉组织的丰度最低。各组织pol mRNA丰度以肾脏为最高,其次为脾、肺、肝、心,肌肉和脑组织的丰度最低。各组织envA、envB mRNA丰度信号强度分布与gag、pol信号类似,亦以肾脏为最高,脑和肌肉组织的丰度最低。各组织envC mRNA的信号强度明显低于envA、envB。以上结果表明,在五指山小型猪中存在PERV,且在各组织中的表达量有差异。

猪肝细胞和培养上清液中猪内源性逆转录病毒的检测

建立了猪肝细胞及其培养上清液中猪内源性逆转录病毒(PERV)的检测方法,探讨了其在猪肝细胞生物人工肝应用中的意义。以PERVgag基因为靶序列,选用特定的引物,PCR检测中国实验用小型猪肝细胞PERV前病毒DNA;RT-PCR检测猪、犬、大鼠以及HBV阳性病人血清和猪肝细胞培养6h、24h时的上清液PERVRNA,同时检测猪肝细胞猪线粒体DNA(mtDNA)。研究结果表明:检测5份中国实验用小型猪血清、肝细胞及培养猪肝细胞24h时的上清液PERV均为阳性,而5份培养猪肝细胞6h时的上清液、5份犬血清、5份大鼠血清和5份HBV阳性病人血清PERV检测结果均为阴性,猪肝细胞中均可检测到猪mtDNA。因此,中国实验用小型猪肝细胞携带PERV;PERV可释放到血清中;猪肝细胞培养24h后该病毒颗粒已释放到培养液中;PCR和RT-PCR方法检测PERV具有特异性强、简便的特点。