PCR用于诊断人类埃立克体病方法的建立

[目的 ]建立一个快速、简便的检测埃立克体感染的实验方法 ,用于人类埃立克体病的临床诊断及分子流行病学调查。 [方法 ]用查菲埃立克体分离株 (91HE17)感染犬巨噬细胞 (DH82细胞 ) ,感染 40天后收集 DH82细胞。根据查菲埃立克体 16 S r RNA基因序列设计引物 ,特异性扩增查菲埃立克体 DNA。运用限制性片段长度多态性分析对PCR扩增产物进行鉴定。 [结果 ]扩增产物经过 1.5 %琼脂糖凝胶电泳和 5 %聚丙烯酰胺凝胶 (PAGE)电泳分析 ,并用PGEM- 3Z(+ ) /Hae DNA Marker作为核酸分子量参照物 ,证实扩增产物是查菲埃立克体 16 S r RNA基因序列的389bp核酸片段。将扩增产物用 Hae 消化后 ,进行限制性片段长度多态性 (RFL P)分析。产生预期 338bp和 5 1bp酶切片段。 [结论 ]引物 HE1和 HE3具有高度特异性。 PCR反应是具有高度敏感性和特异性 ,可作为对人类埃立克体病疫源地、传播媒介及储存宿主进行调查的有效方法。

人类埃立克体病综述

目前发现3种埃立克体可致人类埃立克体病,本文就人类埃立克体病的病原体生物学特征及其所致疾病作一个综述。